作者简介:唐健辰,男,1964年生,主管技师,主要从事临床检验与医院管理工作。
通过尿液干化学法检测白细胞(WBC)、红细胞(RBC),与人工显微镜检查作比较,对干化学法产生假阳性及假阴性结果原因进行探讨。
方法随机收集本院门诊患者新鲜尿液标本500份,分别采用干化学法检测及人工显微镜检查其尿液中WBC、RBC。
结果以人工显微镜检查为对照,干化学法WBC检测结果的阳性符合率为84.23%,阴性符合率为95.68%,假阳性率为4.31%,假阴性率为15.77%;RBC检测结果的阳性符合率为93.7%,阴性符合率为86.27%,假阳性率为13.72%,假阴性率为6.29%。
结论干化学法检测尿液WBC、RBC快速简便,适用于检测尿液WBC、RBC的过筛,但此法假阳性与假阴性较高,不能完全取代人工显微镜检查。
To compare the results of urine white blood cell (WBC) and red blood cell (RBC) detection by dry chemistry method and microscope method, and discuss the false positive or false negative results of dry chemistry method.
Methods500 fresh urine samples from outpatients were collected randomly and analyzed by means of dry chemistry method and microscope method. The WBC and RBC were determined.
ResultsIn comparison with the microscope method, the dry chemistry detection of WBC had the results of positive coincidence rate 84.23%, negative coincidence rate 95.68%, false positive rate 4.31% and false negative rate 15.77%. As for RBC, the dry chemistry method had the results of positive coincidence rate 93.7%, negative coincidence rate 86.27%, false positive rate 13.72% and false negative rate 6.29%.
ConclusionsIt is more rapid and easier for WBC and RBC detection by the way of dry chemistry method that can be applied to screen WBC and RBC in urine samples. However, it has the relative high false positive and false negative rates, so it cannot replace the microscope method completely.
用于检测尿液中白细胞(WBC)、红细胞(RBC)的方法颇多, 但目前用得最多的方法是干化学法检测与人工显微镜检查[1]。干化学分析仪的普通应用, 使临床检验工作效益大大提高, 但同时也往往出现了过分依赖这些智能化的仪器而忽视了传统的人工显微镜检查, 结果造成漏诊或误诊。事实上, 至今为止尚未有1台智能化仪器能完全取代人工显微镜检查, 只能起到过筛作用[2]。干化学法操作快速简便, 但受到诸多因素影响, 而产生WBC、RBC检测假阳性和假阴性结果。人工显微镜检查是尿中WBC、RBC检查“ 金标准” 方法[3], 但操作复杂, 将2种方法综合运用, 则对提高尿液WBC、RBC检测效率和准确率意义重大。为此, 我们以干化学法和人工显微镜2种方法检测尿中WBC、RBC作了比较分析。
收集本院门诊患者新鲜随机尿液500份。尿杯为一次性塑料尿杯。30 min内完成检测, 记录结果。
1.仪器 双目显微镜(日本Olympus); 尿液干化学分析仪(长春迪瑞H500)。
2.试剂 干化学试纸条(长春迪瑞H500仪配套试纸条)。
1、干化学法 干化学法严格按照试剂操作说明书进行。具体方法为:将试纸条充分浸入尿液1s取出, 在滤纸上吸去多余尿液, 置干化学分析仪上检测。测试前需作空白校正, 并在测试前、中、后都用质控标本同时检测, 以确保结果可靠性。
