Sysmex XE-2100全自动血液分析仪计数胸腹水有核细胞的评价
何银华, 颜宇飞, 蔡峥, 金立钢
上海市东医院检验科,上海 200438

作者简介:何银华,男,1955年生,主管技师,主要从事临床检验工作。

摘要
目的

观察Sysmex XE-2100全自动血液分析仪(简称XE-2100)白细胞计数通道(DIFF通道)计数胸腹水有核细胞的能力表现。

方法

按胸腹水中有核细胞的含量分为低浓度、高浓度2组标本,使用XE-2100(荧光化学染色光学法)检测,将所获得的DIFF通道数据与手工显微镜镜检法相比较。

结果

对于胸腹水总浓度、低浓度、高浓度区间DIFF通道与手工镜检法间相关系数( r)分别为0.988 2、0.928 5、0.976 8。

结论

XE-2100 DIFF通道与手工镜检法的相关性较好,可以适用于常规胸腹水标本的有核细胞计数。

关键词: 胸腹水; 有核细胞计数; 全自动血液分析仪
中图分类号:R466.11 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2011)04-0228-03
Evaluation of automatic hematology analyzer Sysmex XE-2100 for counting nucleated cells in hydrothorax and ascite fluid
HE Yinhua, YAN Yufei, CAI Zheng, JIN Ligang
Department of Clinical Laboratory,Shidong Hospital,Shanghai 200438, China
Abstract
Objective

To observe the performance of counting nucleated cells in hydrothorax and ascite fluids by leucocyte counting channel (DIFF channel) of automatic hematology analyzer Sysmex XE-2100 (XE-2100 analyzer).

Methods

The hydrothorax and ascite fluids were classified into 2 groups (low concentration group and high concentration group) according to the nucleated cell concentration. The samples were detected by XE-2100 analyzer (fluorescence dyeing optical assay), and the results from DIFF channel were compared with manual microscopy.

Results

The correlation coefficients ( r) of total concentration, low concentration and high concentration between DIFF channel and manual microscopy in hydrothorax and ascite fluids were 0.988 2, 0.928 5 and 0.976 8.

Conclusions

In the XE-2100 analyzer, the correlation between DIFF channel and manual microscopy is good, and it could be applied to count the nucleated cells in routine hydrothorax and ascite fluids.

Keyword: Hydrothorax and ascite fluid; Nucleated cell counting; Automatic hematology analyzer
引言

胸腹水有核细胞计数是常规检验的重要组成部分, 其对于临床医师鉴别诊断漏出液及渗出液、化脓性炎症积液、结核性积液、病毒感染、系统性红斑狼疮的多发性浆膜炎等具有重要意义。传统有核细胞计数法是应用改良牛鲍细胞计数板在显微镜下计数经冰醋酸溶解红细胞后的白细胞而实现的。该方法耗时费力且具有不精密度较大、受人为主观因素影响较多等缺憾, 但仍不失为金标准[1]。随着全自动血液分析仪对于血细胞分析技术的不断发展和完善, 其细胞计数功能亦延伸到了其他体液如浆膜腔积液、脑脊液的细胞计数等领域。特别是应用半导体激光和流式细胞术的白细胞光学法分析技术弥补了传统电阻抗法细胞分析技术的不足, 结合两者的新一代全自动分析仪具有白细胞计数分群准确、受干扰因素小、结果可信度高以及能带来多种衍生功能的优点。我们就应用Sysmex XE-2100全自动血液分析仪(以下简称XE-2100)对胸腹水有核细胞的计数能力进行评价观察。

材料和方法
一、材料

1. 仪器

XE-2100; 日本Olympus显微镜; 改良牛鲍细胞计数板。

2. 试剂

XE-2100配套进口试剂及e-check原厂质控; 冰醋酸溶液。

3. 标本

上海市市东医院住院患者胸腹水标本90例, 采集于乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝专用试管内(浙江玉环港北医用塑料厂)。

二、方法

1. XE-2100(仪器法)和手工镜检法计数胸腹水白细胞的相关性

在标本采集2 h内进行仪器全自动计数(荧光化学染色光学法)和手工镜检计数比对。仪器法计数白细胞。每天开机后做e-check质控, 确保各项参数在控。每次检测标本前, 都运行空白检测, 确保DIFF通道中白细胞计数为零, 方才开始测定, 方法同测定血液标本。双手来回搓动试管充分混匀胸腹水, 避免产生气泡, 在开放模式(CBC+DIFF)下运行检测过程, 检测结果在services菜单中读取。按《全国临床检验操作规程》手工镜检法计数胸腹水有核细胞。用管壁附着少许冰醋酸的玻璃微量吸管吸取充分混匀的标本, 待红细胞完全溶解后, 滴入改良牛鲍细胞计数板中, 计数上、下2个计数区域内的四角及中央共10个大格内的有核细胞数, 乘以106换算成每升有核细胞数[2]。手工镜检法与仪器法的一致性由在3个浓度区间内经回归分析评判:胸腹水总浓度08 000× 106/L; 低浓度0100× 106/L; 高浓度1018 000× 106/L。

