作者简介:王延群,男,1983年生,学士,技师,主要从事临床检验工作。
探讨Sysmex UF-1000i全自动尿液有形成分分析仪(简称UF-1000i)对尿液中红细胞(RBC)、白细胞(WBC) 和管型(CAST) 检测的敏感性。
方法对1 054例患者的尿液分别用UF-1000i、URISys-2400全自动干化学分析仪(干化学法)及Diasys R/S2005定量分析工作站(镜检法)3种方法进行分析,并比较3种方法对RBC、WBC、CAST 的检测敏感性。
结果UF-1000i检测RBC、WBC、CAST 的阳性率分别为20.6 %、20.3%、6.7%; 干化学法检测出RBC、WBC的阳性率分别为24.5%、17.9%;镜检法检出RBC、WBC、CAST的阳性率分别为16.9%、20.5%、2.2%。3种方法RBC、CAST的检出率差异有统计学意义(
UF-1000i不能完全取代尿沉渣镜检,建议3种方法联合应用以减少检验误差,提高尿液分析质量。
To investigate the sensitivities of Sysmex UF-1000i urine sediment analyzer (UF-1000i) in detecting urine red blood cells (RBC), white blood cells (WBC) and casts (CAST).
MethodsUrine specimens of 1 054 patients were collected, and each sample was examined by UF-1000i, URISys-2400 automatic dry chemistry analyzer and Diasys R/S2005 microscopy. The sensitivities of the 3 urine analysis methods were compared.
ResultsThe positive rates of urine RBC, WBC and CAST were 20.6%, 20.3% and 6.7% respectively by UF-1000i. The positive rates of RBC and WBC were 24.5% and 17.9% by dry chemistry analyzer respectively. The positive rates of RBC, WBC and CAST were 16.9%, 20.5% and 2.2% respectively by urine sediment microscopy. The results were statistically analyzed by χ2 test. The detection rates of RBC and CAST were significantly different (
Urine sediment microscopy can not be completely replaced by UF-1000i in urinalysis. The combination of these 3 methods would be optimal to improve the accuracy and precision in urinalysis.
尿液红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、管型(CAST)的检测是诊断泌尿系疾病,特别是肾脏疾病的重要实验指标之一。但尿液成分的多样性、复杂性、干扰因素多以及仪器本身检测的局限性,常导致RBC、WBC、CAST检测的假阳性或假阴性[ 1]。Sysmex UF-1000i全自动尿液有形成分分析仪(简称UF-1000i)使用了更稳定的红色半导体激光以及新的特异性试剂系统,对WBC、RBC、CAST计数精度提高,RBC和结晶之间的干扰大大降低。但在实际工作中发现诸如细菌、类酵母细胞、草酸钙结晶、上皮细胞黏液丝等成分对UF-1000i检测结果仍存在不同的干扰。为了提高尿液检验质量,我们比较了UF-1000i、URISys-2400全自动干化学分析仪(简称URISys-2400,干化学法)及Diasys R/S2005定量分析工作站(简称Diasys R/S2005,镜检法)3种检验方法。
UF-1000i(日本Sysmex公司)、URISys-2400(德国罗氏公司)、Diasys R/S2005(美国Diasys公司)、离心机(河北白洋离心机厂)。
UF-1000i用其原装配套试剂,URISys-2400用其原装配套试纸条(URISYS 2400 CASSETTE)。
随机收集体检及住院患者样本1 054例,男618例,女436例。
