铜绿假单胞菌4年耐药性监测结果分析

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裘春宁, 董晓勤. 铜绿假单胞菌4年耐药性监测结果分析[J].检验医学, 2015,25(11): 919-920
[J]. Labratory Medicine, 2015,25(11): 919-920 复制到剪切板

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《检验医学》编辑部

铜绿假单胞菌4年耐药性监测结果分析

裘春宁, 董晓勤

杭州市第一人民医院检验科,浙江杭州 310006

作者简介:裘春宁,女,1976年生,学士,主管技师,主要从事微生物和免疫学工作。

摘要

关键词: 铜绿假单胞菌; 耐药性; 监测

中图分类号:R378.99 文献标志码:B 文章编号:1673-8640(2010)11-0919-02

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近年来铜绿假单胞菌在临床分离的致病菌中呈逐年上升趋势, 已成为医院感染的重要病原菌。铜绿假单胞菌多重耐药性日趋严重, 对多种抗菌药物有较高耐药性。我们对杭州市第一人民医院2005至2008年间铜绿假单胞菌的临床感染情况及对18种抗菌药物的耐药性及耐药趋势进行回顾性分析。

一、材料和方法

1. 材料 (1)菌株:收集2005年1月至2008年12月杭州市第一人民医院送检的各类标本中分离的铜绿假单胞菌共3 996株, 剔除同一患者相同部位重复菌株后得1 545株。质控菌株为铜绿假单胞菌ATCC 27853; (2)药敏纸片和培养基:药敏纸片为英国OXOID公司产品, 阿米卡星、氨曲南、左氧氟沙星、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林、头孢哌酮-舒巴坦、庆大霉素、哌拉西林-他唑巴坦、替卡西林-克拉维酸、亚胺培南、环丙沙星、头孢曲松、美洛培南、头孢唑啉、米诺霉素、复方磺胺甲口恶唑。MH培养基购于英国OXOID公司。

2. 方法 (1)菌株鉴定:所有菌株采用VITEKAMS-60全自动微生物鉴定系统及GNI⁺卡进行细菌学鉴定; (2)药敏试验:采用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)2008年推荐的纸片扩散法(K-B)测定其对抗菌药物的敏感性, 结果判定按照CLSI标准执行。

3. 统计学方法采用WHONET5.4软件进行分析。

二、结果

1. 铜绿假单胞菌在临床标本中的分布主要分布于痰及咽拭子, 占79.0%, 见表1。

表1 铜绿假单胞菌在临床标本中的分布 (%)

2. 2005至2008年间铜绿假单胞菌对18种抗菌药物的耐药率铜绿假单胞菌对18种抗菌药物均有不同程度的耐药, 其中头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、阿米卡星和头孢他啶较敏感, 左氧氟沙星和环丙沙星2005至2007年间耐药率差异均无统计学意义(P=0.11), 而庆大霉素耐药率与2005年相比有所下降, 差异有统计学意义(P< 0.01)。对其他抗菌药物耐药率逐年变化不大, 见表2。

表2 2005至2008年间铜绿假单胞菌对18种抗菌药物的耐药率 (%, 株)

三、讨论

铜绿假单胞菌目前已成为本院院内感染的主要病原菌, 该菌在临床分离中呈逐年增多趋势^[1], 常可引起下呼吸道、伤口、血液、胆汁、泌尿系统等严重感染。感染病例大多高龄合并基础疾病, 有广谱抗菌药物、激素、化疗药物等免疫抑制剂使用史, 气管插管、气管切开并机械通气史^[2]。在本次回顾调查中发现, 铜绿假单胞菌分离率有逐年增加的趋势, 2008年标本分离株数占全年菌株分离总数之比已达到7.5%。从表1标本来源分布显示呼吸道分离率最高, 占79.0%, 可见铜绿假单胞菌是呼吸道的主要感染菌。应用呼吸机是定植和感染的危险因素, 与文献^[3]报道相似。其次是胆汁标本和尿液标本, 各占6.0%和4.1%。侵袭性操作可能是胆道感染的主要原因。

