引用本文
褚静英, 羽晓瑜, 陆玉霞, 徐廷云, 孙中文, 徐文慧. 网织红细胞镜检法与全自动法比较分析[J].检验医学, 2015,25(11): 841-843
CHU Jingying, YU Xiaoyu, LU Yuxia, XU Tingyun, SUN Zhongwen, XU Wenhui. Comparison analysis of microscope test and automatic test of reticulocyte count[J]. Labratory Medicine, 2015,25(11): 841-843  
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网织红细胞镜检法与全自动法比较分析
褚静英, 羽晓瑜, 陆玉霞, 徐廷云, 孙中文, 徐文慧
苏州卫生职业技术学院检验药学系,江苏 苏州 215009

作者简介:褚静英,女,1967年生,学士,主管技师,从事医学检验教学与研究。

摘要
目的 比较镜检法与全自动法检测网织红细胞(Ret)结果的准确性。方法 针对不同部位采血的标本(末梢血或静脉血)和不同前处理的标本分别采用镜检法和全自动法作Ret计数。结果 不同处理标本Ret检测结果比较:不抗凝静脉血(0.921±0.402)%,乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝静脉血(1.022±0.399)%,两者差异无统计学意义( P>0.05);不同部位采血的标本Ret检测结果比较:不抗凝静脉血为(1.262±0.519)%,不抗凝末梢血为(1.159±0.481)%,两者差异无统计学意义( P>0.05);EDTA-K2抗凝静脉血为(1.371±0.399)%,EDTA-K2抗凝末梢血为(1.342±0.500)%,两者差异无统计学意义( P>0.05);不同方法检测Ret的结果比较:全自动法为(1.326±0.461)%,镜检法为(1.386±0.418)%,两者差异无统计学意义( P>0.05)。结论 对于健康正常人,规范化Ret计数结果不受抗凝剂的使用、不同部位采血及检测方法的影响。
关键词: 网织红细胞; 镜检法; 全自动法; 静脉血; 末梢血
中图分类号:R446.11 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2010)11-0841-03
Comparison analysis of microscope test and automatic test of reticulocyte count
CHU Jingying, YU Xiaoyu, LU Yuxia, XU Tingyun, SUN Zhongwen, XU Wenhui
Faculty of Laboratory Medicine and Pharmacy, Suzhou Health College,Jiangsu Suzhou 215009,China
Abstract
Objective To compare the accuracy of microscope test and automatic test of reticulocyte (Ret) count.Methods The microscope test and automatic test were used to count Ret, and the samples were collected from different resources (capillary blood or venous blood)or were treated differently before being tested.Results As the sample being treated differently, the values of Ret count were(0.921±0.402)% in the venous blood without anticoagulant and (1.022±0.399)% in the venous blood with dipotassium ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA-K2),and there was no significant difference in Ret count between anticoagulant blood and no anticoagulant blood( P>0.05). As the sample from different resources,the values of Ret count were(1.262±0.519)% in the venous blood without anticoagulant,(1.159±0.481)% in the capillary blood without anticoagulant,(1.371±0.399)% in the venous blood with EDTA-K2 and(1.342±0.500)% in the capillary blood with EDTA-K2,and there was no significant difference in Ret count between venous blood and capillary blood ( P>0.05). As using different methods to test the samples,the Ret count results were (1.326±0.461)% by automatic test and (1.386±0.418)% by microscope test,and there was no significant difference in Ret count between microscope test and automatic test( P>0.05).Conclusions For healthy people,the anticoagulant, sample resource and determination method will not influence on the Ret count result.
Keyword: Reticulocyte; Microscope test; Automatic test; Venous blood; Capillary blood

网织红细胞(reticulocyte, Ret)是介于晚幼红细胞(RBC)和成熟RBC之间尚未完全成熟的年轻RBC。Ret数量变化反映骨髓造血功能, 其计数准确性对贫血、白血病、肿瘤化疗等疾病的诊断和鉴别诊断以及疗效观察有重要意义[1~3], 因此Ret检测是重要的临床血液学检查指标[4]。

Ret胞质中尚残留部分嗜碱性物质(核糖体和核糖核酸), 可被煌焦油蓝等染料染成蓝色网状结构或颗粒状结构, 可用光学显微镜计数, 也可通过全自动血液分析仪或流式细胞仪来检测, 为探明镜检法和全自动法对不同前处理或不同部位采血标本检测Ret的准确性差异, 我们对其作了分析比较。

