脂血是最常见的干扰因素, 干扰所有型号的血液分析仪的HGB、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度 (MCHC)、WBC、PLT等参数的检测。干扰判断方法:当WBC和PLT等参数假性增高时, 仪器出现“ 乳糜/HGB干扰(Turbidity/HGB Interference) ” 报警; MCHC≥ 365 g /L; HGB与RBC计数不符或与历史数据差别大; 血浆部分出现浑浊; 或血涂片上见大量的不着色且大小不等的脂肪球(见图1)。纠正措施:WBC和PLT采取手工方法进行计数; HGB纠正方法:标本上机检测后, 将标本以离心速度1 500~2 000 r/min(离心半径17 cm), 低速离心3~5 min, 轻轻取出, 吸出血浆, 对血浆进行全血细胞计数(CBC)(操作与临床标本完全相同)。计算公式:HGB_修正值= HGB_修正前-(HGB_脂血血浆-HGB_脂血血浆× HCT_修正前), “ HGB_脂血血浆× HCT_修正前” 为RBC所占比例部分; 同时对MCH和MCHC进行校正, MCH_修正值= HGB_修正值/RBC_修正前; MCHC_修正值= HGB_修正值/HCT_修正前。把纠正前后的结果同时报告给临床, 并注明该标本为脂血标本。

某些疾病的患者(如支原体肺炎等)血液里存在冷凝集素, 使血液RBC在离开机体后几分钟内发生聚集。干扰所有型号的血液分析仪的RBC、MCV和MCHC等参数。判断方法:仪器出现“ RBC凝集(RBC Agglutination)” 报警; 平均RBC体积(MCV)> 110fl和MCHC≥ 370 g /L; 血涂片上RBC成片状。纠正措施:将标本置于37℃孵育30min后, 立即上机检测, 在报告单的备注栏注明该标本有冷凝集现象, 并提示医生注意(因为标本出现冷凝集现象对某些疾病的诊断是有帮助的)。

图1

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	图1 血液涂片脂肪球(瑞-姬染色, 1 000倍)

某些疾病(如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等)的血液标本RBC呈缗钱状排列。干扰所有型号的血液分析仪的RBC、MCV和MCHC等参数。判断:仪器出现“ RBC Agglutination” 报警; HGB与RBC不成比例; MCV> 140fl和RBC直方图异常; 血涂片上RBC成串钱样排列。处理方法:手工计数RBC, 并在报告单备注栏注明该标本的RBC呈缗钱状排列, 提示医生注意(该现象对诊断浆细胞系统疾病很有帮助)。

某些疾病, 如严重肝病、球形RBC增多症等。主要干扰KX-21和K-4500型仪器的WBC参数, 判断:仪器计数WBC总数异常增高及淋巴细胞增高但与血涂片不符; 仪器出现“ RBC溶血不良(RBC Lyse resistance)” 、“ 碎片(Fragments)” 报警、“ WBC散射图异常(C Abn Scattergram)” 、WBC参数后出现“ * ” 号(表示数据不可靠)或“ ---” 号(表示存在检测错误)等。措施:采用手工方法计数WBC; 用某些不受干扰的仪器(如XE-2100)检测, 排除其干扰。

某些伤害(如毒蛇咬伤后)诱发的弥散性血管内溶血(DIC), 或采血不顺利等因素可引起标本溶血。干扰所有型号的血液分析仪RBC、MCV和MCHC等参数。判断:肉眼观察血液标本的血浆呈红色; 出现异常大的MCV(常> 120fl)、MCHC> 370 g/L。措施:观察血涂片是否有较多RBC碎片, 或与临床联系, 重新采集标本。

由于方法学的问题, 某些贫血(如缺铁性贫血、地中海贫血等)患者的小RBC对KX-21、K-4500和XS-1000i等仪器测定PLT数量时有明显干扰, 使PLT假性增高。判断:MCV< 70fl; MCV正常, 但红细胞分布宽度-CV(RDW-CV)或s增大, RBC大小不均报警(Anisocytosis); 细胞增多(Microcytosis)报警; PLT直方图异常(PLT Abn Distribution)或PLT参数后出现“ * ” 号(表示数据不可靠); 血涂片上PLT数量与仪器计数不符; 见小RBC等。措施:用手工方法计数PLT或用XE-2100仪器(该仪器不受小RBC干扰)检测。

