1. 仪器与试剂 BNⅡ 特定蛋白分析仪(速率散射比浊法)及配套检测IgG试剂、校准品、高低值质控品。罗氏 Modular全自动生化分析仪(免疫透射比浊法)及配套试剂、校准品和质控品。

2. 标本 来源于广东省中医院就诊患者或正常体检者血清, 无溶血、黄疸和脂血。

3. 方法 (1)精密度评价: 统计分析pro1、pro2质控品连续20 d的检测结果, 计算变异系数(CV), 与美国实验室修正法规(CLIA'88)允许误差(EA)的1/3水平(8.33%)比较; (2)线性评价:参照EP6-A2文件^[1]进行, 重复性EA本实验室设定为< 7%, 采用SPSS 13.0软件进行多项式回归统计^[2], 将所得数据拟合为一次(Y=b₀+b₁X)、二次(Y=b₀+b₁X+b₂X²)和三次(Y=b₀+b₁X+b₂X²+b₃X³多项式, 判断各系数与0之间差异是否具有统计学意义(t检验); (3)比对试验:参照EP9-A2文件进行^[3]; (4) 临床可接受性能判断:以1/2 CLIA'88偏差为临床可接受标准, 计算低、中、高3个医学决定水平(Xc)的EA预期偏差(Bc)及其95%可信区间。将给定Xc的EA与Bc的95%可信区间比较, 判断临床可接受性能。

1. 精密度 pro1和pro2 的CV分别为4.67%、4.20%。

2. 线性评价 CV为0.03%, 多项式系数b₂、b₃与0比较, 差异均无统计学意义(P> 0.05), 为一次线性方程(Y=12.478X-10.762, P< 0.05), 实测线性范围1.61~51.8 g/L。线性回归图见图1。

图1

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	图1 BNⅡ IgG线性回归曲线注:Y=12.478X-10.762; r=0.999 7

3. 比对试验 组内有一离群点, 按文件要求删除, 方法间无离群点。r²> 0.95, X值取值范围合适。IgG回归方程及可接受性能评价结果见表1, 重复检测均值散点图见图2(偏倚图略)。

表1

表1

表1 IgG回归方程及可接受性能评价结果 回归方程 Xc (g/L) 估计值(g/L) Bc (%) Bc 95%可信区间(%) 可接受范围 Y=1.164 5X-0.507 0 6.00 6.48 8.00 4.10~11.90 靶值± 12.5% 17.00 19.29 13.47 12.37~14.56 靶值± 12.5% 50.00 57.72 15.44 13.58~17.29 靶值± 12.5%

表1 IgG回归方程及可接受性能评价结果

图2

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	图2 BNⅡ 与罗氏生化仪IgG重复检测均值散点图注:Y=1.164 5X-0.507 0; r=0.995 0

精密度是反映仪器整体性能的首要指标, 是进行其他方法学验证试验的前提。试验结果显示, IgG检测结果的精密度可满足临床要求。线性试验结果表明, IgG的CV小于本实验室设定的EA(7%), 线性评价有意义, BNⅡ IgG呈一次线性, 且线性范围大于罗氏系统。

在确认检测系统精密度和线性符合要求的基础上, 参考CLSI EP9-A2文件与透射比浊法进行比对和偏倚评估。结果表明, IgG在低值和中值Xc处的EA> Bc可信区间的上限或包含在规定的可接受偏差之间, 结果可以被接受; 而在高值Xc的EA< Bc可信区间的下限, 但50 g/L的水平已经超过罗氏系统的线性范围(3~31 g/L), 无法对其评估, 所以BNⅡ 对IgG的检测性能与罗氏系统相比可以被接受。回归方程显示, 截距接近于0, 线性曲线均可通过原点或与原点接近, 无明显的恒定系统误差。另偏倚图显示, 随着检测浓度的增加偏倚有增大的趋势, 且有一定的方向性, 存在较明显的比例系统误差。可能原因:(1)样本选择的局限, 样本浓度范围不够宽; (2)方法学有差异, 虽然2种方法测定相关性较好( r²> 0.95), 但方法学不同, 特异性、敏感性有所差异。所以2种方法测定IgG的结果不能混用, 特别是在较高浓度水平时。如果同时使用2种方法检测相同项目, 应建立各自的参考值范围或做相应的校正。

综上所述, DADE BNⅡ 特定蛋白分析仪免疫球蛋白检测的主要分析性能均符合质量目标要求, 可用于临床标本检测。