引用本文
田国力, 朱伟明, 王燕敏, 许洪平, 姚静. 新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查的初步报告. 25(2): 86-88
TIAN Guoli, ZHU Weiming, WANG Yanmin, XU Hongping, YAO Jing. The primary report on neonatal screening for congenital adrenal hyperplasia. Labratory Medicine, 25(2): 86-88  
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新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查的初步报告
田国力, 朱伟明, 王燕敏, 许洪平, 姚静
上海交通大学附属儿童医院,上海 200040

作者简介：田国力,女,1968年生,硕士,主任技师,主要从事新生儿疾病筛查工作。

摘要
目的

开展新生儿先天性肾上腺皮质增生症(CAH)筛查,降低残疾儿童的发生率,提高人口素质。

方法

采用时间分辨荧光免疫分析法检测新生儿滤纸干血片上的17-羟孕酮(17-OHP)浓度。

结果

筛查93 971例新生儿,确诊5例,CAH发生率为1/18 795;98.7%的新生儿17-OHP<40 nmol/L。

结论

开展新生儿CAH筛查可以早期诊断和治疗CAH,值得在我国推广。17-OHP的阳性临界值取40 nmol/L是可行的。

关键词: 17-羟孕酮; 先天性肾上腺皮质增生症; 新生儿疾病筛查
中图分类号:R446.1 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2010)02-0086-03
The primary report on neonatal screening for congenital adrenal hyperplasia
TIAN Guoli, ZHU Weiming, WANG Yanmin, XU Hongping, YAO Jing
Shanghai Children's Hospital, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200040, China
Abstract
Objective

To develop the neonatal screening for congenital adrenal hyperplasia(CAH)in order to prevent children from congenital disability and improve the aristogenesis in our country.

Methods

17-hydroxyprogesterone (17-OHP) of blood samples was measured by time-resolved fluorescence immunoassay in neonates.

Results

93 971 neonates were screened .Five were confirmed as having CAH and the incidence was 1∶18 795. 98.7% of 17-OHP level was lower than 40 nmol/L.

Conclusions

CAH can be diagnosed and prevented by CAH neonatal screening in neonates which is worth to be extended. It is feasible for the 17-OHP positive cut-off to be 40 nmol/L.

Keyword: 17-hydroxyprogesterone; Congenital adrenal hyperplasia; Neonatal screening

先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia,CAH)是一组因肾上腺皮质激素合成途径中酶缺陷引起的疾病,属常染色体隐性遗传病。21-羟化酶缺乏(21-hydroxylase deficiency, 21-OHD) 是CAH中最常见类型,临床上分为失盐型、单纯男性化型和非典型型3种类型。新生儿CAH筛查指测定血17-羟孕酮(17-hydroxyprogesterone,17-OHP)水平进行21-OHD的筛查诊断[ 1]。我们于2007年9月起开展新生儿CAH筛查,确诊5例患儿。

材料和方法
一、对象

新生儿筛查网络来自上海9个区县32家产院。从2007年9月至2008年12月,共计筛查93 971例新生儿。

二、方法

1. 样本采集和递送 新生儿出生72 h后,针刺足跟,采血滴于S&S903滤纸上,室温下自然晾干。样本经邮政部门绿色通道递送至新生儿筛查实验室检测。

2. 方法 采用芬兰Wallac公司生产的DELFIA系统[时间分辨荧光免疫分析法(time-resolved fluorescence immunoassay, TRFIA)]及Neo 17-OHP试剂盒检测滤纸干血片样本中的17-OHP浓度。严格按实验室建立的标准操作规程进行操作,依次经过打孔、加铕(Eu)标记物和抗体、孵育、加扩增液,最后测定标记物的计数值。采用Multicalc软件进行计算处理,直接得出浓度值,以nmol/L表示。每块测定板上均有试剂盒内附带的高(60 nmol/L)、低(20 nmol/L)2种浓度质控样本同时测定。

3. 原理 该方法为固相二抗抗原竞争法,样本中17-OHP与示踪剂Eu标记的17-OHP共同竞争加入的兔抗17-OHP IgG抗体,并被固相包被板上抗兔IgG抗体(二抗)结合,在微孔板表面形成二抗-抗原-Eu复合物。经洗涤去除剩余Eu标记17-OHP,加入扩增液,分离结合到固相上的Eu,形成高荧光强度的螯合剂。样本中17-OHP浓度与荧光强度成反比。

4. 判断标准 2次检测结果≥40 nmol/L为筛查阳性,召回新生儿再次采集微量血测定17-OHP;对于17-OHP≥100 nmol/L者,排除早产儿(孕周<37周)及低体重儿(体重<2 500 g)后,加做血电解质、促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropin, ACTH)、皮质醇等项目测定。若血皮质醇水平低于正常,ACTH升高,并伴有低血钠、高血钾出现,则可确诊。

结果

一、93 971例新生儿中有1 221例17-OHP≥40 nmol/L,占1.3%。经原样本复查后,仍有214例≥40 nmol/L。从中确诊5例CAH,其中男性4例,女性1例,CAH发生率为1/18 795。此5例患儿的17-OHP值分别为277、434、483、621和1 214 nmol/L,经临床鉴别全部为失盐型和单纯男性化型。