表2药敏结果显示, 头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、阿米卡星和头孢他啶耐药率相对较低, 分别为21.1%、29.6%、22.6%和25.8%, 是临床治疗铜绿假单胞菌感染的首选药物。耐药率> 50.0%的为头孢唑啉98.6%、复方磺胺甲口恶唑93.4%、米诺霉素81.0%、头孢曲松78.7%、头孢噻肟68.2%和替卡西林-克拉维酸59.5%, 且其耐药率有逐年增加的趋势。奎诺酮类抗菌药物也呈现较高耐药性。亚胺培南的耐药率在2007年曾上升到50.3%, 可能与临床近年大量滥用碳青霉烯类抗菌药物有密切关系, 用药频度与细菌耐药呈正相关^[3] 。资料结果显示2007至2008年胆汁分离株急速增多, 且出现对多种抗菌药物耐药, 并出现“ 全耐” 的铜绿假单胞菌。究其原因, 发现我院多重耐药及耐亚胺培南铜绿假单胞菌主要在ICU及消化内科呈流行播散。我们对耐亚胺培南铜绿假单胞菌进行研究, 发现本院耐亚胺培南铜绿假单胞菌中已有金属β -内酰胺酶的产生, 但发生率较低。携带率为6.7%。周田美^[4]报道耐亚胺培南铜绿假单胞菌OprD2基因缺失率为80.6%。表明本院铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药与OprD2基因缺失及产金属β -内酰胺酶有关。其他耐药机制有待进一步探讨。

铜绿假单胞菌的多重耐药是医院感染和患者久治不愈的主要原因^[5]。耐亚胺培南铜绿假单胞菌的出现给临床治疗带来极大的困扰^[6]。因此, 提醒合理应用抗菌药物已是刻不容缓的任务。临床医师一定要结合药物敏感试验来选择抗菌药物, 防止耐药菌株在医院感染的流行和暴发。要加强对铜绿假单胞菌耐药率有计划的连续监测^[7], 密切监测耐药菌株的变迁及其发展是防止和延缓铜绿假单胞菌耐药流行的必要措施。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献

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[1]	曹敬荣, 沈定霞, 罗燕萍, 等. 检测临床分离的产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的基因型[J]. 军医进修学院学报, 2007, 28(2): 132-134. [本文引用:1]
[2]	李娟, 李智伟. 2003-2007年我院1 073株铜绿假单胞菌的临床分布及耐药性监测[J]. 中国感染与化疗杂志, 2009, 9(4): 286-288. [本文引用:1]
[3]	梁陈方, 蒋利君, 韦晓谋. 第三代头孢菌素的用药频度与耐药现状分析[J]. 中国药物与临床, 2005, 5(3): 192-194. [本文引用:2]
[4]	周田美, 余道军, 董晓勤, 等. 铜绿假单胞菌耐药性分析及耐药基因检测[J]. 中华临床感染病杂志, 2009, 2(3): 154-158. [本文引用:1]
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[6]	孙震, 殷俊, 高伟, 等. 耐亚胺培南铜绿假单胞茵的耐药机制研究[J]. 中国抗生素杂志, 2009, 34(1): 52-56. [本文引用:1]
[7]	蒋景华, 陈文光, 章泽豹, 等. 244 株铜绿假单胞菌的分布及耐药性分析[J]. 中华医院感染学杂志, 2007, 17(12): 1576-1577. [本文引用:1]

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... 三、讨论铜绿假单胞菌目前已成为本院院内感染的主要病原菌,该菌在临床分离中呈逐年增多趋势^[1],常可引起下呼吸道、伤口、血液、胆汁、泌尿系统等严重感染 ...

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. 2009, 9(4):286-288

2003-2007年我院1 073株铜绿假单胞菌的临床分布及耐药性监测

李娟, 李智伟

目的分析2009年新疆维吾尔自治区人民医院临床分离菌对常用抗菌药物的耐药性.方法采用全自动微生物分析仪VITEK32 、2Compact进行细菌鉴定,药敏试验采用VITEK-GNS药敏试验卡及Kirby-Bauer法.使用WHONET 5.4软件进行数据的统计分析.结果 2009年共检出4 618株细菌,革兰阳性菌1 228株,其中耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率分别为59.6%和89.2%;青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSSP)为64.4%,其中PRSP的发生率为48.9%,PISP为15.6%.革兰阴性杆菌3 390株,其中肠杆菌科细菌2 250株,大肠埃希菌、克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌)、奇异变形杆菌中产ESBLs株分别为64.8%、48.5%和38.2%,3种菌产ESBLs株对测试的抗菌药物的耐药率均高于非产ESBLs株.检出对美罗培南、亚胺培南耐药的产ESBLs大肠埃希菌,未发现对两者耐药的克雷伯菌属.不发酵糖革兰阴性杆菌1 108株,不动杆菌属耐药率较低的药物有亚胺培南和头孢哌酮-舒巴坦,铜绿假单胞菌耐药率最低的是阿米卡星8.3%、头孢哌酮-舒巴坦11.9%.嗜麦芽窄食单胞菌对米诺环素、左氧氟沙星和磺胺甲口恶唑-甲氧苄啶都显示较好的抗菌活性.洋葱伯克霍尔德菌对头孢他啶、磺胺甲口恶唑-甲氧苄啶、米诺环素和左氧氟沙星的耐药率均大于50.0%.结论 2009年我院细菌耐药性监测表明,临床分离菌对所测抗菌药物均具有不同程度的耐药,医院应加强对药品的管理和监控,定期进行细菌耐药性监测,对指导临床用药有重要意义.

