1.试验菌株 2002年2月至2008年12月从上海市大华医院肠道门诊、儿科门诊和急诊科的急性腹泻患者粪便标本中分离的志贺菌共597株, 其中2002年118株, 2003年105株, 2004年125株, 2005年94株, 2006年86株, 2007年37株, 2008年32株。药敏试验质控菌株为大肠埃希菌(ATCC 25922)。

2.志贺菌诊断分型血清 购自兰州生物制品研究所, 在有效期内使用。

3.其他试剂 SS琼脂平板和水解酪蛋白胨(MH)琼脂平板购自上海伊华科技有限公司。药敏纸片共10种, 包括氨苄西林、复方磺胺甲口恶唑、哌拉西林、头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星和氯霉素, 2002 至 2004 年购自上海伊华科技有限公司, 2005至2008年购自北京天坛生物有限公司。

4.分离鉴定 挑取可疑菌落, 按照文献[1]鉴定菌种, 如生化反应可疑, 可用API20E鉴定, 最后用相应诊断分型血清分型。

5.体外药物敏感试验 按2000至2007年美国临床实验室标准化研究所(CLSI)当年版标准操作与判断药敏试验结果。

6.统计学方法 应用WHONET 5.3软件进行统计。

1.血清学分型变化 近7年来志贺菌引起的感染以福氏志贺菌(55.6%)和宋内志贺菌(42.0%)为主, 其中2002至2005年福氏志贺菌(55.3%~69.6%)多于宋内志贺菌(30.4%~42.6%), 2006至2008年宋内志贺菌(51.4%~74.4%)多于福氏志贺菌(24.4%~48.6%), 痢疾志贺菌(0~2.5%)和鲍氏志贺菌(0~0.8%)较少。

在福氏志贺菌中, 以血清Ⅰ 型(5.8%~33.3%)、Ⅱ 型(28.6%~62.0%)和Ⅳ 型(12.0%~63.6%)为主, 其中2002至2003年以Ⅱ 型(57.4%~62.0%)为最多, 2004至2008年Ⅳ 型(33.3%~63.6%)逐渐成为优势血清型, 其他血清型如Ⅲ 型(0~3.8%)、Ⅴ 型(0~4.8%)、X变种(0~12.0%)和Y变种(0~1.4%)较少。

2.耐药性监测 7年来的药敏试验结果显示, 志贺菌对氨苄西林、复方磺胺甲口恶唑和哌拉西林的耐药率逐步增高, 已大于70%, 对三代头孢菌素的耐药率呈增加趋势, 对氟喹诺酮类抗菌药物的耐药率变化不大, 福氏志贺菌和宋内志贺菌的耐药情况各有不同:福氏志贺菌对常用抗菌药物的耐药率为氨苄西林81.0%~100.0%、复方磺胺甲口恶唑68.2%~90.0%、哌拉西林15.2%~70.0%、头孢噻肟3.5%~60.0%、头孢他啶0~30.0%、头孢曲松3.5%~70.0%、诺氟沙星14.2%~25.5%、环丙沙星12.4%~22.5%、氧氟沙星0~22.5%和氯霉素72.8%~92.8%。宋内志贺菌对常用抗菌药物的耐药率为氨苄西林21.9%~97.5%、复方磺胺甲口恶唑62.5%~94.9%、哌拉西林20.9%~76.4%、头孢噻肟0~26.7%、头孢他啶0~19.3%、头孢曲松0~26.7%、诺氟沙星2.6%~16.7%、环丙沙星0~9.7%、氧氟沙星0~9.7%和氯霉素0~6.7%。

我国大部分地区临床分离的志贺菌以福氏志贺菌为主, 宋内志贺菌次之。本地区2002至2005年的分离结果与其一致^[2], 自2006至2008年则以宋内志贺菌为优势菌。福氏志贺菌的亚型以Ⅰ 、Ⅱ 和Ⅳ 型为主, 其中2002至2003年以Ⅱ 型居多, 2004年以后则以Ⅳ 型为优势流行菌株。

志贺菌的耐药情况不容乐观, 对氨苄西林、复方磺胺异口恶唑和哌拉西林的耐药率已大于70%, 而氟喹诺酮类的抗菌药物仍有良好的体外抗菌活性。

比较福氏志贺菌和宋内志贺菌的耐药性显示, 2种血清型的耐药谱及变迁情况有所不同, 宋内志贺菌的耐药率明显低于福氏志贺菌。福氏志贺菌对氟喹诺酮类的抗菌药物如诺氟沙星、环丙沙星等的耐药率在20%左右, 对氯霉素、头孢噻肟和头孢曲松等的耐药率已> 50%。宋内志贺菌近7年来除了对头孢噻肟和头孢曲松的耐药率升至25%左右, 对氯霉素、头孢他啶(除了2004年19.3%)、环丙沙星和氧氟沙星的耐药率< 10%。因此, 志贺菌的血清分型对临床治疗志贺菌引起的腹泻有重要的指导意义。