引用本文
张敏, 刘峰, 胡丽华. 鉴定婴儿ABO血型的方法学比较. 2011, 26(11): 770-772
ZHANG Min, LIU Feng, HU Lihua. Comparison on the methods of identifying ABO blood group in infants. Labratory Medicine, 2011, 26(11): 770-772  
Permissions
Copyright©2011, 《检验医学》编辑部
《检验医学》编辑部
鉴定婴儿ABO血型的方法学比较
张敏, 刘峰, 胡丽华
华中科技大学同济医学院附属协和医院输血科,湖北 武汉 430022
通讯作者:胡丽华,027-85351730。

作者简介:张敏,女,1985年生,学士,技师,主要从事输血检验工作。

摘要
目的

评估婴儿ABO血型的鉴定方法,找出一种更适宜的鉴定方法。

方法

采用微柱凝胶血型卡、抗人球蛋白卡和试管法对本院2009年10月2010年1月60名婴儿全血标本做ABO血型鉴定,同时比较60名标本抗体检出率在血型和年龄分布中的差异。

结果

用微柱凝胶血型卡、抗人球蛋白卡和试管法鉴定时,正定型结果一致,反定型时,抗体检出率分别为70%、91.67%、81.67%,三种方法在婴儿抗体检出率中差异有统计学意义;在血型为A型、年龄小于4个月的婴儿中抗体检出率差异也有统计学意义。

结论

抗人球蛋白卡在检测弱抗体时灵敏度更高。

关键词: ABO血型; 婴儿; 微柱凝胶血型卡; 抗人球蛋白卡; 试管法
中图分类号:R446.11 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2011)011-0770-03
Comparison on the methods of identifying ABO blood group in infants
ZHANG Min, LIU Feng, HU Lihua
Department of Blood Transfusion, Union Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology, Hubei Wuhan 430022,China
Abstract
Objective

To evaluate the methods of identifying ABO blood group in infants, and find a more appropriate method.

Methods

The ABO blood group of 60 infants' whole blood samples were identified from October 2009 to January 2010 in Union Hospital by gel microcolumn blood group assay, LISS/Coombs ID card assay and tube test. The differences of antibody detection rate of 60 samples in blood group and age distribution were compared.

Results

The forward identifying of the 3 methods was consistent, but for the backward identifying, the antibody detection rates were 70%,91.67% and 81.67%. The detection rates by the 3 methods had statistical differences. It also had the statistical significance in blood group A and the age younger than 4 months.

Conclusions

The LISS/Coombs ID card assay is the most sensitive when the antibody is weak.

Keyword: ABO blood group; Infant; Gel microcolumn blood group assay; LISS/Coombs ID card assay; Tube test

婴儿ABO血型抗原较弱,只有约成人的四分之一[ 1],出生后抗体未产生或产生的量少、效价低而不能检测出来,会出现正反结果不一致的情况[ 2]。据文献[ 3]报道,采用微柱凝胶卡进行ABO血型鉴定、不规则抗体筛选时灵敏度高,特异性强,能检出弱抗原和弱抗体,是值得推荐的一种方法,但我们在临床工作中发现,有时微柱凝胶血型卡未能检出的抗体反而试管法可以检测出。故对本院60名婴儿全血标本分别采用微柱凝胶血型卡,抗人球蛋白卡和试管法进行ABO血型鉴定,比较何种方法更适宜用于婴儿ABO血型鉴定。

材料和方法
一、对象

华中科技大学同济医学院附属协和医院2009年10月2010年1月60名婴儿(<12月)全血标本(血型均为A、B和O型,不规则抗体筛选阴性;排除AB型,因为AB型人体内无ABO抗体产生)。

二、材料

瑞士达亚美公司提供的半自动血型仪,达亚美标准卡式孵育器、离心机,BASO标准血型离心机,达亚美微柱凝胶血型卡、低离子/抗人球蛋白卡,试管,标准2%~5%浓度的A、B型红细胞悬液(自制),标准0.8%浓度的A、B型红细胞悬液(自制),单克隆抗-A、抗-B标准血清(长春博徳生物技术责任有限公司)。