如PLT增多症、慢性粒细胞白血病等血液系统疾病患者血液中可能出现与WBC大小样的巨大PLT, 其干扰所有型号的血液分析仪的WBC参数。判断:血涂片上见巨大PLT, 仪器检测时WBC计数假性增高。措施:用手工方法对WBC进行计数或手工分类计数100个WBC遇到的巨大PLT数, 如果采用后者, WBC校正要按照该计算公式:WBC_校正值=校正前WBC数× [100/(100+巨大PLT数)]。

采血不顺利或部分患者高凝状态。干扰所有型号血液分析仪的PLT参数。判断:仪器出现“ PLT聚集(PLT Clumps)” ; 血涂片上PLT成堆。措施:重新采血(针对采血不顺利)或手工计数PLT。

PLT聚集在中性粒细胞周围的现象, 称为卫星现象, 出现这种现象公认的原因, 是在用乙二胺四乙酸(EDTA)盐抗凝的初期(当血液与EDTA抗凝剂接触的15min内)可能出现。但我们也发现有少数患者的标本, 采集2h后仍存在此现象(见图2), 干扰所有型号的血液分析仪的PLT参数。判断:仪器出现“ PLT Clumps” , 或血涂片上PLT聚集在中性粒细胞周围。措施:采血15min后上机检测或手工计数PLT。

图2

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	图2 血小板卫星现象(瑞-姬染色, 1 000倍)

念珠菌菌血症患者血液里的真菌孢子可对所有型号的仪器的WBC、PLT干扰^[3]。判断:血涂片上可见到散在或WBC吞噬的真菌孢子, 见图3、图4, WBC和PLT等参数假性增高等。措施:手工计数WBC、PLT。

图3

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	图3 血液涂片散在真菌孢子(瑞-姬染色, 1 000倍)

图4

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	图4 血液涂片WBC吞噬的真菌孢子(瑞-姬染色, 1 000倍)

在某些病理情况下外周血出现NRBC, 干扰所有型号血液分析仪的WBC参数。判断:仪器出现“ NRBC” 或原始细胞(Blast)报警, 或血涂片上见NRBC。措施:手工分类计数100个WBC遇到的NRBC, WBC校正按照该计算公式:WBC_校正值=校正前WBC数× [100/(100+NRBC数)]。

某些疾病(如白血病)引起WBC异常增高。干扰所有型号血液分析仪的RBC参数。判断:当RBC< 2.0× 10¹²/L, WBC> 200× 10⁹/L(即对RBC干扰超过10%), 需要对RBC数进行校准。校正方法:RBC_修正值=原RBC -WBC数/1 000, “ WBC数/1 000” 为WBC换算成× 10¹²/L数, 同时对MCV和MCH进行校正, MCV_修正值= HCT/RBC_修正值和MCH_修正值= HGB/RBC_修正值。

见于巨幼RBC贫血和溶血性贫血、脾切除等, 为RBC内存在的染色质小体, 干扰XE-2100血液分析仪的RET参数。判断:血涂片上见成熟RBC内有1个或多个染紫红色小体, 该小体会使RET假性增高。校正方法, 计数100个RBC中含HJ小体的RBC个数(%); 计算公式:RET绝对数校正值=校正前RET绝对数- RBC绝对数× HJ小体RCB%, “ RBC绝对数× HJ小体RBC%” 为换算成含HJ小体的RBC绝对数。

寄生在RBC内的疟原虫使RET计数假性增高^[2]。干扰XE-2100血液分析仪的RET参数。判断:血涂片上见RBC内有疟原虫滋养体。纠正方法:计数100个RBC中含疟原虫的RBC个数(%)。计算公式:RET绝对数校正值=校正前RET绝对数-RBC绝对数× 含疟原虫的RBC%, “ RBC绝对数× 含疟原虫的RBC%为换算成含疟原虫的RBC绝对数。

值得一提的是, 随着脂肪乳液成为临床常用肠外营养和高脂血症患者的增加, 院内真菌感染的发病率不断递增^[4], 脂血和念珠菌菌血症对血液分析仪的干扰, 应该引起我们的高度重视。

在我们的日常工作中, 血液常规检验时经常会遇到各种干扰因素, 而造成检测结果不准确, 如果不进行纠正, 将不准确的结果提供给临床, 可造成严重的医疗事故, 如高三酰甘油(TG)导致的HGB假性增高, 可掩盖患者的病情, 危害患者的生命安全, 必须引起我们的高度重视。要对各种干扰因素进行分析判断及纠正处理, 并不是一件容易的事情, 必须建立规范而正确的对各干扰因素的分析判断及纠正程序, 严格按照程序操作, 消除干扰, 使检测的结果准确可靠。