1.仪器检测 UF-1000i、URISys-2400均严格按照仪器说明书操作。UF-1000i在分析之前均用UF II control进行室内质控,URISys-2400(干化学法)用专用定标条定标通过后检测。用一次性尿沉渣专用塑料管收集患者清洁中段尿10 mL,并在2 h之内检测完毕,检测之前标本充分混匀。
2.镜检法检测 仪器检测完后剩余的尿液置水平离心机以1 500 r/min(离心半径19 cm)离心5 min后倾弃上层尿液,留下尿沉渣0.2 mL,轻轻摇匀后,置于Diasys R/S2005的进样器上吸入,计数每高倍视野(HP)的细胞数和低倍视野(LP)的管型数,结果以个/HP、个/LP报告。
3.结果判断 超过正常参考范围判定为阳性。UF-1000i参考范围:男 WBC 0~12个/μL、RBC 0~12个/μL;女 WBC 0~26个/μL、RBC 0~24个/μL;CAST:0~2个/μL。URISys-2400(干化学法)以RBC≥10个/μL(1+)为阳性。尿沉渣镜检以手工镜检结果为标准,参考范围[ 2]分别为RBC 03个/HP、WBC 05个/HP、CAST 01个/LP。
采用SPSS13.0统计软件对结果进行统计分析,计数资料采用χ2检验。
3种检测方法检测RBC、WBC、CAST的结果及阳性率见 表1。经χ2检验值分别为18.53、2.73、25.66,其 P值分别为 P<0.01、 P>0.05、 P<0.01。RBC检测结果UF-1000i与镜检不符合的标本共39例,假阳性35例,假阴性4例。WBC检测结果UF-1000i与镜检不符合的标本共20例,假阳性9例,假阴性11例。CAST 检测结果在71例CAST阳性的标本中,UF-1000i与镜检不符合的标本有48例,假阳性46例,假阴性2例。
![]() | 表1 3种方法检测尿RBC、WBC及CAST结果[例(%)] |
尿沉渣检查是诊断泌尿系统疾病的重要方法之一,近年来应用于临床的UF-1000i以其独特的优势可部分的取代显微镜检查而获得青睐,但其应用中的影响因素报道较少[ 36]。UF-1000i检测尿液标本中RBC、WBC、CAST均存在假阳性和假阴性结果。
RBC仅细胞膜被染色,所产生的荧光强度弱,草酸钙结晶、类酵母细胞及其他细菌、精子等染色后其荧光强度和散射光强度与RBC类似,当这些有型成分在尿中大量存在时,易被仪器误认为尿RBC。本研究中,UF-1000i检测RBC的假阳性结果中结晶有17例,其中主要为草酸钙结晶,由于其染色的敏感性与细胞类似,在散点图中与RBC交叉分布而干扰; 7例标本有酵母菌,其前向散射光强度与RBC相近而将其误认为RBC;8例标本有大量细菌,因菲啶染料对膜通透性低,细菌染色后荧光强度及前向散射光强度也较低(但比RBC稍强),尿液中当细菌大量存在时,易被仪器误认为尿RBC。尿沉渣镜检发现卵磷脂小体、脂肪滴也可引起RBC假阳性。要注意标本留取后在2 h内检测,否则标本放置时间过长,可引起尿中结晶增加、细菌繁殖等而导致RBC假阳性升高。UF-1000i与尿沉渣镜检相比RBC有4例假阴性,原因有影RBC、RBC碎片等。
3种检测方法对WBC的检出率虽然差异无统计学意义( P>0.05),但UF-1000i检测WBC共有9例假阳性,11例假阴性。这9例假阳性结果分别由小圆上皮细胞、大量破碎上皮细胞、大量酵母菌等因素引起。尿小圆上皮细胞、破碎上皮细胞的大小及染色敏感度与WBC类似而相互干扰,WBC的散射光、荧光及电阻抗的信号变化较大,有部分分布与小圆上皮细胞重叠;酵母菌含有RNA和DNA,荧光强度较高,分布在RBC和WBC之间,连体孢子产生的散射光信号与WBC相似,可能会影响WBC计数。11例假阴性结果中,多为少量WBC聚集或者WBC黏附于黏液丝等引起。本研究中干化学法检测WBC 阳性率明显低于镜检和UF-1000i,主要是由于干化学试纸条检测不出尿液中的淋巴细胞和单核细胞。因此,对于某些以尿中出现淋巴细胞为主的疾病( 如: 肾结核、器官移植后等),如果单纯进行干化学检测,就会出现漏诊。UF-1000i能检测尿中的淋巴细胞等,能弥补干化学法的不足。
UF-1000i能检测出透明CAST,并可提示病理CAST的存在,虽检出率高,但假阳性也高,达到64.8%。主要是由于:尿中存在黏液丝(18例);存在较多上皮细胞(9例);存在较多WBC,尤其是脓细胞(4例);存在大量的菌丝和孢子(3例);尿液中有污染物或者留取标本的容器不洁(12例)。假阴性2例,主要是电导率异常仪器检测结果不可靠。由于CAST的种类较多,且形态特点各不相同,基于分析仪的辨认能力,UF-1000i对CAST不能分型,只能区分为病理性CAST和非病理性CAST,病理性CAST含有WBC、上皮细胞及其他内容物,有极高的前向散射光脉冲宽度和荧光脉冲宽度,荧光信号强,非病理性CAST由于体积大但无内容物,有极高的前向散射光脉冲宽度和微弱的荧光脉冲宽度。因此,UF-1000i可以作为病理性CAST的过筛检测,不能明确辨别是哪一类病理CAST,当仪器提示有病理管型时,需按规定离心,用显微镜进行准确确认。
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