三、方法

1.抗人球蛋白卡鉴定ABO正、反定型 正定型时,各孔加入婴儿0.8%红细胞悬液50 μL,再分别加入25μL单克隆抗-A、抗-B标准血清;反定型时,各孔先加入50μL 0.8%标准 A、B型红细胞悬液,然后加入25μL婴儿血浆,37℃孵育15 min,1 024 r/min(离心半径8.5 cm)离心10 min,判读结果。

2.试管法鉴定ABO正、反定型 正定型时,各管先加入1滴2%~5%洗涤后的婴儿红细胞悬液,再分别加入2滴单克隆抗-A、抗-B标准血清;反定型时,各管先分别加入1滴2%~5%标准 A、B型红细胞悬液,然后各管加入2滴婴儿血浆,BASO标准血型离心机3 000 r/min(离心半径9 cm)离心15 s,判读结果。

3.微柱凝胶血型卡鉴定ABO血型 由瑞士达亚美公司提供的半自动血型仪SWING自动加样,加样完成于室温放置10 min后置SAXO离心10 min。

结果

本院2009年10月2010年1月60名婴儿全血标本中, A型26名,B型12名,O型22名。按年龄<4月、≥4月分为2组(Ⅰ、Ⅱ)[ 4](Ⅰ组中,男13名,女13名,A、B、O血型分别为10名、7名、9名;Ⅱ组中,男21名,女13名,A、B、O血型分别为16名、5名、13名,性别、血型分布均无差异性),统计血型抗体的检出情况(见 表1),并进行χ2检验。

表1 不同年龄组别中婴儿血型抗体的检出例数

用微柱凝胶血型卡、抗人球蛋白卡、试管法检测的正定型结果一致,三种方法的婴儿抗体总的检出率分别为:70%、91.67%、81.67%,采用χ2分析,χ2=9.159, P<0.05,认为这三种方法差异有统计学意义。

从血型来看,三种方法检测反定型时各血型抗体的检出率不同,微柱凝胶血型卡、抗人球蛋白卡、试管法在A型婴儿中抗体检出率分别为57.69%、84.62%、76.92%,在B型婴儿中分别为66.67%、100%、83.33%,在O型婴儿中分别为86.36%、95.45%、86.36%,采用χ2分析,三种方法在A型婴儿抗体的检出率中差异有统计学意义(χ2=6.175, P=0.046),在B型和O型婴儿的抗体的检出率中差异无统计学意义(χ2=4.667, P=0.097;χ2=1.259, P=0.553)。

从年龄来看,在Ⅰ 组中,三种方法对抗体的检出率差异有统计学意义(χ2=8.562, P=0.014),在Ⅱ组中差异无统计学意义(χ2=5.414, P=0.067)。

讨论

婴儿血型物质浓度低于成年人,ABO血型抗原较弱,抗体未合成或合成不足。据报道,婴儿血清中IgM型ABO抗体在出生时就合成,并逐渐增多,只是在合成量少时常规法会漏检,有数据显示,在4到12个月婴儿中约79.8%~89.8%已产生IgM型ABO血型抗体[ 5]。

我们比较了用微柱凝胶血型卡、抗人球蛋白卡和试管法检测本院2009年10月2010年1月60名婴儿ABO血型,由 表1可以看出,微柱凝胶血型卡、抗人球蛋白卡和试管法的婴儿抗体检出率分别为:70%、91.67%、81.67%,分别有18名、5名和11名未检出抗体,其中抗人球蛋白卡检测时有1名O型只检出了抗-A抗体,试管法检测时有2名O型只检出了抗-A抗体,未检出抗体的原因有以下几种:(1) 婴儿抗体没有产生[ 6];(2) 婴儿抗体很弱,检测方法的灵敏度不够[ 5];(3)微柱凝胶卡式法离心时离心力过大和(或)时间过长,以至于凝集不牢固的抗体又和红细胞分离[ 7]。

