粪便隐血试验是检测急、慢性消化道出血和消化道恶性肿瘤的简便、常用方法之一^[1]。目前在粪便隐血的实验室检查中, 化学法因其操作简便价格低廉仍然被采用, 比较常用的有邻甲联苯胺法、联苯胺法、匹拉米洞法等。其原理基本相同, 都是基于Hb中的亚铁血红素有类似过氧化物酶作用, 能催化试剂中的H₂O₂作为电子受体使色原氧化呈色, 呈色的深浅与Hb含量成正比。但在实际应用中由于粪便成分差别很大, 外源性食物和药物对检测结果有较大影响, 测试前均要求测试者控制饮食和药物^[2]。而免疫法应用较早的是免疫学检测Hb法, 该方法利用抗人Hb的单克隆抗体或多克隆抗体特异地检测人消化道微量的出血, 因此不受食物、肉类及其他动物Hb的干扰。但是也有研究表明上消化道出血Hb法阳性率较低, 是因为Hb在消化道中, 受肠内细菌和消化酶的作用而变性, 导致其抗原性降低, 由于体液中的蛋白成分阻碍抗原抗体反应^[3], 而且出血量过大时容易因前带反应造成假阴性结果, 因此临床应用也有局限性。国外学者对Hb以外的血液成分如Tf、结合血红素、纤维蛋白原等作为出血示踪进行了深入研究, 结果发现Tf具有消化道出血的特异性和在对抗细菌分解的稳定性, 在检测Hb的同时检测Tf就能减少假阴性反应的出现, 提高临床诊断准确率^[4]。从表1中可以看出, Hb法在检测下消化道出血时确实不及Tf法, 而化学法与临床诊断符合率更低, 甚至低于2种免疫法单独所得结果, 这与相关报道^[4]也较一致。表2中联合免疫法特异性、敏感性、阴性预测值和阳性预测值与临床诊断符合率均明显高于化学法, 其特异性和阳性预测值更是达到98.7%和99.2%, 是由于该法按照Tf和Hb 2种方法和值来判断, 尤其是Tf法对于Hb法检测上消化道出血不足之处能够起到优势互补作用。当然双联法判读结果可能存在的干扰因素在我们的实验中还考虑不够全面, 以后的临床应用中还应对其进行进一步研究。

消化道生理性出血一般为0.6 ml/24h, 达到2 ml/24h确认为病理性出血, 从表3中我们还可以发现, Hb检测法检测线性下限为0.5 μ g/mL左右, 由于血液中Hb的含量高于Tf所以此检测阈值下限也代表了双联法的最小检出限, 微量病理性出血就可以检测出。而化学法检出限在20 μ g/mL到1 μ g/mL之间, 消化道微量出血有可能发生漏检。联合免疫法可测出样本中的微量Hb(0.5μ g/mL), Tf法由于在血液中含量较低, 在Hb浓度为5 000 μ g/mL仍可呈现阳性, 因此联合免疫法可以在很大程度上避免Hb检测在大量出血抗原过剩时出现前带反应造成的假阴性结果, 也可以用Tf检测减少生理出血和药物刺激出血而引起的假阳性反应。以上结果说明化学法虽然能够在出血量比较多时能给予半定量的提示, 但是对于总体检测线性范围不及联合免疫法。

需要注意的是粪便混有血液与检测其他体液中Hb不同, 由于粪便是固体或半固体, 且消化道中细菌和消化酶的作用又十分复杂, Hb或者Tf量比较低时可能因各种原因而造成假阴性, 因此欲获得高符合率的结果必须遵照操作规程和试剂说明书在粪便或样本的多部位或多次取样, 并结合患者的临床表现及体征综合分析结果。