作者简介:牛忆军,女,1964年生,主管技师,主要从事血液学检验及管理工作。
分析Sysmex UF-100全自动尿沉渣分析仪(简称UF-100)检测尿液中有形成份的临床应用价值。
方法用UF-100与显微镜同时检测650例随机患者尿液,对比分析两者结果。
结果UF-100与显微镜法相比,检测红细胞阳性符合率为87.3%,阴性符合率为85.7%,假阳性率为14.3%,假阴性率为12.7%;测定白细胞阳性符合率为90.2%,阴性符合率为93.2%,假阳性率为6.8%,假阴性率为9.8%;测定结晶阳性符合率为67.8%,阴性符合率为93.1%,假阳性率为6.9%,假阴性率为32.2%;测定上皮细胞阳性符合率为79.4%,阴性符合率为85.2%,假阳性率为14.8%,假阴性率为20.6%,测定管型阳性符合率为65.3%,阴性符合率为92.2%,假阳性率为7.8%,假阴性率为34.7%;测定类酵母菌阳性符合率为55.9%,阴性符合率为91.7%,假阳性率为8.3%,假阴性率为44.1%。
结论UF-100对尿液中有形成份检测快速简便、报告及时,但受诸多因素影响。对UF-100测定结晶、类酵母菌、管型阳性及肾病患者的标本,应再用显微镜检查分析。UF-100仅作初筛之用,不可完全取代显微镜检查。
To analyze the detection capacity of visible component in urine by Sysmex UF-100 automatic urine sediment analyzer (UF-100 analyzer).
MethodsThe urine specimens were collected from 650 patients randomly, and were analyzed by UF-100 analyzer and microscope examination.
ResultsCompared the results of UF-100 analyzer with microscope examination,the positive and negative coincidence rates and false positive and negative rates for red blood cell were 87.3%, 85.7%, 14.3% and 12.7%, for white blood cell were 90.2%, 93.2%, 6.8% and 9.8%,for crystal were 67.8%, 93.1%, 6.9% and 32.2%, for epithelial cell were 79.4%, 85.2%, 14.8% and 20.6%,for pipe model were 65.3%, 92.2%, 7.8% and 34.7%, and for yeast-like were 55.9%, 91.7%, 8.3% and 44.1%.
ConclusionsFor the determination of components in urine, UF-100 analyzer is rapid and simple,but there are many effecting factors. When the crystal, yeast-like and pipe model are detected by UF-100 analyzer, for the kidney disease samples, the results should be checked by microscope examination. UF-100 analyzer can be applied for preliminary screening, but it can't replace the microscope examination.
UF-100全自动尿沉渣分析仪(简称UF-100)是日本Sysmex公司推出的尿沉渣分析仪, 解决了以往尿沉渣分析手工分片的繁琐和人为误差及不能标准化的问题。UF-100对尿液直接做荧光染色后, 利用流式细胞原理及电阻抗技术对尿液中有形成份进行快速、定量分析, 在临床检验中应用广泛[1]。为此, 我们随机收集了650例患者尿液标本, 用UF-100与传统显微镜同时检测, 对其结果作对比分析。
UF-100配套试剂及原装质控品, 由日本Sysmex公司提供。光学显微镜为日本Olympus生产。
收集2010年2月至5月上海市第一人民医院分院门诊患者尿液标本650份。
