引用本文
袁明生. 化学发光微粒子免疫分析法检测梅毒螺旋体抗体的应用评价. 25(7): 571-572
  
Permissions
Copyright©2010, 《检验医学》编辑部
《检验医学》编辑部
化学发光微粒子免疫分析法检测梅毒螺旋体抗体的应用评价
袁明生
广东省中山市陈星海医院检验科, 广东 中山 528415

作者简介：袁明生,男,1964年生,学士,副主任技师,主要从事临床免疫和微生物学检验工作。

摘要
目的

评价化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)在梅毒实验诊断中的应用。

方法

以荧光密螺旋体抗体吸附试验(FTA-ABS)为金标准,以梅毒螺旋体胶凝试验(TPPA)为相对标准,将CMIA用于1 090份来自住院和皮肤科门诊患者的血清标本中梅毒抗体检测。

结果

1 090份血清标本中,FTA-ABS检测阳性125例,阳性率为11.47%;TPPA检测阳性124例,阳性率为11.38%;CMIA检测阳性126例,阳性率为11.56%。CMIA与FTA-ABS阳性率比较,差异无统计学意义( χ2=0.005, P>0.05);CMIA与TPPA阳性率比较,差异亦无统计学意义( χ2=0.018, P>0.05);以FTA-ABS为金标准,CMIA敏感性为100.00%(125/125),特异性为99.90%(964/965)。以TPPA为相对标准,CMIA敏感性为100.00%(124/124),特异性为99.79%(964/966)。

结论

CMIA具有自动化、量化、检测周期短的特点,值得推荐为梅毒抗体的实验室批量检测。其与FTA-ABS的检出率相当,是否能用于临床诊断尚待进一步的探讨与评估。

关键词: 化学发光微粒子免疫分析法; 荧光密螺旋体抗体吸附试验; 梅毒螺旋体胶凝试验; 梅毒抗体
中图分类号:R446.5 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2010)07-0571-02
Abstract
Keyword:

梅毒(syphilis)是由梅毒螺旋体(Trepone-mapallidum)感染引起的性传播疾病。近年来我国发病率呈逐年上升之势, 尤其在广东地区。目前血清学试验是诊断梅毒的主要实验室方法, 较为常用的检查方法有快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)、梅毒螺旋体胶凝试验(TPPA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)、荧光密螺旋体抗体吸附试验(FTA-ABS)等, 其中FTA-ABS被认为是诊断梅毒的“ 金标准” , 但其和TPPA等在临床上应用时, 需手工操作, 结果用肉眼判断, 可能存在人为因素的影响。为此本研究利用雅培新近推出的Syphilis TP试剂(CMIA)在美国雅培I2000全自动免疫仪上检测梅毒抗体, 对1 090份皮肤科门诊、住院筛查的血清标本进行梅毒螺旋体抗体的筛查分析, 并评价其功效。

材料和方法
一、研究对象

中山市陈星海医院2008年1月至12月皮肤科门诊、住院患者1 090例, 年龄18~70岁。

二、主要试剂与仪器

日本富士瑞必欧株氏会社提供的TPPA试验试剂盒; 美国雅培I2000及配套Syphilis TP CMIA诊断试剂; 德国欧蒙试剂免疫制品有限公司生产的FTA-ABS试剂盒。

三、方法

取患者肘正中静脉血, 静置待血液凝固后, 4 000 r/min(离心半径为22.5 cm)离心10 min, 严格按照TPPA、美国雅培I2000及Syphilis试剂、FTA-ABS试剂盒说明书检测梅毒和判断结果, 室内质控在控情况下检测患者标本。CMIA结果> 1.00 S/CO为阳性, S/CO=标本化学发光反应物的相对光单位(RLU )/cut off RLU。

四、统计学方法

用SPSS 11.0软件进行配对χ 2 检验, P< 0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 090份血清标本中, FTA-ABS检测阳性125例, 阳性率为11.47%; TPPA检测阳性124例, 阳性率为11.38%; CMIA检测阳性126例, 阳性率为11.56%。CMIA与FTA-ABS阳性率比较, 差异无统计学意义(χ 2=0.005, P> 0.05); CMIA与TPPA阳性率比较, 差异亦无统计学意义(χ 2=0.018, P> 0.05); 以FTA-ABS为金标准, CMIA敏感性为100.00%(125/125), 特异性为99.90%(964/965)。以TPPA为相对标准, CMIA敏感性为100.00%(124/124), 特异性为99.79%(964/966)。见表1、2。

表1 FTA-ABS和CMIA检测梅毒螺旋体抗体结果比较
表2 TPPA和CMIA检测梅毒螺旋体抗体结果比较
讨 论

人感染梅毒螺旋体后, 可产生非特异性抗类脂质抗体和特异性抗螺旋体抗体IgM和IgG[1], IgG终身存在于人体内, 可终身检出阳性[2]。若能检测其IgM抗体或分析其IgG抗体的动态变化, 有助于临床的诊治。目前, 临床实验室主要通过TPPA或TPHA作梅毒螺旋体的抗体筛选, 2种方法均为手工ELISA。

CMIA是将重组梅毒螺旋体抗原(TpN15、TpN17和TpN47)包被于微粒子, 通过该微粒子与检验标本稀释液混合, 这时标本中存在的梅毒抗体将结合到梅毒螺旋体抗原包被的微粒子上。洗涤后, 加入抗-人吖啶酯标记结合物(吖啶酯标记抗IgG/抗IgM)。再一轮洗涤之后, 在反应混合物中加入预触发液和触发液, 然后测定得到RLU。标本中存在的梅毒螺旋体抗体量与ARCHITECT I2000光系统上检测到的RLUs呈正比, 试验通过对比反应测定的化学发光信号与先前ARCHITECT I2000梅毒螺旋体抗体校准确定的标准曲线比较, 所得的结果是定性和半定量的。

本研究显示, CMIA与FTA-ABS阳性率比较, 差异无统计学意义(χ 2=0.005, P> 0.05), CMIA检测的阳性数较FTA-ABS多1例的原因可能是FTA-ABS只检测梅毒IgG, 而CMIA同时检测梅毒IgG和IgM。CMIA检测的阳性血清中, 有早期的患者。CMIA与TPPA阳性率差异亦无统计学意义, 以TPPA为相对标准, CMIA敏感性为100.00%(124/124), 特异性为99.79%(964/966), 这与吴志周等[3]研究结果相近。CMIA自动化能力高, 且可部分准确量化, 结果判断更具客观性, 很适宜批量检测, 可推荐用于临床实验室梅毒螺旋体抗体的筛选以及临床诊治转归情况的了解与判断。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 邹黎. 梅毒血清学试验几种检测方法比较[J]. 实用医技杂志, 2006, 13(21): 3788. [本文引用:1]
[2] 阮豪骥. 两种梅毒检验方法比较的初步研究[J]. 检验医学, 2005, 20(2): 180. [本文引用:1]
[3] 吴志周, 祝新, 柯建良, 等. TPPA法与化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体的比较[J]. 岭南皮肤性病科杂志, 2008, 15(3): 138-139. [本文引用:1]