二、筛查阳性的214例新生儿,召回176例,召回率为82.2%(176/214)。召回新生儿随访情况见 表1。在召回的176例新生儿中,早产儿和足月低体重儿共有108例,占61.36%;23例因感染或心肺功能异常,出生后均入住过新生儿病房,占13.07%;正常新生儿40例,占22.73%。

表1 176名召回新生儿随访情况

三、93 971例新生儿样本,其17-OHP水平分布情况见 表2。17-OHP分布在0~932 nmol/L,其中98.7%新生儿17-OHP水平在40.0 nmol/L以下,30~39.9 nmol/L有1 504例。浓度值的95百分位值、97百分位值及99百分位值依次为25.3、31.6和43.9 nmol/L。

表2 93 971例新生儿17-OHP水平频数分布

四、每块检测板都有高、低2个质控样本同时测定,17-OHP水平分别为20 nmol/L(17.5~26.3 nmol/L)及60 nmol/L(47.7~71.5 nmol/L)。经25个实验批次数据统计,高、低2个质控样本的批内变异系数( CV)分别为10.30%和16.60%;批间 CV分别为7.96%和9.69%。

五、参加美国疾病控制中心(Center for Disease Control and Prevention, CDC)新生儿疾病筛查17-OHP检测实验室室间质量评价,共计5批25份样本检测,每批测定值均在回报群体结果的95%可信区间内,17-OHP测定值与临床判断的符合率为100%。

讨论

先天性肾上腺皮质增生症是由于类固醇激素合成过程中酶的缺陷,使皮质醇合成障碍,促肾上腺皮质激素(ACTH)分泌增加,而导致肾上腺增生一组疾病。常见的酶缺陷包括21-羟化酶(21-OHD)、11β-羟化酶、3β-羟脱氢酶、17α-羟化酶和皮质酮甲基氧化酶等,其中21-OHD缺乏是CAH中最为多见的一种,约占90%~95%[ 2]。

新生儿CAH筛查可早期诊断并及时治疗CAH,防止失盐型新生儿肾上腺危象、休克及后遗症的产生,降低死亡率;也可预防女性患儿由于外生殖器男性化造成的性别判断错误、预防过多雄性激素造成的身材矮小、心理、生理发育障碍[ 3]。但是新生儿CAH筛查仅能使70% 21-OHD缺乏的患儿在未出现临床症状前得以早期诊断和治疗,无法鉴定出所有CAH患儿,尤其是轻型患儿,其假阴性率最少为1/3[ 4]。

据各国各地区的新生儿CAH筛查报道,发病率在1/10 000~1/20 000不等,有明显的种族和地区的差别[ 5, 6]。本研究采用TRFIA测定93 971名新生儿,确诊5例CAH,经临床鉴别,全部是失盐型和单纯男性化型。初步得出上海地区发病率为1/18 795。

17-OHP 是筛查CAH的敏感指标。但根据17-OHP的免疫测定进行筛查,有较高的假阳性,尤其在早产儿及危重新生儿中;出生后合并心肺疾病时17-OHP也会升高[ 7]。Van der Kamp等[ 8]制定了胎龄相关的17-OHP临界值,低出生体重的参考数据也被改进,以减少早产儿和低体重儿筛查的假阳性。本研究在176名召回新生儿中,早产儿97例,足月低体重儿11例,两者占61.36%;有感染或先天性心脏患者等入住新生儿病房进行治疗的有23例,占13.07%;另有40例正常新生儿,占22.73%,估计是检测板上特异性抗体与其他类固醇激素的交叉反应所导致的假阳性[ 9]。近来有人通过串联质谱方法来分析血中的17-OHP及其他类固醇激素,可使交叉反应所致假阳性率降至最低[ 10]。

开展新生儿CAH筛查的实验室不同,采用的17-OHP阳性临界值也不同。据2008年美国CDC统计[ 11],参加室间质量评价的131家筛查实验室的17-OHP阳性临界值分布范围较广,在4.67~212.32 nmol/L之间,其中美国44家筛查实验室平均阳性临界值为93.84 nmol/L,而87家其他国家的筛查实验室采用的阳性临界值平均为43.15 nmol/L。我国筛查实验室多采用30 nmol/L[ 12]。本研究93 971例新生儿的17-OHP值分布显示,97.1%的浓度值低于30 nmol/L,98.7%的浓度值低于40 nmol/L,而其97百分位值和99百分位值分别为31.60和43.90 nmol/L。因此本实验室的17-OHP阳性临界值定为40 nmol/L。

新生儿疾病筛查实验结果为确诊疾病的重要指标,故筛查实验室的质量控制尤为重要。每块17-OHP检测板都设有高、低2个质控,实验室室内质控的批内 CV和批间 CV均在10%左右,表明实验室测定结果是可靠稳定的。接受国际权威机构对新生儿疾病筛查实验室质量监控是对大批量筛查样本的检测质量的有效保证[ 13]。我们参加美国CDC的室间质量评价5批次共25份样本的检测,每批测定的值均在回报群体结果的95%可信区间内,17-OHP测定值与临床判断的符合率达100%。表明本实验室检测结果是准确的。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
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