1. 标本 2008年1月至2009年12月扬州市无偿献血者标本 92 655份,献血者年龄18~55岁,平均34岁,其中男性 50 959名,女性41 696名。

2. 试剂 IgM抗D、IgG抗D试剂(上海血液生物医药公司,北京金豪制药有限公司,BIOTEST公司),筛选细胞、谱细胞、多特异性抗-(IgG+C3d)、抗-D、C、c、E、e,由上海血液生物医药公司提供。

3. RhD阴性献血者筛选 对于初筛RhD阴性的标本,用3批不同生产厂家及批号IgG抗-D试剂进行血清学确认试验,未出现凝集者则为RhD阴性,出现凝集的判为弱D型。对RhD阴性献血者进行Rh因子筛选,用单克隆IgM抗-D、C、c、E、e试剂作盐水法进行抗原测定,凝集判为阳性,未见凝集判定为阴性。

4. RhD阴性献血者不规则抗体筛查 对上述RhD阴性献血者血浆用筛选红细胞做常规抗体检查,对抗体筛选结果不规则抗体阳性标本进行抗体特异性鉴定,确定其特异性。

1. 扬州市2008至2009年396名RhD阴性献血者RhD血型抗原分布见 表1。

表1

表1

表1 扬州市2008年至2009年396名RhD阴性献血者RhD血型抗原分布 血型 A型 B型 AB型 O型 合计 ccdee 89 35 27 76 227 ccdEc 1 1 2 Ccdee 55 33 13 59 160 CcdEe 1 1 CCdee 3 2 5 CCdEe 1 1 合计 149 70 40 137 396

表1 扬州市2008年至2009年396名RhD阴性献血者RhD血型抗原分布

2. 抗体筛查、鉴定及随访结果 在396份RhD阴性血浆中筛查出抗体阳性4例(1.11%),分别是抗-D 3例和抗-C 1例,效价分别为16、4、4 和 4 。对其进行随访调查,由于有抗-D的3名无偿献血者中有2名是暂住人口,联系不上无法进行跟踪调查。只跟踪调查到抗-D女性1名,29岁,O型,有妊娠史,育有RhD阳性1子;抗-C男性1名,34岁,6年前有输血史,其因交通事故外地就医输血,故未能对其所输血液进行跟踪调查。

Rh血型系统是最具多态性的红细胞血型系统,目前已确定的抗原多至48个,其中与临床输血相关的主要有D、C、c、E、e等5种抗原,东方人Rh血型系统中抗原的免疫强度依次为D、E、c、C、e,汉族人群中RhD阴性者仅占0.2%~0.5%,我们在扬州地区无偿献血者92 655份标本中,检测无偿献血者RhD抗原频率为0.40%,其表型分布频率与文献报道一致^{[ 2, 3]}。应用3批不同生产厂家,不同批号的单克隆IgG抗-D试剂作为抗球蛋白试验试验,未出现凝集则为RhD阴性血型,出现凝集的判为弱D型。间接抗球蛋白试验为阴性的个体,如果使用更为敏感的吸收/放散技术,仍可在一部分个体的红细胞表面检出D抗原,称为D放散型(DEL)^{[ 4]}。由于受实验条件等限制,无法再进行更细致的工作。从 表1中可见在396份RhD阴性的无偿献血者中,D阴性以dccee表型最多,其后依次为dCcee, dCCee, dccEc、dCcEe、dCCEe。

在对RhD阴性的无偿献血者做抗体筛查时,发现有4例有不规则抗体的存在,其效价分别为16、4、4和4,而国外很多国家已将不规则抗体筛查列入血液制品常规检查,而我国尚未对血液制品中的不规则抗体进行检查^{[ 5]}。特别是RhD阴性血型的患者本身就存在供血较为困难的情况,如有其他Rh血型不规则抗体的存在,会使供血更为困难,但为了临床输血安全应输完全相合的血液制品^{[ 2]}。而血浆及血小板的输注原则是按照ABO血型相容输注,不做交叉配血。又因多数血站在未对RhD阴性血浆做抗体筛查的情况下,为了避免血浆的浪费,就将其发给临床RhD阳性患者输注,若输注的血浆中含有不配合的ABO系统以外Ig抗体(如抗-D、-C),则会引起急性或迟发性输血反应^{[ 2]},给患者带来生命危险。我们的结果中,抗体筛查阳性4例,占1.11%,由于其中2名是暂住人口联系不上无法进行跟踪调查,只好随访此2名献血者,发现其有妊娠或输血等原因引起的免疫性抗体。避免患者输用含有不规则抗体血液制品而引起输血反应,采供血机构有必要考虑先对RhD阴性血浆进行抗体筛查。特别是对有妊娠史或输血史的献血者进行不规则抗体筛选,避免所献血液用于临床,引起急性或迟发性溶血性输血反应。如果可能的话,最好将有妊娠史或输血史的RhD阳性献血者血浆也进行抗体筛查,以避免抗-C,-c,-E,-e等IgG性质的不规则抗体引起的输血反应。或将RhD阴性血浆存放如有完全相符的患者输注,如无一直存放至报损而不应将其输注给其他患者。