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林建军, 章明. 2型糖尿病肾病患者血清ox-LDL/β2-GPI复合物水平的临床意义 . 2011, 26(2): 133-135
  
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2型糖尿病肾病患者血清ox-LDL/β2-GPI复合物水平的临床意义
林建军, 章明
1.象山第一人民医院检验科, 浙江 象山 315700

作者简介:林建军,1975年生,学士,主管技师,主要从事临床生化、免疫检验工作。

摘要
目的

探讨检测血清氧化的低密度脂蛋白/β2-糖蛋白I(ox-LDL/β2-GPI)复合物水平对2型糖尿病肾病(DN)的临床意义。

方法

以24 h尿蛋白排泄率(UAER)将76例DN患者分成3组,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定其血清ox-LDL/β2-GPI复合物水平,并以32名正常人作对照。

结果

血浆ox-LDL/β2-GPI水平与对照组比较差异有统计学意义( P<0.01),并且与尿白蛋白和胆固醇(TC)呈显著正相关( r=0 .618, P<0.01)。

结论

ox-LDL/β2-GPI对DN有较高的敏感性与特异性,提示其可能是DN的风险因素,也是较好的诊断指标。

关键词: 糖尿病肾病; 低密度脂蛋白; β-糖蛋白I
中图分类号:R446.11 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2011)02-0133-03
引言

2型糖尿病肾病(diabetic nephropathies, DN)是糖尿病的常见并发症, 由于糖尿病糖代谢异常为主因所致的微血管病变, 主要指肾小球硬化[1]。氧化的低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, ox-LDL)在慢性肾脏疾病发展中起重要作用[2], ox-LDL通过肾小球上皮细胞表达转化生长因子刺激了胞外基质蛋白的产生和纤维连接蛋白的产生, 导致肾小球硬化。

近年有研究报道[3, 6]ox-LDL可通过β 2-糖蛋白I(β 2-glycoprotein I, β 2-GPI)介导的免疫途径致病。β 2-GPI是血浆中的一种天然抗凝剂, 其在体内与脂蛋白结合, 参与脂质代谢并具抗凝血活性。由于在血液中形成的ox-LDL可被肝间质细胞迅速分解[4], 由此产生的血浆低浓度的ox-LDL很难测量。但体外实验发现, 由铜离子氧化所产生的ox-LDL与β 2-GPI通过具体的配体迅速相互作用, 形成的复合物可以中和带负电荷的ox-LDL。临床研究发现在人体内这种电中性ox-LDL/β 2-GPI复合物可以摆脱清除细胞识别, 以稳定、不易解离的复合物形式存在, 并已在一些常伴心血管病变的自身免疫或慢性炎症患者血清中检测到其复合物形式存在。本研究对DN患者血清ox-LDL/β 2-GPI复合物进行检测分析, 评估其与临床表现的相关性, 为进一步探讨ox-LDL/β 2-GPI的临床诊断价值提供了依据。

材料和方法
一、 材料

1.病例组

选自2008年1月至2010年5月在象山第一人民医院门诊、住院的DN患者76例, 其中男36例, 女40例, 均符合世界卫生组织(WHO) 1999年DN的诊断标准, 根据24 h尿蛋白排泄率(UAER)分为3组:单纯DN组(I组)29例(UAER< 30mg/24h), 其中男12例, 女17例; 早期DN组(Ⅱ 组)20例(UAER 30300mg/24h); 临床DN组(Ⅲ 组)27例(UAER> 300mg/24h)。所有DN患者均无泌尿系统感染、原发性肾脏疾病以及出、凝血疾病, 近期也无脑梗死、心肌梗死等疾患, 均无高血压。采血前l周没有服用维生素C、维生素E、非类固醇抗炎药、血管紧张素转化酶抑制剂等。

2.对照组

选择同期本院健康体检者32名, 其中男16名, 女16名。

二、方法

1.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ox-LDL/β 2-GPI复合物 β 2-GPI多克隆抗体购自chemicon公司, 羊抗人apo B多克隆抗体购自金斯瑞公司, 严格按文献[5]方法进行。

2. 血脂及脂蛋白的测定 总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、 低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)市售试剂盒, 用日立全自动生化分析仪测定。

三、统计学方法

各定量检测结果以均数± 标准差( ± s)表示, 采用SPSS 11.5软件。组间比较采用单因素方差分析, 并进行两两比较; 参数间进行相关分析; 以P≤ 0.05为差异有统计学意义。