... 感染病例大多高龄合并基础疾病,有广谱抗菌药物、激素、化疗药物等免疫抑制剂使用史,气管插管、气管切开并机械通气史^[2] ...

2005

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. 2005, 5(3):192-194 DOI:doi:10.3969/j.issn.1671-2560.2005.03.009

第三代头孢菌素的用药频度与耐药现状分析

梁陈方, 蒋利君, 韦晓谋

目的了解某城市对第三代头孢菌素(简称TGC)的使用情况和使用水平以及临床分离的革兰阴性杆菌(G-杆菌)对TGC的耐药现状,为科学合理使用该类抗生素提供必要参考依据.方法以5家有代表性的医院3年间(2000-2002)对TGC的使用消耗情况以及临床药敏试验结果为分析样本,采用世界卫生组织(WHO)推荐的限定日剂量(defined daily dose,DDD)法分析各种抗菌药的用药频度(DDDs),即治疗日数;采用纸片扩散法、Microscan系统的Mic法进行药敏试验并严格按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)1999年制定的规则进行操作及判读.结果 3年来TGC总的DDDs为130.64万个治疗日,其中2000、2001、2002年的MF分别为33.35、43.12、54.17万个治疗日;3年来头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮的DDDs分别为73.39、25.66、21.65、9.94万个治疗日.3年来G-杆菌对TGC的平均耐药率为40.92%,其中2000、2001、2002年的耐药率分别为30.04%、41.05%、42.58%.G-杆菌对头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮的耐药率分别为51.43%、46.02%、33.17%、33.08%.结论 TGC的使用过多过滥,细菌耐药水平高.DDDs增长过高过快,导致G杆菌对TGC的耐药率不断上升,且DDDs值越大,细菌耐药率越高.提示临床应高度重视DDDs与细菌耐药的关系及其带来的危害,采取有效措施,科学合理使用TGC,整体降低TGC的DDDs,进而降低或延缓细菌耐药的蔓延和扩散,保证用药的有效和安全.

... 应用呼吸机是定植和感染的危险因素,与文献^[3]报道相似 ...

... 3%,可能与临床近年大量滥用碳青霉烯类抗菌药物有密切关系,用药频度与细菌耐药呈正相关^[3] ...

2009

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. 2009, 2(3):154-158 DOI:doi:10.3760/cma.j.issn.1674-2397.2009.03.007