由 表1可以计算出,微柱凝胶血型卡、抗人球蛋白卡、试管法在A型婴儿中抗体检出率分别为57.69%、84.62%、76.92%,在B型婴儿中分别为66.67%、100%、83.33%,在O型婴儿中分别为86.36%、95.45%、86.36%。相比较,抗人球蛋白卡的检出情况最好,因为其添加了抗人球蛋白试剂,婴儿抗体较弱,凝集红细胞的能力不强,所以在抗人球蛋白试剂桥联的作用下,能增强抗原抗体的凝集强度[ 8];其中用抗人球蛋白卡检测时有1名B型患者检出了抗-A,抗-B或抗-A,B抗体,可能是O型母亲体内的IgG型的抗体进入到胎儿的体内;用试管法检测婴儿抗体时比微柱凝胶血型卡的效果好,因为试管法检测时能增加抗原抗体比例;延长反应时间等。有文献[ 7]报道,采用试管法检测时,离心力和振荡试管的力度大,易造成假阴性结果,但我们在临床工作中发现,控制好将细胞扣摇起的力度,反而能观察到较弱的凝集,而不是造成假阴性结果。三种方法检测婴儿血型抗体时,检出率均在A型婴儿中最低,可能是由于抗-B比抗-A出现得要晚些[ 6]。

由 表1可以计算出,在2个年龄组别中,微柱凝胶血型卡检测时抗体检出率分别46.15%、88.24%,抗人球蛋白卡检测时分别为84.62%、97.06%,试管法检测时分别为57.69%、100%。用同一种方法检测时,随着年龄的增长抗体的检出率逐渐提高,但三种方法在同一年龄组别中抗体的检出率不同,采用χ2分析,三种方法在年龄不满4个月的婴儿中抗体的检出率有明显差异,在>4个月婴儿中差异不明显。

综上所述,在临床鉴定婴儿ABO血型工作当中,我们建议同时进行正、反定型,而不能一概忽略ABO血型抗体的检测,并在未检出抗体的情况下,同时采用多种方法检测,特别是抗人球蛋白卡式法,这样我们就能更准确的鉴定血型,保障输血的安全性。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 雷厉, 孟庆宝. 应用微柱凝胶法鉴定婴儿ABO及Rh(D)血型的分析[J]. 中国热带医学, 2006, 6(2): 227. [本文引用:1]
[2] 何淑妃, 钟妙容, 黄超群. 新生儿血型抗体892例探讨[J]. 临床和实验医学杂志, 2009, 8(2): 109. [本文引用:1]
[3] 杨志诚, 罗光礼, 李萌. 微柱凝胶技术在临床血型鉴定和交叉配血中的应用[J]. 浙江临床医学, 2008, 10(12): 1612-1613. [本文引用:1]
[4] John DR, Martha RC, Brenda JG, et al. Technical manual[M]. 16th ed. Maryland : AABB, 2008: 368. [本文引用:1]
[5] 沈健, 陈秉宇. 婴幼儿ABO血型IgM抗体分析[J]. 临床血液学杂志(输血与检验版), 2010, 23(1): 65-66. [本文引用:2]
[6] 张印则, 兰炯采, 李伟, 等. 婴儿ABO血型的鉴定及应用于临床输血[J]. 中国实验血液学杂志, 2003, 11(3): 301-304. [本文引用:2]
[7] Voak D. The status of new methods for the detection of red cell agglutination[J]. Transfusion, 1999, 39(10): 1037-1040. [本文引用:2] [JCR: 3.526]
[8] 杨志诚. 微柱凝胶法在新生儿ABO血型鉴定中的应用[J]. 检验医学与临床, 2008, 5(24): 1500-1501. [本文引用:1]