引用本文
杨宏云, 李海霞, 王学晶, 徐国宾. 健康人群丙氨酸氨基转移酶及天门冬氨酸氨基转移酶参考区间初步调查[J].检验医学, 2015,25(10): 761-764
YANG Hongyun, LI Haixia, WANG Xuejing, XU Guobin. Primary investigation of serum alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase reference intervals in healthy population[J]. Labratory Medicine, 2015,25(10): 761-764  
Permissions
Copyright©2010, 《检验医学》编辑部
《检验医学》编辑部
健康人群丙氨酸氨基转移酶及天门冬氨酸氨基转移酶参考区间初步调查
杨宏云, 李海霞, 王学晶, 徐国宾
北京大学第一医院检验科,北京 100034

作者简介:杨宏云,女,1970 年生,副主任技师,主要从事临床生化研究和信息系统管理。

摘要
目的 建立含5'-磷酸吡哆醛(PLP)的试剂测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT) 和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)催化活性浓度的参考区间,并与不含PLP试剂方法的参考区间作比较。方法 采用国际临床化学联合会(IFCC)推荐方法测定3 249名健康人血清ALT和AST,试剂采用罗氏公司试剂,分别用罗氏公司cfas定标液中加PLP及不加PLP的标准液进行定标。结果 加入PLP的试剂测定健康人血清ALT、AST的结果与不加PLP试剂的测定结果有明显差异( P<0.000 1)。健康人群血清ALT、AST测定值男、女性之间有明显差异( P<0.000 1)。如以含PLP试剂检测值的95%分位作为参考值上限时,ALT为男性55 IU/L、女性36 IU/L;AST为男性42 IU/L、女性33 IU/L。如以不含PLP试剂检测值的95%分位作为参考值上限时,ALT为男性50 IU/L、女性32 IU/L;AST为男性35 IU/L、女性28 IU/L。二者均有随年龄升高的趋势。结论 含PLP的ALT和AST试剂测定健康人ALT和AST活性升高。PLP能有效地激活ALT和AST活性,用含PLP的试剂测定ALT、AST活性可准确反映患者血液中ALT、AST的实际含量。推荐临床用含PLP的试剂作为测定ALT、AST的常规方法。
关键词: 丙氨酸氨基转移酶; 天冬氨酸氨基转移酶; 5'-磷酸吡哆醛; 参考区间
中图分类号:Q555 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2010)10-0761-04
Primary investigation of serum alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase reference intervals in healthy population
YANG Hongyun, LI Haixia, WANG Xuejing, XU Guobin
Department of Clinical Laboratory, Peking University First Hospital, Beijing 100034,China
Abstract
Objective To investigate the reference intervals of serum alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) measured by the reagents with pyridoxal 5'-phosphate (PLP), and compare with the reference intervals detected by the reagents without PLP.Methods A total of 3 249 healthy subjects were enrolled in this study. According to the recommended method by International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine(IFCC), their ALT and AST levels were determined, and the detection system was calibrated by the cfas (Roche) reagents with and without PLP, respectively.Results There was significant difference between the concentrations of ALT and AST detected by the reagents with and without PLP ( P<0.000 1). The concentrations of ALT and AST were different between healthy males and females ( P<0.000 1). As the 95th upper limit of reference interval detected by the reagents with PLP, ALT was 55 IU/L for males, and 36 IU/L for females,and AST was 42 IU/L for males, and 33 IU/L for females,respectively. As the 95th upper limit of reference interval detected by the reagents without PLP,APT was 50 IU/L for males, and 32 IU/L for females, and AST was 35 IU/L for males, and 28 IU/L for females, respectively. The levels of ALT and AST both increased with age.Conclusions The activities of ALT and AST detected by the reagents with PLP increase in healthy subjects. PLP can effectively activate the activities of ALT and AST. Detecting the concentrations of ALT and AST by the reagents with PLP can indicate the true activities of ALT and AST. The detecting method of ALT and AST by reagents with PLP is recommended as the routine method.
Keyword: Alanine aminotransferase; Aspartate aminotransferase; Pyridoxal 5'-phosphate; Reference interval

丙氨酸氨基转移酶(ALT) 和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)是检测肝细胞损伤的传统指标。5'-磷酸吡哆醛(PLP)是ALT、AST 的辅基, 通过酶蛋白中的PLP和磷酸吡哆胺的互变, 促使氨基酸的氨基和酮酸的酮基进行转化。脱辅基酶无活性, 加入PLP后 ALT、AST转为有活性的全酶[1, 2]。2007年国际临床化学联合会(IFCC)推荐在ALT、AST测定试剂加入足量的PLP以测定血清中全部酶的活性[1, 2]。目前国内只有西门子(原德灵)公司和美国强生公司产品按IFCC要求加了PLP, 而罗氏和贝克曼公司有2种不同产品可供选择, 日本临床化学协会推荐的方法则不加PLP, 我国所有的产品均未加入PLP。不加PLP试剂检测ALT和AST的参考区间分别定为0~40、0~45 U/L。加入PLP后, 其参考区间是否有所改变, 我们对此作一初步调查。

材料和方法
一、调查对象

表面健康人群3 249例, 经过问卷调查、体格检查以及生化、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、尿液、B超和心电图等检查排除高血脂、肝病、肾病及其他系统疾患, 其中男882名、女2 367名。根据年龄分为4组:≤ 30岁、31~40岁、41~50岁、> 50岁。

二、测定方法

1. 仪器、试剂和校准品 仪器为日立7600全自动生化分析仪, 试剂为罗氏ALT、AST液体双试剂和PLP片剂及配套校准品cfas。按照生产厂商提供的参数设定反应条件, cfas设定值与是否加入PLP相对应。

