引用本文
孙丽, 楼燕茹, 牧启田. 中性粒细胞CD64指数测定在肺部感染性疾病诊断中的价值. 25(2): 100-102
SUN Li, LOU Yanru, MU Qitian. Value of the determination of neutrophil CD64 index in the diagnosis of pulmonary infectious diseases. Labratory Medicine, 25(2): 100-102  
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中性粒细胞CD64指数测定在肺部感染性疾病诊断中的价值
孙丽, 楼燕茹, 牧启田
宁波市第一医院检验科, 浙江 宁波 315010

作者简介：孙丽,女,1965年生,主管技师,主要从事免疫学和临床检验工作。

摘要
目的

探讨中性粒细胞CD64指数测定在肺部感染性疾病诊断和判断抗感染疗效中的价值。

方法

对细菌性肺炎患者30例(其中29例经抗菌药物治疗后X线摄片和临床症状显示好转,为治疗后组)、支原体肺炎患者22例以及健康对照组30名用流式细胞仪进行中性粒细胞CD64指数测定,并行血常规、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)测定。

结果

细菌性肺炎组CD64指数和CRP与健康对照组和支原体肺炎组比较,差异有统计学意义(P<0.01),与治疗后组比较差异有统计学意义 (P<0.05)。CD64指数与CRP呈正相关(r=0.728,P=0.001)。CD64指数诊断细菌性肺炎的敏感性为84%、特异性为91%,CRP敏感性为89%、特异性为78%。

结论

CD64指数测定有助于肺部细菌感染早期诊断、鉴别诊断以及对抗感染疗效的考核。

关键词: CD64指数; 肺部感染; C反应蛋白; 肺炎支原体
中图分类号:R446.62 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2010)02-0100-03
Value of the determination of neutrophil CD64 index in the diagnosis of pulmonary infectious diseases
SUN Li, LOU Yanru, MU Qitian
Department of Clinical Laboratory, Ningbo First Hospital, Zhejiang Ningbo 315010, China
Abstract
Objective

To explore the clinical significance of the determination of neutrophil surface CD64 in the early diagnosis of pulmonary infectious diseases and its anti-infection effect.

Methods

The experimental group included 30 patients with bacterial pneumonia, 22 patients with mycoplasma pneumonia and 30 healthy subjects as controls. In the 30 patients with bacterial pneumonia, there were 29 patients as after-treatment group, whose situations of X-Ray film and clinical symptom were improved after antibacterial treatment. Their levels of CD64 were detected by flow cytometry. The blood routine examination, the erythrocyte sedimentation rate(ESR) and the dynamic change of the C reactive protein (CRP) were also determined.

Results

The CD64 index and the CRP value in the bacterial pneumonia group had a statistical difference comparing with the mycoplasma pneumonia group, the healthy control group (P<0.01) and the after-treatment group (P<0.05). The CD64 index and the CRP value had a positive correlation (r=0.728,P=0.001). The sensitivity and specificity of CD64 index were 84% and 91% respectively, while the sensitivity and specificity of CRP value were 89% and 78% respectively.

Conclusions

The determination of CD64 index may assist in the early diagnosis of pulmonary bacterial infection and the observation of anti-infection effect for pulmonary infection patients.

Keyword: CD64 index; Pulmonary infection; C reactive protein; Mycoplasma pneumonia

肺通过支气管、气管、鼻咽、鼻腔与外界相通,极易受外界环境因素影响和病原微生物入侵而患病。肺炎是呼吸系统常见疾病,可由细菌、支原体及病毒等感染而致病。目前诊断肺部感染最常用的方法有血常规、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、血培养、痰培养和X线摄片等。但临床上常会遇到细菌性感染、支原体感染、病毒性感染以及肿瘤引起的发热难以鉴别的问题,对感染性质的正确判断可以减少临床误诊、误治,指导合理使用药物。中性粒细胞CD64在新生儿感染发生和发展过程中的表达及在新生儿败血症中的诊断价值已有报道[ 1]。本研究对肺部感染患者进行CD64指数测定,探讨其在肺部感染性疾病的诊断和抗感染疗效观察中的应用价值。

材料和方法
一、研究对象

2008年9至11月宁波市第一医院呼吸科住院的肺部感染患者中,根据X线摄片和内科学诊断标准[ 2]诊断为肺炎患者52例,男30例,女22例,年龄28~93岁。细菌培养阳性者为细菌性肺炎组30例,其中经抗菌药物治疗后X线摄片并结合临床症状显示好转者为治疗后组,29例(1例自动出院);肺炎支原体IgM抗体阳性且细菌培养阴性者为支原体肺炎组22例。对照组30名,来自同期健康体检者,男17名,女13名,年龄41~85岁。

