1.病例选择 DN患者65例, 均为台州市第一人民医院内分泌科住院患者, 男35例, 女30例, 年龄20~84岁, 所有病例均符合1999年世界卫生组织(WHO)糖尿病专家委员会的诊断标准。正常对照组50名, 为台州市第一人民医院健康体检者, 无肾脏疾病。

2.样本收集 受试者素食3 d后取空腹静脉血3 mL, 分离血清-20 ℃保存, 另留取晨尿10 mL送检。

3.检测方法 尿α ₁-MG、β ₂-MG采用美国贝克曼公司Array 360 特种蛋白分析仪测定, 试剂为厂家配套试剂。Cys C采用日本日立公司7600全自动分析仪测定, 试剂由北京利德曼生化技术有限公司提供。

4.统计学方法 检测结果以 x̅± s 表示, 组间分析采用t检验, P< 0.05为差异有统计学意义。

1.DN组和对照组尿α ₁-MG、β ₂-MG及血清Cys C结果见表1。

表1

表1

表1 DN组和正常对照组尿α 1-MG、β 2-MG及血清Cys C比较( x̅± s, mg/L) 组别 例数 α 1-MG β 2-MG Cys C 正常对照组 50 3.70± 1.76 0.16± 0.07 0.78± 0.09 DN组 65 17.58± 12.34* 3.12± 1.02* 1.30± 0.24* 注:与正常对照组比较, * P< 0.05

表1 DN组和正常对照组尿α 1-MG、β 2-MG及血清Cys C比较( x̅± s, mg/L)

2.DN组尿α ₁-MG、β ₂-MG 、血清Cys C单独及联合检测的阳性率见表2。

表2

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表2 DN患者α 1-MG、β 2-MG、Cys C阳性率 项目 阳性例数 阳性率(%) α 1-MG 28 43.1 β 2-MG 36 55.4 CysC 40 61.5 α 1-MG+β 2-MG 41 63.1 α 1-MG+ CysC 46 70.8 β 2-MG+ CysC 48 73.8 α 1-MG+β 2-MG+ Cys C 53 81.5

表2 DN患者α 1-MG、β 2-MG、Cys C阳性率

α ₁-MG相对分子质量为30 000, 是一种含糖量约20%的糖蛋白, 在肝细胞和淋巴细胞合成, 尿中排出量通常在10 mg/L以下。生理状态下, α ₁-MG可以自由通过肾小球滤过膜, 并在近曲小管几近全部被吸收和分解代谢。β ₂-MG是由99个氨基酸构成的多肽, 不含糖基, 相对分子质量为11 800, 通过肾小球滤过后在近曲小管几近全部被重吸收, 故尿中生理浓度很低。二者主要经肾脏排泄, 99.8%在近曲小管被重吸收和代谢^[1]。本研究结果显示, DN组尿α ₁-MG及β ₂-MG浓度远高于正常对照组(P< 0.05), 证明在DN发生发展过程中, 肾小管损害可能早于肾小球的损害。一些DN患者早期常规尿液检查、尿蛋白为阴性, 主要是常规尿液检查白蛋白为定性试验, 敏感性低, 微球蛋白不能检出。尿α ₁-MG和β ₂-MG作为肾小管病变的敏感指标, 对早期发现糖尿病肾小管病变, 指导医生及时治疗, 防止肾小管病变的恶化有重要意义。

Cys C是一种低相对分子质量约为13 000、碱性非糖化蛋白质, 由120个氨基酸残基组成, 是一种分泌性蛋白质。由于Cys C基因属“ 看家基因” , 能在几乎所有的有核细胞表达, 无组织学特异性, 故机体Cys C产生率相当恒定。本研究结果显示, DN组血清Cys C浓度为(1.30± 0.24) mg/L, 远高于对照组(P< 0.05)。因Cys C是一种低相对分子质量蛋白质, 可经肾小球自由滤过, 在近曲小管被重吸收并降解, 并不重新回到血液中, 同时肾小管也不分泌Cys C, 肾脏是清除循环中Cys C的惟一器官, 所以血清Cys C浓度主要由肾小球滤过率(GFR)决定, 由此可见Cys C是一种理想的反映GFR变化的内源性标志物^[2]。Dharnidharka等^[3]对有关Cys C的Meta分析表明, Cys C作为肾功能指标与GFR有较好的相关性, 无论是轻度、中度还是重度肾功能降低, 对应的Cys C值多能显示较好的灵敏度。刘广勤等^[4]报道在糖尿病中Cys C异常的有70%, 与本研究基本一致。

许多糖尿病患者常规尿检尿蛋白呈阴性, 但本研究显示DN组尿α ₁-MG、β ₂-MG和血清Cys C浓度远远高于对照组(P< 0.05)。表2显示, α ₁-MG及β ₂-MG、Cys C单独检测, 最高检出率为 61.5%, 3个指标二联检测, 最高检出率为73.8%, 3个指标三联检测, 最高检出率为81.5%。单个指标的检出率较低, 但通过二联、三联检测, 能提高检出率, 特别是三联检出率达到81.5%, 能达到临床要求。

总之, 3个指标的联合检测, 弥补了单纯尿蛋白定量检测的局限性, 尿α ₁-MG、β ₂-MG和血清Cys C是DN早期诊断的灵敏的实验室指标, 多项联合检测在早期DN中有重要的应用价值^[5]。