材料和方法
一、标本

标本采自苏州卫生职业技术学院医学检验专业和部分护理专业的健康学生志愿者, 女, 年龄18~20岁, 平均19± 1.0岁。标本的处理和检测方法:(1)静脉血直接涂片与乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝静脉血涂片后用镜检法进行Ret检测; (2)末梢血与静脉血(均不抗凝)涂片用镜检法作Ret检测; (3)EDTA-K2抗凝静脉血涂片镜检法和全自动法分别作Ret检测。

二、试剂

1. 镜检法用10 g/L煌焦油蓝生理盐水溶液, 按全国临床检验操作规程配制。

2. 全自动法所用稀释液、清洗液、染液、Ret质控物由美国Coulter STKS公司提供。

三、细胞计数

1. 全自动法 采用美国Coulter STKS全自动血液分析仪进行Ret计数, 每份标本检测3次, 计算平均值。

2. 镜检法 按全国临床检验操作规程。采用Miller窥盘计数3次, 计算平均值。

四、统计学方法

数据用 x̅± s表示, 并利用SPSS 10.0统计软件进行配对t检验。

结 果
一、不同前处理标本的检测结果比较

抽取同一健康人静脉血标本, 分成2份, 1份不抗凝, 立即取2滴血液与2滴10 g/L煌焦油蓝生理盐水溶液混匀后置37℃15 min后制片计数; 另1份用EDTA-K2抗凝后混匀, 取2滴抗凝血液与2滴10 g/L煌焦油蓝生理盐水溶液混匀后置37℃15 min后制片计数。Ret计数结果经统计学分析, P> 0.05, 差异无统计学意义(表1), 表明抗凝剂使用与否对静脉血标本的镜检法Ret计数无明显影响。

表1 静脉血标本的显微镜法Ret检测结果
二、不同部位采血标本检测结果的比较

1. 抗凝标本检测结果比较 分别取同一受检对象的静脉血和末梢血(均用EDTA-K2抗凝), 混匀后分别取2滴抗凝血液与2滴10 g/L煌焦油蓝生理盐水溶液混匀后置37℃15 min后制片计数。Ret计数结果经统计学分析, P> 0.05, 差异无统计学意义(表2), 表明抗凝处理的静脉血和末梢血来源对Ret计数无明显影响。

表2 不同部位采血的抗凝标本镜检法Ret检测结果

2. 直接涂片检测结果比较 分别取同一受检对象的静脉血及末梢血, 采血后均不加抗凝剂, 立即取2滴血液与2滴10 g/L煌焦油蓝生理盐水溶液混匀后置37℃15 min后制片计数; Ret计数结果经统计学分析, P> 0.05, 差异无统计学意义(表3), 表明不经抗凝处理的静脉血和末梢血来源对Ret计数无明显影响。

表3 直接涂片显微镜法Ret检测结果

3. 镜检法与全自动法检测结果的比较 取静脉血加EDTA-K2抗凝后分别进行全自动法和镜检法检测, 结果经统计学分析, P> 0.05, 差异无统计学意义(表4), 表明抗凝静脉血采用镜检法和全自动法测定对Ret计数无明显影响。

表4 镜检法与全自动法检测Ret结果的比较
讨 论

Ret镜检法是八十年代国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐的方法。九十年代后, 全自动法逐渐使用于临床。据文献报道, Ret检测除了与染色温度、染色时间有一定关系外, 镜检法及全自动法Ret检测结果是否有差异还没有确定。有报道提示全自动法及显微镜法(均抗凝标本) Ret检测间差异有统计学意义[5, 6]; 全自动法(抗凝静脉血)与显微镜法(不抗凝末梢血)差异有统计学意义[7]; 全自动法(末梢血抗凝)Ret检测及显微镜法(末梢血不抗凝)间差异有统计学意义[8]。但是另有报道表明自动Ret分析仪与显微镜法计数Ret的比较两种方法对比, P> 0.05, 差异无统计学意义[9]。本实验结果显示:(1)抗凝剂使用与否对静脉血标本的显微镜法Ret计数无明显影响; (2)经与不经抗凝处理, 不同采血部位对Ret显微镜法计数均无明显影响; (3)抗凝静脉血采用显微镜法和全自动法测定对Ret计数无明显影响。这些结果的综合信息, 提示无论采用静脉血还是末梢血, 标本经还是不经抗凝处理, 检测是采用显微镜还是采用全自动仪器, 都对Ret计数不产生显著影响。显微镜计数方法较仪器法繁琐, 其重复性较差。

本实验结果提示:只要严格规范操作技术, 对于正常健康人, 选择静脉血或末梢血、标本加或不加抗凝剂、采用镜检法或全自动法(检测系统调整在完全正常状态下)测定, 均可获得Ret计数的准确结果。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
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