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钱超, 曹真虎. 淋巴瘤患者血浆尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体检测的临床意义. 25(2): 157-158
  
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淋巴瘤患者血浆尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体检测的临床意义
钱超, 曹真虎
长兴县中医院检验科,浙江 长兴 313100

作者简介：钱超,男,1979年生,学士,主管技师,主要从事血液学检验工作。

关键词: 尿激酶型纤溶酶原激活物; 淋巴瘤; 受体; 检测
中图分类号:R446.11 文献标志码:B 文章编号:1673-8640(2010)02-0157-02

尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)与尿激酶型纤溶酶原激活物受体(u-PAR)是近年特别关注的2个纤溶因子,他们除有纤溶作用外,还参与胞外基质降解、细胞修复和组织重塑等过程[ 1, 2]。这2个因子与白血病之间的关系有一些报道[ 3, 4],但尚未见淋巴瘤方面的临床研究报告。为此,我们检测了淋巴瘤患者血浆u-PA和u-PAR,并对其含量变化的临床意义进行了探讨。

一、材料和方法

1. 对象 (1)患者组:淋巴瘤71例,其中男39例,女32例,年龄18~77岁。均为长兴县中医院经淋巴结病理和骨髓病理诊断明确的住院患者,诊断符合血液病诊断及疗效标准[ 5]。根据免疫组织化学染色分为B细胞型淋巴瘤55例,T细胞型淋巴瘤16例。其中淋巴瘤累及骨髓(瘤细胞>5%~<25%)17例(包括大B细胞淋巴瘤10例、黏膜相关淋巴组织淋巴瘤3例、滤泡性淋巴瘤2例、Burkitt淋巴瘤和原发胸水淋巴瘤各1例),有6例在病程中并发淋巴瘤细胞白血病(瘤细胞>25%),未累及骨髓54例;(2)对照组:30名,其中男12名,女18名,年龄19~67岁,为体检健康无器质性病变的本院职工和学生。

2. 方法 (1)标本采集:所有患者均在早晨空腹静脉采血3 mL,先注入0.9 mL含0.109 mol/L枸椽酸钠抗凝液0.1 mL的试管中,轻摇,分离血浆保存于-70℃冰箱待测。余下血标本作其他常规检查;(2) 仪器和试剂:采用美国DYNEX公司的OpSysMR酶标仪。试剂为美国ADI公司酶标试剂盒,购自上海太阳生物技术有限公司;(3)检测方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆u-PA和u-PAR浓度。严格按操作说明书稀释配制试剂、标准品,并稀释血浆样本,取100 μL于编号的酶标板小孔,密封孔后置4℃冰箱过液;用洗涤缓冲液洗板4次,每孔加100 μL二抗检测液,置室温下1 h;洗涤缓冲液洗板4次,每孔加酶联液100 μL;洗板4次,每孔底物100 μL,30 min时加0.5N硫酸溶液终止液50 μL,450 nm波长酶标仪比色测定。

3. 统计学方法 检测数据用 x- ±s表示,用SPSS 9.0统计软件包进行 t检验、 q检验。

二、结果

淋巴瘤患者血浆u-PA和u-PAR水平,B细胞型u-PA和u-PAR水平升高,见 表1。T细胞型血浆u-PA和u-PAR水平,仅见u-PAR水平明显上升,u-PA水平与对照组比较差异无统计学意义( P>0.01)。在B、T细胞2类淋巴瘤中,B细胞型血浆u-PA和u-PAR水平均明显高于T细胞型( P<0.01)。淋巴瘤未累及骨髓组中血浆u-PA和u-PAR水平,仅为u-PAR高于对照组差异有统计学意义( P<0.01),而累及组血浆u-PA和u-PAR水平均明显高于非累及组和对照组,见 表2。

以世界卫生组织(WHO)标准,以骨髓浸润淋巴瘤细胞25%为界,分为>25%(淋巴瘤细胞性白血病)者6例和<25%者11例,前组血浆u-PA和u-PAR水平均高于后组,但仅见u-PAR水平差异有统计学意义,见 表3。21例经治疗获得缓解(部分缓解和完全缓解)B细胞性淋巴瘤,血浆u-PA和u-PAR水平较治疗前下降,见 表4。