2、人工显微镜 干化学法检测结束, 应立即进行人工显微镜检查。具体方法为:取尿液10 mL, 混匀后加入带刻度专用试管中, 以1 500 r/min(离心半径15 cm)离心5 min, 弃去上清液, 留取0.2 mL尿液, 轻轻混匀, 取1滴于载玻片上, 首先在低倍镜下观察尿沉渣分布情况后, 再转高倍镜计数10个视野。镜检结果以WBC 0~5/HP, RBC 0~3/HP为正常参考范围[4]。
500份尿液WBC、RBC干化学法与人工显微镜2种方法结果见表1、表2。
![]() | 表1 干化学法和人工显微镜检测尿WBC结果 |
![]() | 表2 干化学法和人工显微镜检测尿RBC结果 |
干化学法与人工显微镜2种方法比较, 其结果表明, 尿中WBC 2种方法结果阳性符合率为84.23%(187/222), 阴性符合率为95.68%(266/278), 假阳性率为4.31%(12/278), 假阴性率为15.77%(35/222); 尿中RBC 2种方法结果阳性符合率为93.7%(134/143), 阴性符合率为86.27%(308/357), 假阳性率为13.72%(49/357), 假阴性率为6.29%(9/143)。
尿中WBC和RBC检测, 对于尿路感染、各种急慢性肾炎、泌尿系结石、结核及肿瘤等泌尿系统疾患的诊断有重要意义。干化学法是利用干化学分析仪检测尿中WBC、RBC, 具有快速简便、准确分析尿中一些成份的优点, 可作为一般尿液WBC、RBC检查的过筛试验, 但此法在测定尿液过程中, 易受仪器及试纸条质量、光线、食物、温度、酸碱度、药物、理化等因素干扰, 易出现假阳性和假阴性, 有一定局限性。尿液人工显微镜检查虽操作繁琐, 但标准化的显微镜检查仍是尿沉渣分析的金标准, 具有重要的诊断价值。
尿液WBC检查结果中, 干化学法WBC的假阴性率高达15.77%, 究其原因可能与干化学分析仪本身测定尿WBC原理有关。仪器检测WBC原理是基于中性粒细胞胞浆内含有的酯酶作用于带膜块中吲哚酚酯, 使吲哚吩酯释放吲哚酚, 后者与重氮盐反应产生紫色, 以其显色深浅换算成WBC数。但这只能检测胞浆内含的酯酶粒细胞, 而不能测定那些酯酶缺乏的中性粒细胞。因此, 当尿液中只有淋巴细胞或单核细胞时, 会产生假阴性结果[5]。同时, 干化学法易受尿中如高葡萄糖、高蛋白尿及含有大剂量先锋IV或庆大霉素等抗菌药物影响, 使结果偏低或出现假阴性[6]。本实验中, 干化学法检测尿中WBC假阳性率为4.31%, 究其原因主要为:尿液在膀胱中贮存时间过长或离心速度过快等原因致使WBC破坏, 中性粒细胞酯酶释放到尿中可出现干化学法假阳性; 尿液标本中含有高浓度胆红素或使用呋喃妥因等药物时, 也会出现干化学法假阳性结果。另外, 女性患者尿液被白带污染, 或含有大量上皮细胞时也会导致干化学法假阳性。
我们的实验中, 尿液RBC干化学法检测500例尿液标本, RBC假阳性率为13.72%, 假阴性率为6.29%, 究其原因主要为:干化学法检测尿中RBC, 是利用RBC内血红蛋白(Hb)中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性, 因此, 既可检测完整的RBC, 也能测定游离Hb, 而人工显微镜则是通过离心尿液, 取其沉渣, 显微镜下直接计数RBC, 观其形态。另外, 尿路感染而出现的分泌物和某些氧化物的污染也可引起干化学法假阳性, 一些疾患如肾病引起尿中RBC破碎、溶血性疾病导致Hb尿等都能产生假阳性。尿液pH值低、比重低、放置时间过长, 此时尿中RBC亦开始溶解, 也会导致假阳性产生。据报道, 尿中存在大量维生素C及少量新鲜RBC可造成RBC干化学法阴性, 而人工显微镜检查阳性[7]。由此可见, 干化学法只能用于过筛试验, 干化学法WBC、RBC结果均为阴性, 应结合临床, 若非肾脏及泌尿系统和溶血性疾病患者, 一般可省略人工显微镜检查; 干化学法RBC阳性的尿液应进行人工显微镜检查, 并观察干化学法WBC、亚硝酸盐试验(NIT)、蛋白质测定(PRO)和pH值等多项指标结果, 怀疑人工显微镜检查结果还可用金标免疫试验验证干化学法过筛结果; 干化学法RBC阴性、大量维生素C存在时也需进行人工显微镜检查; 干化学法WBC阴性时, 要注意葡萄糖、NIT、pH值及尿液颜色、浑浊度, 患者是否大量使用过有关抗菌药物, 不可免去人工显微镜检查, 以防假阴性结果。要以客观科学的态度对待每份尿液分析结果, 切不可单为追求工作量减少而仅做干化学法而忽视人工显微镜检查。当然, 我们既不能用干化学法完全替代人工显微镜检查, 也无须每份标本都镜检, 先过筛, 有异常才镜检, 这样为我们节省了经费与时间。只有将干化学法与人工显微镜检查两者有机结合、互补, 才能提高尿液检测准确性、可靠性, 为临床诊断提供可参考的实验数据。
The authors have declared that no competing interests exist.
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