铜绿假单胞菌耐药性分析及耐药基因检测

周田美, 余道军, 董晓勤

目的观察杭州市第一人民医院临床分离的铜绿假单胞菌的耐药性变迁及相关耐药基因.方法采用WHONET软件对2003-2007年临床分离的1489株铜绿假单胞菌的药物敏感性试验结果进行统计分析;用琼脂稀释法测定11种抗菌药物对36株多药耐药铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC);用PCR法检测β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶等编码基因,并对PCR扩增产物进行测序分析.结果铜绿假单胞菌对氨曲南、亚胺培南、头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素和阿米卡星的耐药率由2003年的13.4%、10.6%、8.7%、7.9%、12.7%、12.7%、6.7%、 15.8%、20.5%、24.7%和10.9%分别增至2007年的35.3%、40.9%、 18.4%、32.4%、32.9%、32.0%、21.9%、37.8%、38.6%、39.4%和34.8%;11种抗菌药物对多药耐药铜绿假单胞菌的MIC90均≥128 μg/mL.36株多药耐药铜绿假单胞菌中,β-内酰胺酶编码基因阳性占58.3%(21/36),氨基糖苷类修饰酶基因阳性占88.9%(32/36),oprD2基因缺失率为80.6%(29/36).结论铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药率呈增高趋势,多药耐药情况严重,临床上应给予高度重视.多药耐药铜绿假单胞菌携带多种β-内酰胺酶编码基因及氨基糖苷类修饰酶基因,oprD2基因的缺失率高. Abstract： Objective To investigate the trend of antimicrobial resistance and the prevalence of resistant genes in Pseudomonas aeruginosa strains isolated from Hangzhou First People's Hospital.Methods Antimicrobial susceptibilities of 1489 Pseudomonas aeruginosa strains isolated from 2003 to 2007 were statistically analyzed using WHONET.MICs of 11 antimicrobisis to 36 multi-drug-resistant Pseudomonas aerugionosa strains were determined by agar dilution method.Genes of β-lactamases(BLA)and aminoglycoside-modifying enzymes(AMEs)were detected by PCR and the PCR products were sequenced.Results The resistant rates to aztreonam,imipenem,ceftazidime,cefepime,piperacillin,piperacillin/tazobactam.cefoperazone/sulbactam,ciprofloxacin,levofloxacin,gentamicin and amikacin were increased from 13.4%,10.6%,8.7%,7.9%,12.7%,12.7%,6.7%, 15.8%,20.5%,24.7% and 10.9%in 2003 to 35.3%,40.9%,18.4%, 32.4%,32.9%,32.0%,21.9%,37.8%,38.6%, 39.4% and 34.8% in 2007.respectively.Hish MICs of 11 antimicrobiMs for multi-drug resistant Pseudomonas aerouginosa were determined with MIC90≥128 μg/mL.In 36 multi-drug resistant Pseudomonas aeruginosa strains,21(58.3%)strains carried β-lactamase genes and 32 strains(88.9%)carried aminoglycosidemodifying enzyme genes,while the deletion rate of oprD2 was 80.6%(29/36).Conclusions The resistant rates to common antibiotics of Pseudomonas aeruginosa have increased.resulting in multi-drug resistance.Genes of β-lactamases and aminoglycoside-medifying enzymes are prevalent in multi-drug resistant Pseudomonas aeruginosa strains,with the common deletion of oprD2.

... 周田美^[4]报道耐亚胺培南铜绿假单胞菌OprD2基因缺失率为80 ...

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... 铜绿假单胞菌的多重耐药是医院感染和患者久治不愈的主要原因^[5] ...

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. 2009, 34(1):52-56

耐亚胺培南铜绿假单胞茵的耐药机制研究

孙震, 殷俊, 高伟

目的对临床分离的14株耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药机制进行研究.方法药敏试验检测对15种常用抗菌药物的耐药情况;协同试验筛选产金属酶菌株和聚合酶链反应检测金属酶基因及oprD基因;氰氯苯腙检测主动外排情况及其对亚胺培南最低抑菌浓度(MIC)的影响.结果耐亚胺培南的铜绿假单胞菌对其它常用抗菌药物耐药率也很高,其中,5株产VIM-2型金属酶,11株oprD基因检测阴性.2株在有氰氯苯腙存在时对亚胺培南的MIC降低至原值的1/4,表明这2 株有主动外排系统参与对亚胺培南的耐药.结论 OprD2蛋白表达缺失是本研究中铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因,其次为产VIM-2型金属酶和主动外排系统,且至少有4株存在两种以上耐亚胺培南的机制.

... 耐亚胺培南铜绿假单胞菌的出现给临床治疗带来极大的困扰^[6] ...

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. 2007, 17(12):1576-1577 DOI:doi:10.3321/j.issn:1005-4529.2007.12.044

244 株铜绿假单胞菌的分布及耐药性分析

蒋景华, 陈文光, 章泽豹

目的对2006年1-12月分离出的铜绿假单胞菌分布及耐药性进行分析.方法收集临床分离的铜绿假单胞菌进行培养鉴定,采用纸片扩散法(K-B法)或微量稀释法(MIC),结果根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)相关文件判断.结果 1年间分离出244株铜绿假单胞菌,对16种抗菌药物体外敏感试验结果显示,耐药率最高的是复方新诺明98.8%;其次是米诺环素、四环素、替卡西林/克拉维酸,分别为70.1%、58.6%、54.5%.结论加强对铜绿假单胞菌的耐药性连续监测,总结出医院各病区主要致病菌的耐药规律,减少耐药菌的产生有重要意义.

... 要加强对铜绿假单胞菌耐药率有计划的连续监测^[7],密切监测耐药菌株的变迁及其发展是防止和延缓铜绿假单胞菌耐药流行的必要措施 ...