自1981年第1例AIDS病例报道以来,HIV的感染范围正在逐渐扩大。截止2006年,估计已有6 500万人感染和2 500万人死亡。仅2005年,全球估计280万人死于AIDS,410万人新感染HIV,3 860万人携带HIV。HIV持续不均匀的侵袭某些地区,例如非洲亚撒哈拉地区、加勒比海地区和亚洲部分地区^{[ 2]}。1985年我国发现了首例HIV感染,在经历了散发期、扩散期后,从1995年开始进入增长期,至2007年底我国累计报告HIV感染者223 501例,现存HIV感染病例65万例^{[ 1]}。目前AIDS虽然没有特效的药物治疗和安全有效的预防疫苗,但仍是一个完全可以预防的疾病。根据《AIDS防治条例》,控制传染源、切断HIV 传播途径,早期筛查、是防止HIV传播的重要手段。目前我国已建立了比较完善的AIDS检测实验室网络,由中国疾病预防控制中心AIDS性病预防控制中心参比室、省级疾病预防控制中心为主的确证实验室和以市县CDC和医院为主的初筛实验室构成^{[ 3]}。

目前的AIDS筛查实验室主要使用第3代ELISA试剂检测血清样本中HIV1/2抗体,其虽然有着良好的灵敏度和特异性,但是由于HIV 感染的“窗口期”约为21 d ,而试剂盒仍有3~4周的检测窗口期,这就不能满足临床对于HIV早期诊断和用血安全的要求^{[ 5]}。本研究中Roche Elecsys HIV Combi是第4代HIV检测试剂,能够同时测定HIV p24抗原和HIV1/2抗体,并将检测窗口期缩短45 d,提高了对感染“窗口期”样本的检测能力。同时,也是1种能在全自动分析仪上使用的商业化试剂,检测周期仅为18 min。作为一种安全、有效且快速的诊断试剂,Roche Elecsys HIV Combi能够很好的满足临床对HIV早期筛查的随访监测的要求。

在使用Roche Elecsys HIV Combi测定HIV p24抗原和HIV1/2抗体前,本研究对Roche cobas e411(架式系统)电化学全自动免疫分析仪检测不精密性进行了观察。在对阴性、弱反应性和强反应性标本检测中,批内不精密度分别为4.29%、3.15%和1.22%;天间不精密度分别为9.70%、5.63%和3.03%。不精密度结果良好,显著优于目前市场上普遍使用的第3代ELISA检测试剂,能够满足临床上对初筛样本的要求。

研究中使用评估试剂和参比试剂同时检测1 327份血清样本,包括健康献血员样本、HIV感染者样本、HCV抗体阳性样本和高危人群样本,2种试剂检测结果一致性相当,且准确性一致,均符合已知的测定结果。因此,Roche Elecsys HIV Combi和第3代ELISA检测试剂相比,检出能力和准确性相当。亦有文献报道,由于第4代HIV检测试剂的固相载体上同时包被抗p24的单克隆抗体和HIV抗原,而载体的表面积是固定的。因此在检测过程中,吸附到载体上的抗体和抗原的量均会受到限制,造成抗原和抗体检测之间的干扰现象,使其灵敏度均降低,造成对HIV1/2抗体的检测灵敏度减低。在本研究中没有发现上述现象,这有可能是由于本研究的入组样本量不够或是HIV弱反应性样本例数不足的缘故。

评估试剂和参比试剂同时检测了7套血清转换盘51份血清样本。HIV血清转换盘是评价HIV早期感染检测方法的有效工具,本研究中选取的7套HIV阳转转换盘分别采自HIV1/2抗体、p24抗原和(或)HIV RNA阳转过程中的献血员系列样本。检测结果显示,其中在PRB926、PRB959、PRB952和PRB960的4份血清转换盘的阳性检出天数比较中,评估试剂比参比试剂分别提前了20、7、7 d和至少2 d,平均血清转换灵敏度提前了5.1 d。由于HIV感染的窗口期仅为21 d左右,血清转换灵敏度的提前有利于早期感染的发现,对临床上诊断HIV早期感染提供了有效的辅助诊断。

和已经上市的第4代HIV检测试剂一样,Roche Elecsys HIV Combi检测试剂同样面临着“二次窗口期”问题。已有文献报道,在同一检测系统中同时检测抗原和抗体2种物质会增加非特异性反应的潜在风险,从而影响检测灵敏度和特异性,甚至出现在第2个窗口期^{[ 10]},尤其表现在对抗原的检测能力上^{[ 11]}。

本研究旨在评价Roche Elecsys HIV Combi作为第4代自动化联合检测试剂,在HIV p24抗原和HIV 1/2抗体检测中的各项性能参数,确认其在临床应用中有着良好使用价值和前景,尤其是在HIV 1/2抗体不确定或是“窗口期”样本的检测中有重要的辅助诊断价值。