二、仪器与试剂

美国Beckman Coulter公司EPICS XL4·MCL型临床台式流式细胞仪和LenkoTM64试剂盒专用中性粒细胞CD64定量检测试剂,CD64指数分析软件Quanti CALC由Trilliumdx Diganostics公司提供。CRP检测仪器为美国Beckman Coulter公司IMMAGE全自动免疫分析仪,Beckman-ACT 5 DIFF GEN.S血液分析仪。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺炎支原体IgG和IgM类抗体,试剂盒为美国GenBio公司产品,anthos2010型酶标分析仪为郑州博赛公司产品,BACTEC9240血培养仪为美国BD公司产品。试剂和质控品均为仪器配套产品。

三、方法

1. 标本来源 抽取住院患者48 h内血标本,分别行CD64指数和血常规[乙二胺四乙酸钾(EDTA-K2)抗凝全血]、CRP、肺炎支原体抗体、ESR(枸橼酸钠抗凝全血)、血培养检测,同时留取痰液标本做细菌培养。采用同期健康体检者血标本进行CD64指数和CRP测定。

2. 检测方法 CD64指数是指待测细胞上CD64的平均荧光道数与淋巴细胞上CD64的平均荧光道数之比。以单核细胞作为内部阳性对照,单核细胞CD64指数须>8.0;以淋巴细胞作为内部阴性对照,淋巴细胞CD64指数须<1.0。CD64指数检测采用抗凝全血50 μL+试剂A 50 μL,室温暗处孵育15 min后加稀释试剂B 1 mL、试剂C 5 μL,混匀,置流式细胞仪检测。CRP采用免疫比浊法(仪器及质控品由Beckman Coulter公司提供),肺炎支原体IgG、IgM类抗体测定采用ELISA。

四、统计学方法

采用SPSS 12.0统计软件进行方差分析和Pearson相关分析, P<0.05为差异具有统计学意义。

结果
一、CD64指数和CRP检测结果

细菌性肺炎组CD64指数分别与支原体肺炎组和健康对照组比较,差异均有统计学意义( P<0.01);细菌性肺炎治疗后组分别与治疗前、支原体肺炎组和健康对照组比较,差异均有统计学意义( P<0.05);支原体肺炎组与健康对照组比较,差异无统计学意义( P>0.05)。细菌性肺炎组CRP与支原体肺炎组和健康对照组比较,差异具有统计学意义( P<0.01);细菌性肺炎治疗后组与治疗前、支原体肺炎组和健康对照组比较,差异具有统计学意义( P<0.05);支原体肺炎组与健康对照组比较,差异无统计学意义( P>0.05),见 表1。

表1 肺炎组与健康对照组CD64指数和CRP检测结果
二、相关性分析

Pearson相关分析显示,30例细菌性肺炎患者CD64指数与CRP间呈直线正相关( r=0.728, P=0.001)。

三、CD64指数、CRP的敏感性和特异性

以本组资料作受试者工作特征(ROC)曲线,计算得出CD64指数最佳临界值为1.00时诊断细菌感染的敏感性为84%,特异性为91%;CRP以8 mg/L为临界值时,诊断感染的敏感性为89%,特异性为78%。

讨论

CD64是免疫球蛋白的Fc段受体,能识别IgG的Fc片段,通过Fc受体与IgG的Fc片段结合,参与免疫球蛋白介导的生理功能或病理损伤过程。CD64表达受细胞因子调节,起着连接细胞免疫和体液免疫的桥梁作用[ 2, 3]。中性粒细胞CD64正常情况下有低水平表达,受到细菌等刺激时表达显著增高。有研究资料显示,CD64的表达在炎症发生0~24 h明显升高[ 4],杨旭燕等[ 5]报道CD64用于诊断细菌性感染的敏感性和特异性分别为85%和91%。Fjaertoft等[ 6]认为急性细菌感染中性粒细胞CD64的表达在新生儿、成人及老年人间无差异。Allen等[ 7]认为非细菌性感染CD64没有高表达。国内报道CD64表达在革兰阳性菌和阴性菌间无差异,且表达时间相对较早(4~6 h即出现),是中性粒细胞产生吞噬和杀菌的早期信号[ 8, 9],在细菌性感染中具有很高的特异性,有助于早期诊断细菌感染和判断感染的程度[ 10, 11]。

肺炎的早期诊断和及时治疗是决定预后的关键,尤其是老年人和免疫力低下患者还可能导致不良结局。特别是对肺炎性质难以鉴别的病例,细菌培养最具特异性,但受到报告及时性不理想的限制,常被作为回顾性的确认指标。目前肺炎的诊断多依据X线摄片、白细胞(WBC)计数与分类、CRP、ESR和细菌培养。CRP和WBC计数除细菌性感染外,还在急性心肌梗死、创伤、手术、应激、肿瘤浸润等均可增高,作为非特异性炎症指标不适合于早期诊断[ 12]。

