引用本文
高彩凤, 陈志云. 计算机辅助精子分析与常规精液分析的比较研究. 2011, 26(1): 48-50
GAO Caifeng, CHEN Zhiyun. Comparison investigation on computer assisted sperm analysis and sperm routine analysis. Labratory Medicine, 2011, 26(1): 48-50  
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计算机辅助精子分析与常规精液分析的比较研究
高彩凤, 陈志云
惠州市中心人民医院生殖医学中心,广东惠州 516008

作者简介:高彩凤,女,1978年生,硕士,主要从事临床检验工作。

摘要
目的

研究计算机辅助精子分析(CASA)和常规精液分析 (SRA)各项参数是否具有可比性。

方法

对213 例精液标本同时行CASA 和SRA 分析。CASA 采用西班牙SCA精液质量分析仪进行检测,SRA 按世界卫生组织(WHO)推荐的标准化方法进行检测。

结果

当精子密度介于(580)×106/mL时,CASA 和SRA分析的平均精子密度、精子活动力的差异无统计学意义( P>0.05);当精子密度<5×106/mL时,CASA分析的平均精子密度高于SRA( P<0.05),精子活动力的差异无统计学意义( P>0.05);当精子密度>80×106/mL时,CASA分析的平均精子密度高于SRA( P<0.05),且CASA 检测a 级精子比例偏高, d 级精子比例偏低( P<0.05);用生理盐水按一定比例将精液稀释后分别进行CASA和SRA,平均精子密度、精子活动力的差异均无统计学意义( P>0.05)。

结论

当精子密度介于(580)×106/mL时, CASA 和SRA 对精子密度和活动力的分析具有可比性;当精子密度<5×106/mL时,CASA的误差较大,需进行SRA;当精子密度>80×106/mL时,需用生理盐水稀释精液后行CASA 或SRA分析,两者结果具有可比性。因此,当用CASA进行精液分析时,应同时结合显微镜镜检。

关键词: 计算机辅助精子分析; 常规精液分析; 精子密度; 精子活动力
中图分类号:R446 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2011)01-0048-03
Comparison investigation on computer assisted sperm analysis and sperm routine analysis
GAO Caifeng, CHEN Zhiyun
Center for Reproductive Medicine, Huizhou Municipal Central Hospital, Guangdong Huizhou 516008,China
Abstract
Objective

To research the comparability of computer assisted sperm analysis(CASA) and sperm routine analysis(SRA).

Methods

A total of 213 samples of semen were analyzed by CASA and SRA.CASA used Spain sperm class analyzer (SCA), and SRA was tested by the standardized methods recommended by World Health Organization (WHO).

Results

(1)When the sperm density range was (5-80)×106/mL, the average sperm density and sperm motility by CASA and SRA had no significant difference( P>0.05). (2) When the sperm density was less than 5 × 106/mL, the average sperm density by CASA was higher than that by SRA( P<0.05), and the sperm motility by CASA and SRA had no significant difference ( P>0.05).(3)When the sperm density was greater than 80 ×106/mL, for the analysis of original semen, the average sperm density by CASA was higher than those by SRA ( P<0.05), and the rate of Grade a in CASA was slightly higher, but the rate of Grade d was slightly lower( P<0.05). For the analysis of normal saline - diluted sperm, the average sperm density and sperm motility by CASA and SRA had no significant difference ( P>0.05).

Conclusions

When the sperm density range is (5-80)×106/mL, the analysis of the average sperm density and sperm motility by CASA and SRA are comparable. When the sperm density is less than 5×106/mL, the error of the CASA analysis is greater, and the SRA analysis is in need. When the sperm density is greater than 80×106/mL, for the analysis of normal saline - diluted sperm, the analysis of the average sperm density and sperm motility by CASA and SRA are comparable. The semen determination by CASA should also carry out microscopy observation.

Keyword: Computer assisted sperm analysis; Sperm routine analysis; Sperm density; Sperm motility
引言

据文献报道, 2001年国内男性不育症患者至少有3 500万人, 我国男性不育的发生率已达55%[1]。而精液质量分析是评估男性生育能力最常用的检查方法, 既往采用的精液常规分析(sperm routine analysis, SRA)由于其分析效率低, 且易受检查者技术熟练程度和主观因素的影响, 已普遍被计算机辅助精子分析(computer -aided sperm analysis , CASA)所取代。CASA是将计算机技术和先进的图像处理技术应用于精子质量分析, 通过对精子动态图像分析, 提供精子动力学的量化数据, 其检测过程迅速, 客观精确。我们对213 例精液标本同时进行CASA 和SRA 分析, 以评估CASA 与SRA各项参数结果的可比性。

材料和方法
一、材料

1. 标本采集

精液标本均来自惠州市中心人民医院生殖医学中心2009年4月至2009年6月行精液常规检查的患者的精液标本。嘱患者禁欲3 7 d后用手淫法留取全部精液标本于洁净广口的一次性采精杯中立即送检。接收标本后置37 ℃恒温水浴箱中, 观察其液化情况。

2. 主要仪器

西班牙SCA精液质量分析仪(Sperm Class Analyzer, MICROPTIC公司); OLYMPUS CX41相差显微镜; 5~50μ L精密移液器 (美国Finnpipette公司); Makler精子计数板(以色列Sefi Medical Instruments公司)。研究前以血球计数板和Makler精子计数板对数份精液同时进行计数。经统计分析, 二者对精子密度的分析无差异, 可以确认Makler精子计数板计数精子数据可靠。

二、方法

待精液完全液化后充分混匀, 同一份标本先后进行SRA 和CASA 分析。为减少误差, SRA 和CASA 由同一名熟练技师操作。当精子密度< 80 × 10 6 /mL, 直接分析精液原液。当精子密度> 80 × 10 6 /mL, SRA 和CASA同时分析原液后, 再用生理盐水按一定比例稀释后分别进行SRA 和CASA分析。

