1.AMR材料 美国Hichem公司用于蛋白和脂类AMR验证品(批号7152000), 每瓶8 mL, 共7个水平, 靶值分别为9.0、20.0、31.0、43.0、54.0、64.0、72.0 g/L。

2.仪器和试剂 Olympus AU640生化分析仪。校准品(批号961051)及试剂(批号6166)均为Olympus原装配套。试剂盒标明其分析测量范围为15~60 g/L。室内质控品为Bio-Rad血清化学质控品, 3个水平, 批号分别为77631、77632、77633。

3.方法 定标后, 检测质控在控, 然后进行AMR验证品的检测。将7个水平的验证品各分成2管, 按照1、1、2、2、3、3...的顺序检测。

7个AMR验证品的结果见表1。

7个水平的AMR验证品的检测值与靶值的偏倚均在可接受范围, 说明该检测系统的试剂标明其分析测量范围为15~60 g/L是符合的, 可在生化仪上设定白蛋白的分析测量范围为15~60 g/L。

表1

表1

表1 AMR验证品检测结果(g/L) 验证品 靶值 检测值1 检测值2 均值 差值 偏倚(%) 可以接受的偏倚(2× CV) 结果 Level1 9.0 9.4 9.0 9.2 0.2 2.22 < 40% 通过 Level2 20.0 19.7 19.8 19.8 -0.2 1.25 < 6.6% 通过 Level3 31.0 32.7 31.9 32.3 1.3 4.19 < 6.6% 通过 Level4 43.0 43.5 43.5 43.5 0.5 1.16 < 6.6% 通过 Level5 54.0 55.4 54.9 55.2 1.2 2.13 < 6.6% 通过 Level6 64.0 64.9 65.5 65.2 1.2 1.87 < 6.6% 通过 Level7 72.0 76.1 76.2 76.2 4.2 5.76 < 6.6% 通过

表1 AMR验证品检测结果(g/L)

定量检测项目AMR的验证是验证厂家说明书上所标明的线性范围, 在实际工作中对于检测结果非常重要。对于检测超过线性范围的结果必须进行稀释。当然, 只有厂家推荐的或实验室已证实可用的稀释液才能用于稀释样本^[1]。

分析用于验证的材料必须具有适合该方法的基质效应, 我们选用了美国Hichem公司的AMR验证品, 避免基质效应等影响。CAP规定验证材料必须在AMR的下限、中点、上限处对分析物进行评价。且20%~30%的浓度范围超出预期的测量范围^[1]。在本研究中有3个浓度的验证品的值超出了预期的测量范围(9、64、72 g/ L)。每个实验室都必须确定一个接受或拒绝AMR验证的界限, 本实验室规定项目验证的接受界限为2/3的CLIA'88允许总误差(TEa), 则白蛋白的偏倚为< 6.6%。接近测定范围低限(定量极限)的测定值与靶值的偏倚可大于6.6%, 但不能超过40%。

可以接受的偏倚, AMR验证的测定值与靶值的偏倚< 2/3的该检测项目的TEa。AMR必须至少每6个月重新验证1次, 以及在主要系统配件上发生改变或主要分析试剂批号改变时也应重新验证。如果验证未通过, 应采用新鲜或备用验证材料重复AMR验证。重复验证失败, 有可能表明检测系统不稳定, 应努力排查解决问题, 可采取维护、再次校准和进行校准验证等措施。

重复检测 AMR验证材料上限值均告失败, 有可能存在线性下降, 可能需要降低AMR上限。反之, 如果是下限值失败, 有可能存在低值精密度下降, 应通过定量极限研究予以查证核实。