表1 淋巴瘤患者血浆u-PA和u-PAR水平( x- ±s, ng/L)
表2 淋巴瘤累及与未累及骨髓患者血浆u-PA和u-PAR水平( x- ±s, ng/L)
表3 骨髓淋巴瘤细胞<25%和>25%患者血浆u-PA和u-PAR水平( x- ±s, ng/L)
表4 21例B细胞型淋巴瘤治疗前后血浆u-PA和u-PAR水平比较( x- ±s, ng/L)
三、讨论

u-PA源于组织细胞分泌,溶解血栓作用弱,主要是通过酶促反应产生的纤溶酶等成分对胞外基质的水解。但u-PA发挥作用需要细胞膜上一种糖蛋白的介导,这一糖蛋白便是u-PA受体u-PAR。u-PAR 是新发现的纤溶一员,多种细胞均有表达,主要功能是负责捕捉并浓集uPA,增强细胞表面的纤溶作用,同时诱导的细胞效应参与多种生理病理过程,这为病理研究提供了一些新思路。生理状态下血管内皮细胞和平滑肌细胞以及单核细胞释放0.1~2.0 ng/mL可溶性u-PAR[ 6],组织病变时细胞表达和释放增加。因此,检测血浆u-PA和u-PAR可从一个侧面反映细胞(分泌u-PA和u-PAR)分子水平的变化。

研究表明急性白血病细胞表达u-PA明显高于正常骨髓细胞,且出现在血浆的u-PA同步升高[ 3, 4]。对淋巴瘤血浆u-PA和u-PAR的临床研究缺乏这方面的报道,我们检测发现淋巴瘤患者血浆u-PA和u-PAR水平升降多变,在初诊患者中,血浆u-PA和u-PAR水平升高主要见于B细胞型,且血浆u-PAR水平升高比u-PA显著;T细胞型淋巴瘤血浆u-PA未见明显变化,u-PAR水平有意义升高,但低于B细胞型。提示B细胞有明显的分泌u-PA和u-PAR的作用,并参与u-PA纤溶途径和对基质金属蛋白酶的水解[ 1],我们认为这对了解B、T细胞型淋巴瘤的分子病理有重要的参考价值。进一步检测可见,淋巴瘤患者血浆u-PA和u-PAR水平升高主要见于骨髓累及者,并与淋巴瘤细胞的浸润量有关,这对评估淋巴瘤骨髓浸润有重要意义,同时说明肿瘤细胞表达u-PA和u-PAR尤其是u-PAR异常与其病理有关。观察治疗后获得缓解患者的血浆u-PA和u-PAR水平,随着缓解而下降,这一结果可表明血浆u-PA和u-PAR可作为疗效观察的指标。我们认为,这些研究还可为今后尝试阻抑u-PA纤溶途径(如给予抑制剂——纤溶酶原激活物抑制剂1和2)的新辅助疗法提供有价值的参考。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 吴利平, 郭小呈, 杨美英, 等. 加强u-PA纤溶途径与基质金属蛋白酶互促反应的研究概况[J]. 现代中西医结合杂志, 2007, 16(33): 5067-5068. [本文引用:2]
[2] Zhou H, Wu X, Lu X, et al. Evaluation of plasma urokinase-type plasminogen activator and urokinase-type plasminogen-activator receptor in patients with acute and chronic hepatitis B[J]. Thromb Res, 2009, 123(3): 537-542. [本文引用:1]
[3] 徐根波, 卢兴国, 赵小英, 等. 髓系白血病血浆尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体的检测与临床意义[J]. 中华内科杂志, 2003, 42(3): 199-200. [本文引用:2]
[4] Mustjoki S, Alitalo R, Stephens RW, et al. Blast cell-surface and plasma soluble urokinase receptor in acute leukemia patients: relationship to classfication and response to therapy[J]. Thromb Haemost, 1999, 81(5): 705-710. [本文引用:2]
[5] 卢兴国. 骨髓细胞学和病理学[M]. 北京: 科学出版社, 2008: 759-877. [本文引用:1]
[6] Chavakis T, Kanse SM, Yutzy B, et al. Vitronectin concentrates proteolytic activity on the cell surface and extracellular matrix by trapping soluble urokinase receptor-urokinase complexes[J]. Blood, 1998, 91(7): 2305-2312. [本文引用:1]