2. 批内精密度

选用有核细胞含量低、中、高3份胸腹水标本, 每份分别使用仪器法和手工镜检法连续计数11次, 各剔除1个最差结果, 分别统计每组10个结果的标准差(s)和变异系数(CV)。

3. 携带污染率

参考国际血液学标准化委员会(ICSH)标准[3], 连续测定3次有核细胞含量较高的胸腹水标本(H1、H2、H3), 然后再接着连续测定3次有核细胞含量较低的胸腹水标本(L1、L2、L3), 计算XE-2100 DIFF有核细胞计数通道的携带污染率。携带污染率(%)=[(L1-L3)/(H3-L3)]× 100。

三、统计学方法

应用SPSS for Windows 11.0进行配对t检验和线性回归分析。

结果
1、仪器法和手工镜检法计数有核细胞低、中、高3种浓度胸腹水的批内精密度见表1
表1 仪器法和手工镜检法计数胸腹水有核细胞批内精密度结果
二、仪器法和手工镜检法计数胸腹水有核细胞的相关性结果见表2。在胸腹水有核细胞总浓度区间(08 000× 106/L)和胸腹水有核细胞高浓度区间(1018 000× 106/L), 仪器法与手工镜检法相关性较好(总浓度:r=0.988 2; 高浓度:r=0.976 8); 而在胸腹水有核细胞低浓度区间(0100× 106/L), 仪器法与手工镜检法相关性尚可(低浓度:r =0.928 5)。
表2 仪器法和手工镜检法计数胸腹水有核细胞的相关性结果
三、仪器测定胸腹水标本的携带污染率

胸腹水标本高浓度有核细胞计数均值为755× 106/L, 低浓度有核细胞计数均值为29.3× 106/L。仪器法胸腹水有核细胞计数的携带污染率为0.92%。

四、仪器法与手工镜检法计数胸腹水有核细胞的比较

在整个胸腹水有核细胞浓度总浓度、高浓度、低浓度区间内, 仪器法检测结果与手工镜检法结果差异无统计学意义(P> 0.05), 说明仪器法(XE-2100 DIFF通道)对胸腹水有核细胞计数总体上与手工镜检法较一致。

讨论

对于胸腹水有核细胞的计数, 目前还是常使用传统的手工镜检法, 耗时费力且不精密度较大。自从全自动血液分析仪在血细胞的检测上取代手工计数, 得到全面的普及应用后, 就有人尝试将其扩大延伸到胸腹水等浆膜腔积液细胞计数领域。但胸腹水同血液相比通常有核细胞含量较少, 且因传统电阻抗法所受到的各方面影响因素(诸如气泡、污物、细胞碎片、电脉冲噪声信号等)较多, 在检测低细胞数标本时常受干扰, 要应用电阻抗法精确计数胸腹水白细胞还存在许多障碍。不过随着应用半导体激光和流式细胞术的新一代全自动血液分析仪的问世之后, 光学法细胞检测技术为胸腹水等低细胞数标本的准确计数分群另辟了一条崭新的途径, 并渐显其在该领域的应用价值和广阔前景。应用聚次甲基荧光染料染色及新一代分析软件XE-PRO的XE-2100就是其中的代表之一。本研究之所以采用XE-2100 DIFF通道来计数胸腹水有核细胞是因为DIFF通道是应用光学法直接计数经荧光染料着色的有核细胞, 能最大程度地避免干扰因素。使最终的细胞计数分群结果准确, 结果可信度高。

从本研究所获得的结果来看, XE-2100 DIFF通道(荧光化学染色光学)对于胸腹水有核细胞计数的表现是相当不错的, 特别是对于胸腹水有核细胞浓度分布于1018 000× 106/L, 即临床病理胸腹水标本通常的有核细胞浓度范围, 其计数表现最佳。2组浓度胸腹水的有核细胞计数符合性有所不同是由于:(1)对其分组时取的有核细胞浓度范围不同; (2)胸腹水中存在的各种不同物质对血液分析仪DIFF通道的影响不同。因胸腹水白细胞计数的结果与显微镜镜检结果符合性较好, 其检测质量不下于现有的手工计数法, 又具有节时省力、精密度好等优势, 这就意味着荧光染色光学计数法在对于临床胸腹水标本的有核细胞计数检测方面确实存在着实用价值, 可以尝试进一步推广应用。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] National Committee for Clinical Laboratory Stand ards. Reference leukocyte (WBC) differential count (proportional) and evaluation of instrumental methods[S]. H20-A, NCCLS, 1992. [本文引用:1]
[2] 叶应妩, 王毓三, 申子瑜. 全国临床检验操作规程[M]. 第3版. 南京: 东南大学出版社, 2006: 312-317. [本文引用:1]
[3] Guidelines for the evaluation of blood cell analysers including those used for differential leucocytereticulocyte countingcell marker applications. International Council for Stand ardization in Haematology: prepared by the ICSH Expert Panel on Cytometry[J]. Clin Lab Haematol, 1994, 16(2): 157-174. [本文引用:1] [JCR: 1.304]