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张蕾, 汪嘉, 李智, 何春燕, 王艳, 周芸, 俞珏. XE-2100血液分析仪异常细胞警示标志的实际应用[J].检验医学, 2015,25(11): 837-840
ZHANG Lei, WANG Jia, LI Zhi, HE Chunyan, WANG Yan, ZHOU Yun, YU Jue. Application of the abnormal cell warning information of the XE-2100 hematology analyzer[J]. Labratory Medicine, 2015,25(11): 837-840  
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XE-2100血液分析仪异常细胞警示标志的实际应用
张蕾, 汪嘉, 李智, 何春燕, 王艳, 周芸, 俞珏
同济大学附属第十人民医院检验科,上海 200072

作者简介:张 蕾,女,1971年生,学士,主管技师,主要从事临床检验工作。

摘要
目的 通过对Sysmex XE-2100血液分析仪所提供的异常细胞警示标志与外周血细胞各类细胞对应关系的研究,评价其在实际应用中的价值。方法 按临床标本的检测流程对925例门诊及住院标本进行全血血细胞分析后,进行手工细胞形态分类,运用受试者工作特征(ROC)曲线及其他统计学方法并对其进行分析。结果 警示标志与手工镜检进行相应细胞一致性分析:IG(未成熟细胞)、Blasts(幼稚细胞)2项指标与手工镜检比较显示: Kappa值为0.461、0.431,显示两者一致性尚可;left shift(左移)、atypical Ly(异型淋巴细胞)、Abn Ly/L-Blasts(异型淋巴/原始淋巴) Kappa值分别为0.280、0.101、0.234,显示一致性不够理想;当多个警示标志联合出现时,对异常细胞检出阳性符合率升高,Blasts能对白血病细胞起到提示的作用,尤其当与其他标志同时出现时,应得到极高的重视。ROC曲线显示,当白细胞介于2.5×109/L ~20×109/L(不含白血病)时,IG曲线下面积(area under the curve,以下简称Area)0.911,准确性较高,cutoff值可选在1.5处,此时IG能较准确预报患者核左移的情况。结论 仪器提供的警示标志能起到很好的提示作用,但对血细胞形态的观察依然十分必要。实验室的复检规则应根据实验依据制定,以降低复片率,提高检验效率。
关键词: 异常细胞; 血液分析仪; 警示标志
中图分类号:R446.11 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2010)11-0837-04
Application of the abnormal cell warning information of the XE-2100 hematology analyzer
ZHANG Lei, WANG Jia, LI Zhi, HE Chunyan, WANG Yan, ZHOU Yun, YU Jue
Department of Clinical Laboratory, the Tenth People's Hospital, Tongji University, Shanghai 200072, China
Abstract
Objective To investigate the clinical application of the abnormal cell warning information of the Sysmex XE-2100 hematology analyzer by studying the relationship with different types of peripheral blood cells.Methods A total of 925 whole blood samples were collected and analyzed by Sysmex XE-2100 hematology analyzer, and the manual microscopy was performed for morphology classification. The results were analyzed by receiver operating characteristic (ROC) curve and other statistical methods.Results Kappa values of immature granulocyte (IG) (0.461) and Blasts (0.431) had concordance by comparing with microscopy. However, kappa values of left shift, atypical lymphocyte (Ly) and Abn Ly/L-Blasts were 0.280, 0.101 and 0.234, respectively, which were inconsistent with each other. As several warning information jointly, the positive coincidence rate of abnormal cell increased, and Blasts had the symptomatic effect on leukemia. When Blasts appearing with other warning information, it should be paid more attention. The results of the ROC curve showed that the area under ROC of IG was 0.911, when the range for white blood cell (WBC) count was 2.5×109/L to 20×109/L (except leukemia). The accuracy was good, and the cut-off value should be at 1.5. In this condition, IG was sensitive and specific for measuring a degenerative left shift.Conclusions Although the abnormal cell warning information of the Sysmex XE-2100 hematology analyzer provides good information, manual microscopy for morphology classification is still necessary in order to improve examination efficiency.
Keyword: Abnormal cell; Hematology analyzer; Warning information

现今血液分析仪已成为检验医学中必不可少的仪器, 提供着种类繁多的参考数据, 在疾病的诊治中发挥着重要的作用, 与此同时, 也对仪器的使用者提出了新的课题, 即如何快速而有效地运用这些数据, 去伪存真。XE-2100血液分析仪对白细胞(WBC)设置了双重报警信号系统, 一种是异常报警信息, 另一种是异常怀疑信息, 本次研究就Sysmex XE 2100血液分析仪的WBC警示标志中的异常怀疑信息, 即日常工作中最常见的IG(未成熟粒细胞)、Blasts(幼稚细胞)、left shift(左移)、 atypical Ly (异型淋巴细胞)、Abn Lympho/L-Blasts(异常淋巴/原始淋巴)进行比对分析, 对仪器的报警提示进行评价, 参照“ 国际标准41条” , 结合本院的实际情况制定WBC分类复检规则, 合理运用仪器所提供的报警信息来筛选所需复片的标本, 为优化科室的复检规则提供理论依据, 提高工作效率。