结果
一、临床资料基本指标

I组:平均年龄(57.0± 8.2)岁, BMI(24.13± 2.09), 空腹血糖FPG (8.41± 5.67)mol/L; Ⅱ 组:平均年龄(58.0± 12.1)岁, BMI(22.61± 3.26), FPG(9.87± 4.63)mol/L; Ⅲ 组:平均年龄(62.0± 5.3)岁, BMI(26.37± 4.53), FPG(10.75± 4.39)mol/L。对照组:平均年龄(54.0± 7.7)岁, BMI (20.69± 4.12)。

二、 血清ox-LDL/β 2-GPI复合物水平

II组患者血清ox-LDL/β 2-GPI复合物水平为1.65± 0.13 U/mL, III组浓度为3.55± 0.21 U/mL, 均明显高于对照组, P< 0.05, 见表1。

表1 3组患者血清ox-LDL/β 2-GPI复合物水平和UAER检测结果(± s)
三、 血脂和脂蛋白水平

与对照组比较, 患者组血清TC、TG、LDL-C、HDL-C和血清载脂蛋白B(apoB)水平均明显升高, 见表2。

表2 3组患者血清TC、TG、LDL-C、HDL-C和apoB水平检测结果± s, (mmol/L)
四、ox-LDL/β 2-GPI与脂蛋白间的相关性分析

DN患者血清ox-LDL/β 2-GPI复合物水平与TG、HDL-C、LDL-C不相关。但与TC呈显著正相关(r=0.618, P< 0.01), 与尿白蛋白显著正相关(r=0.412, P< 0.01)。

讨论

已知ox-LDL具有一定细胞毒性, 可直接损害肾小球小动脉的血管内皮细胞及平滑肌细胞, 从而使蛋白容易滤过, 出现蛋白尿[6]。同时ox-LDL还可通过巨噬细胞的受体介导而被吞噬, 激活蛋白激酶C, 从而促进转化生长因子β 表达增加, 而转化生长因子β 可以刺激细胞外基质成分如I、Ⅲ 、Ⅳ 型胶原表达增加, 并降低硫酸乙酰肝素的表达, 使硫酸乙酰肝素/Ⅳ 型胶原比率相对下降, 破坏肾小球滤过膜的电荷屏障及分子屏障, 因而形成蛋白尿。除了上述直接作用外, ox-LDL还可以通过对内皮和血小板功能的影响加重DN[7]。

β 2-GPI作为抗β 2-GPI抗体的主要靶抗原, 也是血浆中的一种天然抗凝剂, 通过影响凝血因子和凝血酶原复合物的形成抑制凝血过程, 但其具体的生理功能尚不十分清楚。β 2-GPI的显著特点是能与各种带负电的物质结合, 如磷脂、肝素、脂蛋白、活化血小板的膜和凝血酶原等。体外实验发现天然LDL氧化成ox-LDL后负电荷明显增加, 与β 2-GPI亲和力也提高, 他们的结合主要依靠分子间的静电引力。

以往研究主要通过ox-LDL水平反映体内氧化的状态[8]。但由于在血循环中生成的ox-LDL很快被肝组织中的间叶细胞清除出循环, 残留的ox-LDL量少, 测量有很大难度[9]。人体临床试验发现在体内形成的ox-LDL/β 2-GPI复合物呈电中性, 非常稳定、基本上不解离, 可以逃避清除细胞的识别。因此, 测量ox-LDL/β 2-GPI复合物的水平更能真实反映体内的氧化应激状态, 反映体内ox-LDL的产生情况。

ox-LDL/β 2-GPI复合物是否存在与高氧化应激状态和炎症有关。DN患者心血管疾病发病风险高于正常人, 该类患者体内氧化应激增加以及脂蛋白易发生氧化修饰应是其原因之一。

通过本实验发现, DN患者血清有高浓度的LDL-C、TG及apoB, ox-LDL/β 2-GPI复合物水平与尿白蛋白及TC浓度均呈正相关。

本实验对DN患者的检测进一步证实ox-LDL/β 2-GPI复合物对其较高的敏感性和特异性, 可认为血清ox-LDL/β 2-GPI复合物的水平是判断DN病程发展的一个较好的参考指标。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
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[9] Ling W, Lougheed M, Suzuki H, et al. Oxidized or acetylated low density lipoproteins are rapidly cleared by the liver in mice with disruption of the scavenger receptor class A type Ⅰ/Ⅱ gene[J]. J Clin Invest, 1997, 100(2): 244-252. [本文引用:1] [JCR: 12.812]