用一次性尿杯留取患者中段尿, 分装2管, 1管置UF-100按操作程序检测(每天开机后用质控品做室内质控), 另1管则用离心机以1 500 r/min(离心半径15 cm)离心5 min, 弃去上清液, 留底部约0.2 mL, 混匀沉淀, 涂片镜检。红细胞(RBC)和白细胞(WBC)在高倍镜下观察20个视野, 以平均数报告, 管型在低倍镜下观察10个视野, 也按平均数报告。操作均由有经验的中级以上技术人员同一人在2 h内完成。
采用SPSS11.0统计学软件对数据进行统计处理。UF-100与显微镜检查比较采用χ 2检验, P< 0.01表示差异有统计学意义。
本研究结果显示, UF-100检测RBC假阳性率为14.3%, 其原因为UF-100是利用细胞膜和核酸亲和力不一样的2种荧光染料进行染色, RBC仅膜被染色, 产生的荧光强度较弱, 在散点图低荧光强度区, 仪器根据荧光强度低和前向散射光强度低将其归为RBC。这14.3%的假阳性标本, 在显微镜检查中发现不少标本中有大量草酸钙结晶, 部分与红细胞形态相似, 在散点图中与RBC交叉分布而干扰了UF-100对RBC的计数[2]。另外一些尿标本的显微镜检查中发现有类酵母菌, 由于酵母样菌其形态大小、前向散射光强度与RBC相似, 亦误将其归为RBC。UF-100检测RBC的假阴性率为12.7%, 可能是部分患者在治疗过程中使用了能产生荧光染料类似作用的药物, 使RBC不易被染液染色或被其他染料染色, 从而产生了RBC计数假阴性。同时, 个别尿标本在显微镜下还发现影RBC, 而影RBC会造成UF-100漏检或误认, 这也是假阴性增高原因之一。
UF-100与尿沉渣镜检结果比较, WBC计数阳性符合率较高, 达90.2%, 仅6.8%假阳性。我们在镜下发现一部分尿液标本含大量上皮细胞, 而一些上皮细胞其大小、形态与WBC相似, UF-100可误当作WBC, 这是产生假阳性原因之一。本研究检测WBC尚有9.8%的假阴性, 可能是由于镜检时有个别尿标本RBC满视野而掩盖了WBC, 使镜检WBC结果偏低。还有部分因患者服用过能产生荧光染料类似作用的药物, WBC不易被染色或被其他染料染色, 造成假阴性结果[2]。UF-100除能给出WBC定量参数外, 还可测出尿液中WBC的平均WBC向前散射光强度, 这有助于泌尿系统疾病、结核、肿瘤等的诊断与鉴别诊断, 通过动态观察患者WBC数量变化, 确定疗效及观察预后。显微镜检查虽也能计数WBC, 但在满视野/HPF时, 不能将治疗前、后WBC数量变化反映出来, 而UF-100却能观察到这种微弱的数量变化, 对指导用药意义很大。利用WBC前向散射光强度和荧光强度的技术还能识别WBC活性程度的高低, 以便进一步对急、慢性感染及恢复期作出判断[3]。如急性泌尿系统感染时, WBC前向散射光强度强、荧光强度弱, 说明所测WBC大多为有活性的中性粒细胞, 而慢性泌尿系统感染时, WBC前向散射光强度弱、荧光强度强, 提示所测的WBC多为淋巴细胞和无活性的中性粒细胞。因此, UF-100在WBC检测方面较显微镜检查有其优势所在。
UF-100与镜检结果相比, 上皮细胞检测的阳性符合率为79.4%, 有14.8%的假阳性, 其原因可能为部分荧光强度高的单个细胞、细菌、精子、滴虫等凝集成团状, 其散射光强度可能与上皮细胞相接近而误认为是上皮细胞, 也可能是当上皮细胞大量存在时, 上皮细胞折叠卷曲误作假性管型计数, 造成了假阴性结果[4]。
UF-100检测管型只能根据管型的内容物染色后产生的荧光强度来区分病理管型和透明管型, 但不能作病理管型的分类。黏液丝、细菌等微粒附着在菌丝、棉麻纤维等类管型异物上会产生与管型相似的前向散射光脉冲和荧光脉冲宽度, 易被仪器误认; 若WBC或RBC聚集成管型状或一些上皮细胞大小、粗细类似管型, 这可能是本研究管型检测产生7.8%假阳性的原因。本研究检测管型假阴性率达34.7%, 可能是某些蛋白尿形成的管型短小或者管型断裂而被仪器漏检[5]。而尿沉渣显微镜检查可对尿液中管型染色直接观察, 明确病理管型的分类, 可避免漏检。因此, 对UF-100检测管型阳性时, 必须用显微镜进一步观察, 鉴定管型性质。本研究UF-100与镜检对结晶及类酵母菌检测的阳性符合率亦不高, 分别为67.8%和55.9%, 这也是由于尿液中盐类结晶、类酵母菌等形态大小与RBC类似, 常会被仪器误认[6]。
综上所述, UF-100对尿液有形成份检测中结晶、类酵母菌均会不同程度影响RBC、WBC计数, 管型检测两者阳性符合率低。因此, 我们认为UF-100对尿中有形成份检测只能起到过筛作用, 显微镜检查才是“ 金标准” 。在实际检测中, 对于UF-100提示项目结晶、类酵母菌、病理管型阳性、细菌计数过高的尿标本和肾病患者尿标本, 应作显微镜检查分析鉴别。
The authors have declared that no competing interests exist.
[1] |
|
[2] |
|
[3] |
|
[4] |
|
[5] |
|
[6] |
|