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周勇, 陈文举, 赖卫强, 张春玲, 李招云. 自制血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C质控品在室内质控中的应用及质量评价. 25(1): 53-55
  
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自制血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C质控品在室内质控中的应用及质量评价
周勇, 陈文举, 赖卫强, 张春玲, 李招云
浙江省台州市中心医院检验中心,浙江 台州 318000

作者简介：周勇 ,男,1977年生,学士,主管技师,主要从事临床生化检验工作。

关键词: 血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C; 自制; 质控品; 质量评价
中图分类号:R446.1 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2010)01-0053-03

血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C, Cys C)的检测已在各级实验室中开展。但由于试剂质量不一,且开瓶后稳定性难以掌握,特别是不同生产厂家之间、同一厂家不同批号之间的试剂检测结果的可比性必须有严格的室内质量控制保证措施及稳定的室内控制品作保证,因此需要严格规范检验质控管理的各项规章制度,建立、健全室内质控管理体系,明确各级检验人员的岗位质控职责,达到预防和控制检验误差的目的[ 1],为此室内质控品显得尤为重要。本实验室经过4个月的摸索实践,总结出自制Cys C质控血清的方法。

材料和方法
一、材料

1.仪器 Roche Modular全自动生化分析仪;Sanyo Medical Freezer低温冷冻冰箱;Beckman Coulter Allegra x-12r Centrifuge离心机。

2.试剂 Cys C试剂盒和质控品均购于Leadman公司。

3.自制质控品的制备 (1)分高值、低值,收集台州中心医院肾内科肾病患者和健康体检人员的无细菌污染,乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒阴性,无溶血、黄疸、脂浊血清;(2)56 ℃加热30 min灭活;(3)离心去除沉淀物;(4)用0.02%叠氮钠防腐,按0.5 mL分装后-20 ℃保存备用。

二、方法

1.在测定Cys C之前,应将仪器重新定标 在Leadman质控品在控的情况下,每次取出自制Cys C质控品,经室温平衡30 min混匀后测定Cys C值,并做好记录。

2.确定自制Cys C质控品暂定中心线(均值) 在3~4 d内,每天分析每水平质控品3~4瓶,每瓶进行2~3次。每水平各20次。收集数据后,计算其平均值( x-)、标准差( s)和变异系数( CV),以此 x-作为质控中心线。

3.稳定性比较 将质控血清分别放置4 ℃、-20 ℃保存,在Leadman原装质控品在控情况下每日随样本进行测定,观察2种条件下Cys C的变化情况。

4.瓶间差观察 将分装好的Cys C质控品从-20 ℃冰箱中随机各取出5支,经室温平衡30 min后混匀上机作双份测定,计算其 x-值。

三、统计学方法

采用SPSS 11.5统计软件包进行分析,所有数据均以 x- ±s表示。组间(周或月)比较采用独立样本 t检验。

结果

一、 2种血清Cys C自制质控品暂定中心线 x-值结果见 表1。

表1 2种血清Cys C自制质控品暂定中心线 x-值结果

二、 2种保存温度下血清Cys C自制质控品稳定性结果见 表2、 表3。经检测,自制Cys C质控血清在4 ℃保存结果( P>0.05)可稳定2周,后期结果逐步增高( P<0.05)。-20 ℃保存结果可稳定4个月,差异无统计学意义( P>0.05)。是否有更长稳定性还有待论证。

表2 4 ℃血清Cys C自制质控品稳定性结果
表3 -20 ℃血清Cys C自制质控品稳定性结果

三、各自制Cys C质控血清瓶间测定结果见 表4。各自制Cys C质控血清瓶间测定结果稳定,差异无统计学意义。

表4 各自制Cys C质控血清瓶间测定结果
讨论

Cys C是一种非糖基化的碱性蛋白酶,相对分子质量较小,等电点9.3。Cys C在所有有核细胞中均有表达,产生速率十分恒定,在体内惟一的代谢途径是通过肾小球滤过排泄。不受炎症、胆红素、饮食、体重、溶血、三酰甘油、性别、年龄等影响[ 2]。在1985年即被应用于临床。因为特异性高、准确性好,在临床应用于发现早期肾功能损害的过程中比血清肌酐(Scr)、内生肌酐清除率(Ccr)更为敏感[ 3],Cys C作为一种反映肾小球滤过率(GFR)的指标目前已基本得到确认。国外学者总结了46篇有关于Cys C研究论文的荟粹分析表明,其与GFR的相关性、诊断GFR下降的敏感性、特异性均明显优于Scr[ 4],可作为肾小球滤过功能的监测指标。对肾脏疾病的提示有极其重要意义。

目前Cys C有多种测定试剂及方法如颗粒增强速率透射法、散射比浊法、酶联免疫吸附试验,各方法间测定的敏感性及不精确度不同[ 5],样本采集后,由于细胞的代谢活动、化学反应、微生物降解、渗透作用、光学作用等,都将直接或间接地影响到分析结果的准确性[ 6]。但受多种因素的影响,特别是试剂的质量不一,不同厂家的冻干质控品或液体质控品稳定性不一致,无论选用那种均应满足稳定性好,基质效应小的要求。因此该项目需要长期稳定的质控品作定时监测,而进口质控品价格比较昂贵,本实验室尝试自制血清Cys C质控品进行本实验室室内质控的检测。经过测试,自制-20 ℃血清Cys C质控品在4个月内,在不同批号的Leadman试剂盒之间稳定性较好( P>0.05),批间差异无统计学意义。且瓶间差小,与患者样本有相似的基础质效应。经临床应用表明,自制Cys C质控品血清的应用能够基本满足室内质控的要求。我们认为自制血清Cys C质控品具有一定的推广应用价值,可以做为价格较高的原装质控品的短期替代品,以降低运行成本,提高效益。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 楼慧萍. 谈检验科的全面质量管理[J]. 中华医院管理杂志, 2003, 19(5): 276-278. [本文引用:1]
[2] Rand ers E, Erland sen EJ. Serum cystatin C as an en-dogenous marker of the renal function-a review[J]. Clin Chem Lab Med, 1999, 37(4): 389-395. [本文引用:1]
[3] 裘晓蕙, 钟光辉, 陈巍, 等. 应用血清西司他汀浓度测定肾小球滤过率的相关研究[J]. 中华肾脏病杂志, 2001, 17(1): 35-36. [本文引用:1]
[4] Dharnidharka VR, Kwon C, Stevens G. Serum cystatin C is superior to serum creatinine as a marker of kidney function: a meta-analysis[J]. Am J Kidney Dis, 2002, 40(2): 221-226. [本文引用:1]
[5] 李海霞, 徐国宾, 朱立华. 血清胱蛋白酶抑制剂C测定的方法学研究进展及临床意义[J]. 临床检验杂志, 2002, 20(5): 314-316. [本文引用:1]
[6] 章晋林, 张小鹏. 血液标本的保存条件与保存时间对常规生化检测结果的影响[J]. 现代检验医学杂志, 2005, 20(6): 9-10. [本文引用:1]