2. 质控品 冻干质控血清Ⅰ 、Ⅱ 为朗道公司产品。

三、统计学方法

运用Medcalc统计软件对数据进行分析, 加PLP与不加PLP组间比较采用配对t检验, 健康人群按性别和年龄分组采用AVOVA方差分析。P< 0.05表示差异有统计学意义。血清ALT、AST参考区间采用单侧95%建立。

结 果
一、加PLP及不加PLP的试剂测定ALT、AST结果的比较

加PLP及不加PLP的试剂测定ALT、AST的结果差异均有统计学意义(P< 0.000 1) , 相关良好(r=0.95), 见图1。

图1 加PLP及不加PLP的方法测定ALT、AST的相关图

二、男、女性之间ALT、AST测定结果比较

加PLP及不加PLP的试剂分别测定男、女性ALT、AST, 结果差异均有统计学意义(P< 0.000 1)。男性略高于女性。3 249 名健康人群测定ALT活性, 总体数据呈偏态分布, 5%、10%、25%、50%、75%、90%、95%、99%上限数值见表1。

表1 健康人群男、女性加PLP与不加PLP测定ALT、AST活性的参考值 (IU/L)
三、不同年龄组ALT、AST测定结果比较

将3 249名健康人根据不同年龄组和性别进行统计, 采用95%分位数值, 结果见表2。不同年龄分组中加PLP的ALT、AST值均高于不加PLP的值。

表2 不同年龄组ALT、AST加PLP及不加PLP的参考值 (IU/L)
四、ALT、AST测定值随年龄递增的变化趋势

各年龄段ALT、AST活性测定值随年龄变化的趋势见图2。中间点代表均值, 上下横线代表均数95%可信区间的上下限。

图2 不同年龄段加PLP及不加PLP测定ALT、AST的变化趋势

讨 论

ALT、AST是肝脏损害的敏感指标, 血清中的ALT、AST以全酶和脱辅基酶同时存在, PLP为其辅酶, 在反应中起到传递氨基作用。测定ALT活性时, 加入PLP可提高酶的活性[3]。特别是在肾病患者中, 由于患者血液中PLP含量比正常人低, 若底物中含有PLP可显著提高ALT的活性。各个样本加PLP及不加PLP测得的酶活力的差异比例并不一致, 不能按比例换算。本研究表明, 加PLP及不加PLP的试剂测定ALT、AST活性结果存在差异 (P< 0.000 1), 相关良好(r=0.95), 且加PLP的试剂测定结果略高。由于某些疾病的影响或者某种治疗(如血液透析)使患者血液中PLP的含量明显减少, 这样在测定ALT时容易使结果偏低。所以, 使用加入PLP的试剂可以保证ALT的测定值更加准确地反映患者的实际情况[4]。因此, 建立该方法相应的参考范围有利于ALT、AST的临床应用。

目前, 采用加PLP的ALT试剂的实验室是少数, 多数实验室采用不加PLP的试剂。在IFCC提供的推荐或参考方法中, 均强调了使用PLP。各医院检验部门ALT、AST测定值之间的差异给患者和临床医生造成很多困惑和不便, 给临床医疗、科研和管理工作带来一些不利的影响。使用公认的酶标准物使不同的常规方法的测定结果得到统一, 这是国际上最近提出的酶测定标准化的新途径[5]。加入PLP的改良法是IFCC推荐的测定方法, 而国产试剂均未加入PLP。罗氏公司的ALT、AST试剂中所含的PLP对ALT、AST有明显的激活作用, 加PLP及不加PLP的结果差异有统计学意义。罗氏公司试剂说明书提供的ALT参考区间为男性 10~50 U /L, 女性10~35 U/L, 与本研究的参考区间略有差异。这种差异可能来自2个方面, 第一是不同人种体内含量的差异; 第二是不同人种体内本身所含PLP的量不同, 从而使ALT的活性有所差异。因此为了真实地反映样本内所有氨基转移酶的活力, 在底物中加入PLP, 使所有氨基转移酶全部成为全酶后再参与反应, 这样的酶活力要高于不加PLP的结果。男、女之间性别的差异与激素分泌、肌肉量、运动量等因素有关。由于某些疾病的影响或者某种治疗(如腹透、血液透析)使患者血液中PLP的含量明显减少, 这样在测定ALT、AST时容易使结果偏低。所以, 使用加入PLP的试剂可以保证ALT、AST的测定值更加准确地反映患者的实际情况。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] Schumann G, Bonora R, Ceriotti F, et al. IFCC primary reference procedures for the measurement of catalytic activity concentrations of enzymes at 37 degrees C. International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. Part 5. Reference procedure for the measurement of catalytic concentration of aspartate aminotransferase[J]. Clin Chem Lab Med, 2002, 40(7): 725-733. [本文引用:2]
[2] Schumann G, Bonora R, Ceriotti F, et al. IFCC primary reference procedures for the measurement of catalytic activity concentrations of enzymes at 37 degrees C. International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. Part 4. Reference procedure for the measurement of catalytic concentration of alanine aminotransferase[J]. Clin Chem Lab Med, 2002, 40(7): 718-724. [本文引用:2]
[3] 张克坚, 杨振华. 临床酶学标准化的新途径[J]. 中华检验医学杂志, 1999, 22(1): 53-55. [本文引用:1]
[4] 朱学海, 赖志刚, 魏代奎. 磷酸吡哆醛在丙氨酸转氨酶测定中的应用[J]. 检验医学, 2005, 20(4): 386-388. [本文引用:1]
[5] 张宗彬, 鲍杰, 陈龙泉, 等. 5'-磷酸吡哆醛影响血清丙氨酸氨基转移酶测定的研究[J]. 医学检验与临床, 2007, 18(3): 74-75. [本文引用:1]