材料和方法
一、标本来源

2009年8月至2009年11月同济大学附属第十人民医院血常规检测标本925例。所有标本均为真空管抽血, 乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝。其中血液科248例, 外科243例, 内科192例, 肿瘤介入科62例, 中医科58例, 急诊科45例, 妇产科21例, 急诊监护病房(ICU) 18例, 其他科室38例。年龄4~94岁, 男510 例, 女415例。

二、仪器与试剂

1. 全自动血液分析推片染片流水线(HST)系统 由日本Sysmex 公司的1台XE-2100 全自动血液分析仪和1台SP-1000i全自动制片染色仪及其流水线轨道HST-N组成的全自动血液分析系统。由XE-2100血液分析仪检测的标本, 于患者信息管理系统(IPU)中设有特定代码用于显示、储存和判断检测结果, 仪器根据预设的复检规则进行标记。信息自动传送至中文报告软件Laboman easyaccess 4.2s, 软件将符合条件的样本的信息向流水线控制程序单元(LASC)发出电子订单, 最后由LASC控制SP-1000i制片染色仪对这些样本进行制片和染色。

2. 试剂 XE-2100血液分析仪所用试剂均为Sysmex 公司生产的原装配套试剂。SP-1000i所用染液为BASO染液, 染色缓冲液按叶应妩主编的《全国临床检验操作规程》第三版自行配制, pH值范围6.4~6.8。

3. 质控 检测前由Sysmex公司提供的配套校正品SCS-1000进行校正, 检测期间Sysmex公司提供配套质控品e-CHECK(level1、level3)、上海市临床检验中心室内质控品均在控。

三、方法

1. 检测方法 所有研究标本按标本检测流程SOP进行检测, 由本室工作时间超过10年, 并有中级技术资格的技术人员以双盲法按中华人民共和国卫生行业标准的WBC分类技术参考方法进行镜检, 每份标本计数200个细胞, 结果取均值。

2. 结果判定 仪器警示标志与手工镜检一致性分析结果阳性判定见表1; IG受试者工作特征(ROC)曲线阳性判定:见表1中IG项, 镜检符合定义为“ 1” , 否则为“ 0” ; 阳性标本(出现警示标志的标本)与异常细胞的检出阳性判断标准:阳性标本判断本次共显示有(1)Blasts; (2)IG; (3)left shift; (4)atypical Ly; (5)Abn Lympho/L-Blasts; (6)Blasts IG; (7)Blasts、atypical Ly; (8)IG、left shift; (9)IG、atypical Ly; (10)Blasts、 left shift; (11)Blasts、IG、atypical Ly; (12)Blasts、 atypical Ly、left shift; (13)IG、 left shift、atypical Ly; (14)Blasts、 IG、left shift、 atypical Ly。 手工镜检出现以下任一情况即为阳性:(1)原始、幼稚白血病细胞≥ 1%; (2)杆状核细胞> 5%; (3)晚幼粒以上阶段≥ 1%; (4)异型淋巴细胞≥ 5%; (5)浆细胞≥ 1%。

表1 警示标志与相应细胞手工镜检一致性分析阳性判断
四、统计学方法

采用SPSS11.5统计学软件, 对仪器显示的Blasts、left shift、 atypical Ly、Abn Lympho/L-Blasts分别计算Kappa值, 判断单个警示标志与相应细胞检出的一致性。(Kappa值≥ 0.75, 两者达到满意的一致性, Kappa值> 0.4, 两者一致性尚可, Kappa值< 0.4, 一致性不理想)。

采用SPSS11.5统计学软件, 以手工分类为标准, WBC介于2.5× 109/L~20× 109/L(不含白血病)做IG的ROC曲线, 计算曲线下面积, 了解其准确性(一般情况下, 曲线下面积为0.5~0.7时, 表示诊断准确性较低; 面积为0.7~0.9时, 表示诊断准确性中等; 面积大于0.9时, 诊断准确性较高)选取截点, 寻求灵敏度较高, 特异性适中的点作为复片的临界点。

