1.材料 全部样本为天津市第三中心医院患者新鲜血清,样本浓度都在厂家声明的线性范围内。

2.试剂与仪器 (1) 罗氏血脂试剂:三酰甘油(TG)、胆固醇(Chol)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂由罗氏诊断试剂公司生产(批号分别为688431、685723、686076、683941);TG、Chol校准品 (cafs,批号 17363200);HDL-C、LDL-C校准品 (cafs lipids,批号17753600);(2) 国产血脂试剂 (方法、原理、分析类型、试剂组分、试剂剂型同罗氏血脂试剂):TG、Chol、HDL-C、LDL-C试剂由上海荣盛生物技术有限公司生产(批号分别为20071224、20070720、20071213、20071229);(3) 仪器:罗氏MODULAR P生化分析仪。

3.实验方法 (1)比对实验:按照EP9-A2文件实行;(2)干扰试验:分别取外观正常血清、脂浊血清(TG>5.0 mmol/L)、黄疸血清[总胆红素(TBil)>170 μmol/L]各40份,分别用罗氏和国产血脂试剂测定。

4.校准方法 (1)罗氏血脂试剂:TG、Chol采用罗氏cafs校准品校准,HDL-C、LDL-C采用罗氏cafs lipids校准品校准,4个项目均用两点定标;(2)国产TG、Chol和HDL-C、LDL-C试剂:采用重新赋值的cafs和cafs lipids校准品校准,以4份患者新鲜血清充分混匀后,作为临时校准血清,以校准后的罗氏血脂试剂对TG、Chol、HDL-C、LDL-C进行5次检测,取各项目的均值作为国产试剂4个项目的校准值。以临时校准血清对国产试剂和4个项目进行校准。校准后用国产血脂试剂测定临时校准血清和cafs、cafs lipids校准品 5次(临时校准血清测定值应与其校准值偏差<5%),取cafs、cafs lipids校准品各项目均值,即为校准国产试剂cafs、cafs lipids 校准品的赋予值,以赋值后的cafs、cafs lipids校准品对国产TG、Chol和HDL-C、LDL-C试剂进行校准。

5.统计学方法 按照EP9-A2文件进行数据处理,计算相关系数( r)、斜率( b)、截距( a)和医学决定水平( Xc)处的偏倚。抗干扰能力实验组间比较采用 t检验;线性回归方程 Y_国产 =bX_罗氏 +a;系统误差( SE) =∣Y-X∣;相对偏差( SE %) =SE/ Xc×100%。

1.比对实验结果 以 r≥0 .975、 b=1.0±0.05、 a接近0为判断标准^{[ 1]}。国产血脂试剂的4个项目全部符合要求。见 表 1。

表1

表1

表1 2种试剂比对实验结果 项目 试剂线性范围 r值 b值 a值 罗氏试剂 国产试剂 TG(mmol/L) 0.05~11.40 0.05~6.78 0.995 1.003 0.021 Chol(mmol/L) 0.08~20.70 0.08~20.69 0.996 1.005 0.086 HDL-C(mmol/L) 0.08~3.12 0.08~3.90 0.997 1.002 -0.016 LDL-C(mmol/L) 0.77~14.20 0.77~20.0 0.992 1.023 -0.018

表1 2种试剂比对实验结果

2.干扰实验结果 3个血清组的2种试剂间均无差异( P>0.05), r均>0.975。国产血脂试剂与罗氏血脂试剂一样均不受异常样本干扰。见 表2。

表2

表2

表2 2种试剂抗干扰能力结果 项目 脂浊组 黄疸组 外观正常组 r值 b值 a值 r值 b值 a值 r值 b值 a值 TG(mmol/L) 0.996 1.010 0.019 0.988 1.020 0.021 0.994 1.011 0.014 Chol(mmol/L) 0.997 1.011 0.075 0.991 1.015 0.086 0.995 1.018 0.085 HDL-C(mmol/L) 0.998 1.009 -0.021 0.997 1.010 -0.018 0.998 1.007 0.011 LDL-C(mmol/L) 0.997 1.008 -0.030 0.997 1.009 -0.022 0.998 1.008 0.020

表2 2种试剂抗干扰能力结果

3.偏倚 运用线性回归方程计算2种试剂的比对实验结果在 Xc^{[ 2]}处的偏倚。以美国临床医学检验部门修正法规(CLIA’88)允许总误差( TEa)(TG±10%、 Chol±10%、HDL-C±30%、 LDL-C±30%)的 1/2为判断标准^{[ 3]},国产血脂试剂4个项目的偏倚均低于允许误差标准。见 表3。

表3

表3

表3 2种试剂比对实验结果在 Xc处的偏倚 项目 Xc 绝对偏倚 相对偏倚(%) TG(mmol/L) 0.70 0.023 3.30 2.30 0.028 1.21 3.60 0.032 0.88 Chol(mmol/L) 5.20 0.112 2.15 6.20 0.117 1.89 7.80 0.125 1.60 HDL-C(mmol/L) 0.91 0.014 1.56 1.68 0.013 0.75 LDL-C(mmol/L) 3.10 0.053 1.72 4.14 0.077 1.87 4.92 0.095 1.93

表3 2种试剂比对实验结果在 Xc处的偏倚

近年来,国际上特别强调使用固定组合的检测系统即所谓的“封闭系统”。但在国内由于检测成本的增加,限制了一些大型生化分析仪的应用,或者部分实验室干脆不考虑检验结果是否具有溯源性,随便使用仪器及试剂,从而造成检验结果不具有溯源性而且实验室间检验结果不具可比性。本研究首先以混合血清作为量值转移载体,经罗氏配套检测系统测定后用以校准国产试剂,再对校准国产试剂的cafs、cafs lipids校准品重新赋值,将赋值后的cafs、cafs lipids校准品应用于国产试剂,保证了结果的可溯源性。

本研究结果显示经新鲜血清赋值转移,提高了开放系统血脂检验结果的可比性。

校准品具有专用的特性,cafs、cafs lipids校准品是罗氏公司指定用来校准本测定系统的,国产试剂如果直接使用cafs、cafs lipids校准品其结果会有偏差。同一校准品用于不同试剂校准时,应具有不同的校准值^{[ 4]}。因此,不轻易使用同一校准品的单一校准值对各种系统进行校准,已保证结果的量值溯源。