1. SRA分析

参照世界卫生组织(WHO) 规定的方法, 取10 μ L 精液混匀后的标本于Makler精子计数板上, 置于显微镜载物台上静置1 min后人工计数精子密度和活力。

2. CASA分析

严格按照仪器操作规程进行。取10 μ L 精液混匀后的标本于Makler精子计数板上, 置于显微镜载物台上静置1 min后开始检测。每份标本扫描6个视野至少检测200条精子, 以测定精子密度和活动力。对于严重少精子者, 至少采集10个视野, 每份标本均在35 min内完成检测。

3. 检测项目

SRA 和CASA 同时都检测精子密度、精子活动力(a、b、c、d 级)作为本研究的指标。其他项目如精子动态运动指标、圆细胞数量及一般特征同时进行检测并向临床报告, 但不作为本研究的内容。

三、统计学方法

采用SPSS 17. 0软件对数据进行配对t 检验, P< 0.05表示差异有统计学意义。

结果

213例标本有8例为无精子, 占3.8%; 168例精子密度介于(580)× 106/mL, 占78.9%; 14例精子密度< 5× 106/mL, 占6.6%; 23例精子密度> 80× 106/mL, 占10.7%。168例精子密度为(580)× 106/mL的精液标本CASA 与SRA 的主要参数比较见表1。14例精子密度< 5× 106/mL的精液标本CASA 与SRA 的主要参数比较见表2。23例精子密度> 80× 106/mL的精液标本原液CASA 与SRA 的主要参数比较见表3。23例精子密度> 80× 106/mL的精液标本生理盐水稀释液CASA 与SRA 的主要参数比较见表4。

表1 168例精子密度为(580)× 106/mL 的精液标本SRA与CASA的主要参数比较
表2 14例精子密度< 5× 106/mL 的精液标本SRA与CASA的主要参数比较
表3 23例精子密度> 80× 106/mL的精液标本SRA与CASA的主要参数比较(精液原液)
表4 23例精子密度> 80× 106/mL的精液标本SRA与CASA的主要参数比较(生理盐水稀释液)
讨论

精液分析是男性不育患者最重要和最基本的检测手段。常规精液分析对精子运动的评估只是采用主观目测, 无法测定精子的微细运动特点, 在临床衡量男性生育力方面提供的信息有限, 影响男性不育的诊断和治疗。而CASA技术克服了检测者主观因素的影响, 可重复性强, 在快速测定精子密度、活力等参数的同时, 还能显示精子的运动轨迹, 提供精子动力学的量化数据[2]。因此, 在某些项目的检测上, CASA较SRA有着不可比拟的优越性。

本研究发现, 当精子密度介于(580)× 106/mL时, SRA 和CASA 对精子密度和活力的分析是一致的, 这可能与SRA和CASA 都由同一位技师按照操作规程严格操作有关。因此, 我们认为在一定的密度范围内, 在保证操作正确的前提下, CASA 对精子密度和活力的分析是值得信赖的。

当精子密度< 5× 106/mL时, CASA分析的平均精子密度高于SRA, 而对于精子活力的分析, 二者相似。这是由于计算机系统对不动的精子与非精子成分的识别较差, 误将细胞碎片等杂质颗粒(大小与精子头部相仿)分析为精子, 而这种误差在精子密度较低时表现显著。当精子密度> 80× 106/mL时, 分析精液原液则CASA分析的平均精子密度高于SRA, 原因同前所述。且CASA 检测a 级活力精子偏高, d 级活力精子偏低, 这与文献报道相似[3]。这可能与精子密度较大时, 精子之间以及精子与非精子颗粒物质的碰撞频率增加有关[4]。本研究用生理盐水将高密度精液(> 80× 106/mL)稀释后, CASA和SRA对精子密度、活力的分析是一致的。这是由于稀释后, 减少了精子之间及精子与颗粒之间的碰撞机会。因此, 当精子密度过低(< 5× 106/mL)时, 需进行SRA; 当精子密度较高(> 80× 106/mL)时, 用生理盐水按比例稀释精液后行CASA分析。

虽然WHO实验室手册中指出, 精子密度> 50× 106/mL即需要稀释, 但本研究发现, 精子密度介于(5080)× 106/mL时, CASA的精子密度、活动力各参数与SRA分析的差异无统计学意义, 而> 80× 106/mL时才需要稀释。另外, Farrell等[5]报道用培养液作为稀释液, 稀释后的精子活力大大增强, 故本研究采用生理盐水稀释高密度精液。

总之, 将CASA分析与精液常规指标检查相结合, 可以更准确、更客观地了解精液质量的真实情况, 从而为男性不育的诊断、治疗和研究提供更充分的依据。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 陆仁康, 谢雁鸿. 应重视和加强男性生殖健康的研究[J]. 中国男科学杂志, 2001, 15(1) : 3-6. [本文引用:1]
[2] 世界卫生组织. 人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册[M]. 第4版. 北京: 人民卫生出版社, 2001: 3-82. [本文引用:1]
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[4] 叶明桃, 曹云霞, 赵济华, 等. 两种稀释液在精液常规分析中的应用比较[J]. 中国优生与遗传杂志, 2008, 16(2): 110-111. [本文引用:1]
[5] Farrell PB, Foote RH, McArdle MM, et al. Media and dilution procedures tested to minimize hand ling effects on human, rabit, and bull sperm for computer-assisted sperm analysis (CASA)[J]. J Androl, 1996, 17(3): 293-300. [本文引用:1] [JCR: 2.532]