1.研究对象 (1)2型糖尿病肾病组:2型糖尿病早期肾病患者120例, 男58例, 女62例, 平均年龄(59.7± 10.3)岁。MA 30~210 mg/L、Cr 90± 30 μ mol/L、BUN 6.28± 5.2 mmol/L; (2)2型糖尿病非肾病组:2型糖尿病患者80例, 男43例, 女37例, 平均年龄(60.2± 11.2)岁; 诊断按世界卫生组织(WHO)糖尿病诊断与分型标准, 入选对象MA< 20 mg/L、Cr< 115 μ mol/L、BUN< 7.1 mmol/L; (3)正常对照组:为本院健康体检者40名, 男18名, 女22名, 平均年龄(51.2± 9.87)岁, 空腹及餐后2 h血糖均正常, 无肾脏疾病。

2.方法 (1)标本采集:受检者过夜禁食12 h左右, 次晨空腹采静脉血3 mL, 及时分离血清并检测; 留取晨尿, 并及时检测, 如不能马上检测的标本暂放4~8 ℃冰箱; (2)仪器和试剂:Hcy采用美国雅培公司生产的AXYSM全自动化学发光酶免疫分析仪及配套试剂, 质控品由美国雅培公司提供; Cr、BUN、UA、Glu采用Olympus AU-640型全自动生化分析仪及其配套试剂, 质控品由美国贝克曼公司提供; MA测定采用挪威NycoCard^TM金标分析仪及配套试剂; (3)检测方法:Hcy采用荧光偏振光免疫法测定, 批内和批间变异系数均< 3%, 正常值范围5~15 μ mol/L, Cr用苦味酸法测定, BUN、Glu用速率法测定, UA用终点法测定, MA用金标法测定。

3.统计学方法 实验数据以 x-± s表示, 组与组之间采用配对t检验, Hcy与Glu、Cr、BUN、UA、MA的相关性采用多因素相关分析。

1.2型糖尿病肾病组、2型糖尿病非肾病组与正常对照组各项检测 2型糖尿病肾病组、2型糖尿病非肾病组Hcy水平均高于正常对照组; 而且2型糖尿病肾病组Hcy水平又高于2型糖尿病非肾病组, 结果见表1。

表1

表1

表1 对照组与2型糖尿病各组Hcy及各项指标检测结果 组别 例数 Hcy(μ mol/L) Glu(mmol/L) Cr(μ mol/L) BUN( mmol/L) UA(μ mol/L) MA( mg/L) 糖尿病肾病组 120 14.45 ± 9.1* 8.05 ± 6.0* 90 ± 30.0* * 6.28 ± 5.2* * 325 ± 32.0* * 158.0 ± 38.1* 糖尿病非肾病组 80 11.46 ± 8.1* 7.98 ± 2.4* 68.8 ± 11.0* * 5.1 ± 2.0* * 282 ± 28.0* * 15.8 ± 2.7* 对照组 40 8.1 ± 1.6 4.52 ± 0.5 60.0 ± 10.0 4.8 ± 1.2 112 ± 10.5 2.9 ± 1.8 注:与对照组比较, * P< 0.01, * * P> 0.05

表1 对照组与2型糖尿病各组Hcy及各项指标检测结果

2.各组检测结果的统计学分析 2型糖尿病非肾病组、2型糖尿病肾病组与正常对照组各项指标进行配对t检验, Hcy、Glu、MA差异有统计学意义 (P< 0.01)。Cr、BUN差异无统计学意义(P> 0.05); 糖尿病非肾病组与糖尿病肾病组比较Hcy、MA、UA差异有统计学意义 (P< 0.05) , Glu、Cr、BUN差异无统计学意义(P> 0.05)。

3.与各项指标经多因素相关回归分析 Hcy与MA、UA、Glu的r值分别为0.71、0.502、0.451, 呈正相关, 而Cr 、BUN 的r值为0.346、0.201, 呈正相关。

从表1可见2型糖尿病肾病组与2型糖尿病非肾病组, Hcy水平均高于正常对照组, 配对t检验结果, 差异有统计学意义(P< 0.01)。而且Glu、MA水平也高于正常对照组, 差异有统计学意义(P< 0.01) ; UA差异也有统计学意义(P< 0.05); 2型糖尿病非肾病组与肾病组比较Hcy、MA、UA差异有统计学意义 (P< 0.05) , 而Glu、Cr、BUN差异无统计学意义(P> 0.05)。Hcy水平与各项指标相关性检验呈正相关, 与MA呈明显正相关性, MA作为肾病和内皮功能受损的早期标志物, 被认为可能与糖尿病患者Hcy水平有关。

高血Hcy引起的过度排尿使叶酸、水溶性的B族维生素丢失是引起高Hcy的重要原因^[1], 2型糖尿病肾病是糖尿病微血管病变主要并发症之一。Hcy是一种血管损伤性氨基酸, 与血管损伤有关。Hcy可通过血管内皮损伤导致糖尿病肾脏病变。近年来研究表明, Hcy可协同糖尿病中的糖基化终末产物, 加剧血管内皮损伤, 从而促使糖尿病患者尿微白蛋白的发生^[2]。Hcy与MA呈较高的正相关, Hcy与MA的相关性也可能由于Hcy通过氧化应激损伤血管内皮细胞功能, 通过血管平滑肌增殖而影响肾脏内皮及肾小球膜细胞功能, 使肾小球滤过电荷选择性改变, 孔径变大, 肾小球内压增加, 最终导致肾小球滤过率增加^[3], 即与糖尿病肾病的发生有关。高Hcy血症是MA的独立危险因子, 目前主要应用叶酸、维生素B₁₂、B₆治疗高Hcy, 叶酸单一疗效明显。如果降低血Hcy水平, 有可能降低糖尿病肾病的发病率, 对糖尿病患者进行血清Hcy检测, 这对糖尿病血管病变的发病机制研究和防治具有重要意义。