以阳性标本为单位, 通过血涂片显微镜检查, 计算警示标志对异常细胞检出的阳性率, 了解警示标志在实际工作中可起到的作用。

结 果

用Kappa值评价XE-2100血液分析仪警示标志与相应细胞检出一致性。结果见表2。

表2 XE-2100血液分析仪异常细胞警示标志与相应细胞手工镜检的一致性比较

IG的ROC曲线当WBC介于2.5× 109/L~20× 109/L(不含白血病)共464例, 显示Area 0.911, 见图1, 坐标值见表3。

图1 WBC 2.5× 109/L ~20× 109/L(不含白血病)

表3 ROC曲线坐标 WBC 2.5× 109/L ~20× 109/L (不含白血病)

仪器提示警示标志的方式及其对异常细胞的检出符合率, XE-2100血液分析仪对异常细胞有多种组合的方式, 当多种警示标志联合出现时, 阳性符合率较单独出现明显提高, 具体结果见表4。

表4 仪器提示警示标志的方式及其对异常细胞的检出符合率
讨 论

全自动五分类血液分析仪的使用有效地提高了临床血液学细胞检验的质量和效率, 为异常细胞的检出和减少人工操作创造了有利的条件, Sysmex XE-2100血液分析仪作为目前较为先进的分析仪, 其检测性能已受到较大肯定, 其半导体激光流式细胞原理结合细胞化学荧光染色的细胞分类技术, 在正常情况下保证了细胞分类的质量。然而在复杂的实际工作中是否一直都能达到极好的效果, 则需要我们不断研究。

此次实验共收集标本925例, 其中有警示标志出现的365例, 占总标本量的39.5%。因此了解这些警示标志的作用, 可为日常工作的顺利进行提供极大的帮助。

首先我们对每个警示标志进行与相应细胞的一致性分析, 结果显示:IG、Blasts kappa值分别为0.461、0.431, 一致性尚可, 据此可认为遇此两类标志出现应分片镜检; left shift、atypical Ly、Abn Lympho/L-Blasts, kappa值分别为0.280、0.101、0.234, 显示一致性不够理想, 此类标志出现可先涂片快速浏览, 是否分片视情况而定。

其次, 我们发现警示标志对异常细胞的提示有交叉现象, 如IG可提示幼稚细胞, Blasts也可提示未成熟粒细胞的出现, atypical Ly除提示异型淋巴细胞外亦可提示浆细胞, Abn Lympho/L-Blasts对破碎细胞较敏感, 常出现在慢淋及癌症化疗患者中; 且多个标志若联合出现, 其对异常细胞检出的符合率较单个出现有明显的提高。因此当遇多个警示标志联合出现时, 需加强重视, 分片确认。

需要引起注意的是本实验中共有8例白血病患者的标本仪器未检出异常, 而手工分类后发现有少量的幼稚细胞或早期粒细胞。可见对白血病仅仅凭借警示标志的有无作为手工镜检复片的规则是不够的, 有多个报道指出应充分重视对白血病患者血细胞分类, 无论结果是否正常, 仪器是否有提示, 均应进行细胞形态学的人工镜检。我们也一直认为仅仅根据警示标志的有无作为手工镜检复片的规则是不可取的, 为防止仪器对异常细胞的漏检、误检, 我科针对医院的实际情况, 参照“ 国际标准41条” , 及对仪器的报警提示评价的结果, 制定一套缜密的复片规则系统, 涉及警示标志的出现、疾病种类, 细胞数, 分类结果等多方面。其中就将出现以上警示标志的提示、已确诊的白血病患者等列为复片规则, 此次研究亦认同这一点。

高要求的分片规则必然会带来较高的分片率, 导致报告时间的延长。为合理降低分片率, 有效地使用有限的时间, 需要我们对仪器的提示有更进一步的了解。在对研究IG时发现, 相对于其他警示标志, 仪器对其有专门的百分比率显示(百分率增高可提示核左移), 出现次数较多(共出现300例, 其中单独出现143例), 假阳性较高(单独出现时对异常细胞的阳性符合率仅为36.4%)。由于我科对WBC总数> 20× 109/L, < 2.5× 109/L及白血病都有明确的分片要求, 对IG的研究集中在WBC 2.5× 109/L ~20× 109/L 之间, 非白血病患者的标本。我们用ROC曲线探讨其对检测的准确性, 寻求敏感性较高, 特异性适当的临界点。结果显示:ROC Area 0.911, 检出准确性较高; IG为1.5左右时, 其灵敏度0.833, 1-特异性0.145, 以此点作为分片的临界点, 可较好地解决IG假阳性过高的问题, 较大的降低分片率。

血液分析仪已成为检验医学中必不可少的仪器, 在疾病的诊治中发挥着重要的作用, 我们研究各类血液分析仪的目的, 并不只为了了解其各种性能, 更为了能从中找出其缺陷, 弥补其不足, 在提高工作效率的同时亦能不断提升我们的工作质量, 减少误诊漏诊, 使疾病及早的发现、及早得到治疗。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
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