本实验结果显示,CD64指数在细菌性肺炎组呈现高表达,在支原体肺炎组和健康对照组不增高,细菌性肺炎组与健康对照组、支原体肺炎组比较,差异具有统计学意义( P<0.01),可以作为肺部细菌感染诊断和鉴别诊断的重要指标。细菌性肺炎经抗菌药物治疗后CD64指数有明显下降,与治疗前比较,差异具有统计学意义( P<0.05),可以作为抗菌药物治疗有效性的指标。本组数据ROC曲线显示,CD64指数≥1.00和CRP≥8 mg/L为临界值时,CD64指数敏感性和特异性分别为84%和91%,CRP敏感性和特异性分别为89%和78%。显示出CD64指数在敏感性和特异性方面优于CRP,我们认为CD64指数测定有较高的临床应用价值。相关性分析显示出CRP与CD64指数呈直线正相关( P=0.001),作为炎症指标用于感染性疾病的诊断有临床价值。实验中还发现,个别细菌培养阳性病例的发病初期CRP并不升高,CD64指数已经有高表达,可能与CRP表达时间相对较晚有关,说明CD64指数增高对急性感染更有意义,可以用于协助临床早期诊断和及时治疗。

CD64指数测定虽有着上述优点,但也和其他检测方法一样存在假阳性的问题,由于本研究存在局限性,我们认为CD64指数不能完全替代其他实验室检测方法,还需要临床医生结合病情和相关检测结果具体分析,对疾病进行诊断和治疗。

总之,流式细胞仪中性粒细胞CD64指数的测定作为一种快捷、方便、敏感性高、特异性好的检测方法,对感染性疾病的诊断和鉴别诊断有帮助,值得临床推广使用。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 陈秀兰. 败血症新生儿外周血中性粒细胞CD64表达的意义[J]. 实用儿科临床杂志, 2008, 23(15): 1208-1209. [本文引用:1]
[2] 陈灏珠. 实用内科学[M]. 第11版. 北京: 人民卫生出版社, 2001: 1565-1583. [本文引用:2]
[3] Fossati G, Bucknall RC, Edwards SW. Fcgamma re-ceptors in autoimmune diseases[J]. Eur J Clin Invest, 2001, 31(9): 821-831. [本文引用:1]
[4] Ng PC, Li K, Wong RP, et al. Neutrophil CD64 expres-sion: a sensitive diagnostic marker for late-onset nosocomial infection in very low birthweight infants[J]. Pediatr Res, 2002, 51(3): 296-303. [本文引用:1]
[5] 杨旭燕, 林进, 厉有名. 系统性红斑狼疮患者外周血中性粒细胞CD64的表达[J]. 中华内科杂志, 2003, 42(12): 854-856. [本文引用:1]
[6] Fjaertoft G, Hakansson L, Ewald U, et al. Neutrophils from term and pretem newborn infants express the high affinity Fcgamma-receptor I (CD64) during bacterial infections[J]. Pediatr Res, 1999, 45(6): 871-876. [本文引用:1]
[7] Allen E, Bakke AC, Purtzer MZ, et al. Neutrophils CD64 expression: distinguishing acute inflammatory autoimmune disease from systemic infections[J]. Ann Rheum Dis, 2002, 61(6): 522-525. [本文引用:1]
[8] 尤海燕, 焦志军, 朱海涛. 新生儿败血症中性粒细胞表面CD64表达及临床意义[J]. 山东医药, 2008, 48(10): 84-85. [本文引用:1]
[9] Wagner C, Deppisch R, Denefleh B, et al. Expression patterns of the lipopolysaccharide receptor CD14, and the FCgamma receptors CD16 and CD64 on polymorphonuclear neutrophils: data from patients with severe bacterial infections and lipopolysaccharide-exposed cells[J]. Shock, 2003, 19(1): 5-12. [本文引用:1]
[10] 徐茜茜, 陈灵芝, 徐海滨, 等. CD64在新生儿感染诊断中的价值[J]. 临床儿科杂志, 2006, 24(3): 185-187. [本文引用:1]
[11] 邵洁, 黄新文, 孙眉月, 等. 新生儿败血症外周血中性粒细胞CD64的表达及其意义[J]. 中华儿科杂志, 2005, 43(7): 510-513. [本文引用:1]
[12] 郝玲, 杨恒伟, 李艳芝, 等. 败血症新生儿血中性粒细胞CD64表达的意义[J]. 实用儿科临床杂志, 2007, 22(22): 1701-1702. [本文引用:1]