作者简介:樊凤艳,女,1976年生,硕士,主治医师,主要从事临床输血检验工作。
探讨不规则抗体导致ABO正反定型不符原因,并提出解决方法。
方法总结分析12例不规则抗体导致ABO正反定型不符血型血清学试验结果,通过不规则抗体筛查、不规则抗体鉴定、相应血型检测明确不规则抗体导致ABO正反定型不符确切原因,用相应抗原阴性红细胞重新进行ABO血型反定型。
结果12例标本中抗-M 4例,抗-N 1例,抗-M合并抗-N 1例,抗-Lea 1例,抗-P1 1例,抗-I 1例,抗-D 1例,抗-E 1例,抗-A1 1例。用相应抗原阴性红细胞重新进行ABO血型反定型,正反定型结果均相符。
结论不规则抗体是导致ABO正反定型不符的常见原因,经过适当处理可以正确鉴定ABO血型。
To investigate the factors of inducing the unconformity of forward and reverse ABO blood typing caused by irregular antibody.
MethodsThe results of serological tests of blood typing in 12 cases were analyzed, and the factors of irregular antibody inducing the unconformity of forward and reverse ABO blood typing were tested for irregular antibody screening and identification and corresponding blood typing determination. Reverse ABO blood typing were repeated with red blood cells which corresponding antigens were negative.
ResultsThe amounts of alloantibodies among 12 patients were 4 anti-M,1 anti-N, 1 anti-M combined anti-N,1 anti- Lea,1 anti- P1,1 anti-I,1 anti-D,1 anti-E and 1 anti-A1. The result of repeated reverse blood typing with corresponding antigens being negative blood cells matched forward blood typing.
ConclusionsSamples with unconformity of forward and reverse ABO blood typing caused by irregular antibody can be identified correctly.
ABO血型鉴定错误是导致溶血性输血反应的主要原因。ABO血型正反定型结果可以相互参照, 正反定型结果相符才能确保ABO血型鉴定的正确性。不规则抗体干扰是除去人为责任因素和试剂质量原因导致ABO血型正反定型不符的主要原因之一[1]。我们总结了12例不规则抗体导致ABO正反定型不符标本进行了分析。
曾于空军总医院就诊12例患者, 男4例, 女8例, 年龄1~77岁, 其中脊柱侧弯1例、子宫肌瘤1例、先天性心脏病2例、乳腺癌1例、白血病1例、直肠癌1例、健康查体2例、肺空洞1例、溶血性贫血1例、胸腔积液1例。
A、B、O细胞为本室自制, 不规则抗体筛选细胞、Rh分型卡购自瑞士达亚美公司, 抗-A、抗-B、抗-AB、抗-A1、抗-H、抗-D、抗-E、抗-M、抗-N、抗-Lea、抗-Leb、抗-P1、不规则抗体鉴定谱细胞均购自美国Immucor公司。
用试管法进行ABO血型正反定型, 反定型加做O细胞。反定型出现不规则抗体且O细胞反应为阳性时, 用盐水介质试管法进行不规则抗体筛选。不规则抗体筛选结果为阳性, 用相同方法进行不规则抗体鉴定, 并用试剂抗血清检测患者红细胞相应抗原进行验证。用相应抗原阴性细胞制备A、B细胞再次进行ABO血型反定型。
患者标本用不规则抗体相应抗原阴性细胞制备反定型细胞再次进行ABO血型反定型时, 12例标本正反定型结果均相符。
正确的ABO血型鉴定是保障安全有效输血最重要的步骤。ABO血型系统产生抗-A、抗-B是有规律的, 即A型人产生抗-B, B型人产生抗-A, O型人产生抗-A和抗-B, 这是符合Landsteimer规则的, 称为规则抗体。除ABO系统外, 其他系统产生的抗体均不符合Landsteimer规则, 称为不规则抗体。在盐水介质中能凝集红细胞的抗体又称盐水抗体, 多为IgM抗体[2]。常见的能产生盐水反应活性抗体的血型系统主要有MNS、Lewis、Rh、P等。
人血清抗-M是比较常见的不规则抗体, 一般认为抗-M是自然发生, 也可因输血或细菌感染而产生, 儿童尤容易产生, 婴儿比成人更易产生, 特别是烧伤患者更容易产生抗-M。绝大部分抗-M含有IgM成分, 78%同时存在IgG, 而这些IgG能在盐水介质中凝集红细胞[3]。在国内文献报道中抗-M是最常见的盐水反应性抗体[4, 5], 而在国外报道中抗-P1则最为常见。抗Lewis系统抗体却报道较少[6], 可能是人种的差异导致。抗-N抗体相对于抗-M抗体较少见, 大多数抗-N抗体是IgM, 表现为典型的冷凝集抗体。
Lewis系统抗体大多为IgM, 一般不经免疫刺激可自然产生。Lewis抗体大多在室温反应性最强, 在37 ℃也可以观察到反应但弱于室温反应。抗-Lea最常见是IgM类自然发生抗体, 在37 ℃一般不发生反应。ABO系统的一些抗体因不符合Landsteimer规则, 在一些文献中也被认定为是不规则抗体。ABO亚型反定型中出现不符合Landsteimer规则的抗-A或抗-B也是影响正反定型不一致的主要原因, A2、A3、Ax、Aend、Ael、B3、Bx、Bend、Bel、CisAB等ABO亚型常可出现不规则抗-A或抗-B[7]。反定型中加做抗A1c、A2c观察血清中是否有抗-A1, 或者加做吸收放散试验和或唾液血型物质的检测、分子生物学方法可以帮助血型的正确鉴定[8]。绝大部分Rh抗体是免疫抗体, 但少部分可能是自然发生的抗体, 如抗-E。绝大多数人血清抗-D是IgG类, 一些也会有IgM成分, IgM类抗-D可在盐水介质中直接凝集D阳性红细胞。大多数抗-S是免疫性抗体, 但也存在IgM性质的抗-S, 在盐水介质中能够凝集红细胞。人血清抗-P1一般是冷抗体, 且血凝反应很弱, 抗-P1 25 ℃以上不出现凝集反应, 极少能见到37 ℃反应的抗-P1。新生儿红细胞膜有大量i抗原, 而成人红细胞膜是I抗原。人体内最多见的冷自身抗体是抗-I冷凝集素, 在血清学反应中不仅O细胞表现为凝集, 自身对照也会发生凝集。
盐水反应性不规则抗体是导致ABO血型正反定型不符的主要原因之一, 当反定型出现O细胞凝集而自身对照为阴性时, 应用筛选细胞和谱细胞做抗体筛选及鉴定[9]。不规则抗体导致ABO正反定型不符时可以用相应抗原阴性红细胞进行ABO血型反定型。本研究中12例患者标本这样处理后ABO正反定型结果均相符。有时相应抗原阴性A、B红细胞不易获得, 可以用O型相应抗原阳性红细胞吸收掉血浆中相应抗体后再进行反定型。不规则抗体鉴定对ABO血型鉴定及交叉配血都有重要意义。在室温下呈≥ 1+凝集的盐水抗体, 在37 ℃绝大部分还是有反应的。即使37 ℃没有反应, 即所谓的没有临床意义, 为了安全起见输血时还是要选择相应抗原阴性血液, 以防止在抗原刺激下使抗体增强而引起输血反应。
The authors have declared that no competing interests exist.
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