引用本文
余悦能. 匹拉米洞化学法和双联试纸条法检测粪便隐血方法学评价. 2009, 24(3): 232-234
  
Permissions
Copyright©2009, 《检验医学》编辑部
《检验医学》编辑部
匹拉米洞化学法和双联试纸条法检测粪便隐血方法学评价
余悦能
义乌市中医医院检验科,浙江 义乌 322000

作者简介:余悦能,男,1972年生,学士,主管技师,主要从事临床检验工作。

摘要
目的

用化学法和免疫法作隐血试验比较,为检验及临床提供参数。

方法

采用匹拉米洞化学法和双联试纸条法检测粪便隐血,进行方法学比较。

结果

两法作灵敏度比较,双联试纸条法的灵敏度高于匹拉米洞法;特异性比较则双联试纸条法特异性较高;干扰试验比较,双联试纸条法对各种干扰因素均无干扰。进行临床验证,双联试纸条法对检出下消化道肿瘤的阳性率高于上消化道肿瘤的阳性率。

结论

双联试纸条法较以往使用的匹拉米洞化学法除了灵敏度高、特异性强、操作简便快速,还具有能定量分析的特点。双联试纸条法测定血红蛋白的最低浓度为0.15 μg/mL,显然比化学法灵敏度高;对鸡、鸭、羊、猪等动物血样本的检测均为阴性;对铁剂、维生素C和口服中药等均无干扰。因此,在选择粪便隐血试验的方法时,应首选双联试纸条法,这对消化道肿瘤的早期辅助诊断具有很大意义。

关键词: 匹拉米洞化学法; 双联试纸条法; 血红蛋白; 干扰因素
中图分类号:R446.1 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2009)03-0232-03
Abstract
Keyword:

粪便隐血试验是临床诊断消化道出血性疾患、筛查消化道肿瘤的有效手段之一[1]。由于粪便隐血试验受多种因素的干扰, 容易出现假阳性结果, 随着检测方法的发展, 以检测粪便隐血的化学法很多已被免疫法所取代, 但免疫法本身也有一定的缺陷, 为此, 我们将本院所用的双联试纸条法与以往的匹拉米洞化学法进行方法学的评价[2, 3]。

材料和方法
一、材料

1、双联试纸条法 用台湾贝索企业有限公司的Baso试剂条, 包括:免疫法试纸条; 化学法显色剂A剂; 化学法显色剂B剂; 操作步骤:将免疫试纸条浸入粪便混悬液中, 5 min之内观察结果。测试线出现紫红色为阳性, 无色为阴性。若免疫法试纸条阳性后, 用化学法检测其浓度, 分别滴加A液与B液, 5 min之内观察结果, 以出现蓝紫色阳性反应的时间来判断其浓度。

2、匹拉米洞化学法 包括:氨替比林3 g溶解于100 mL的冰乙酸中, 放置24 h后使用; 3%的过氧化氢溶液。

二、方法

1、灵敏度 以正常人粪便2 g加入刻度离心管中, 加蒸馏水至5 mL刻度, 并调成稀糊状, 加入纯化的血红蛋白质控品(自制68.5 g/L)10 μ L, 其中血红蛋白的含量为137 μ g/mL, 然后再吸出含血红蛋白的粪便混悬液蒸馏水稀释成7份含不同的血红蛋白浓度备测, 血红蛋白的含量分别为137、12.3、2.73、0.28、0.19、0.15、0.10 μ g/mL分别运用匹拉米洞法和双联试纸条法进行检测比较。

2、特异性 用鸡、鸭、羊、猪等动物血为测试样本, 运用匹拉米洞化学法和双联试纸条进行检测比较。

3、干扰试验 用不同浓度维生素C加入到含有血红蛋白2.73 μ g/mL的粪便混悬液中配制成4份含不同浓度维生素C的标本, 运用匹拉米洞化学法和双联试纸条法进行检测比较, 同时加入铁剂或口服中药的病例取其粪便标本, 进行检测比较。

4、临床验证 本院已临床确诊的癌症住院患者95例, 其中上消化道胃癌患者35例, 平均年龄47岁, 下消化道肿瘤结直肠癌患者25例, 平均年龄46岁, 无消化道病史的其他癌症患者35例, 平均年龄38岁, 分别留取粪便, 用匹拉米洞化学法和双联试纸条法进行检测比较。

结 果
一、灵敏度

匹拉米洞化学法检测最低浓度为2.73 μ g/mL, 双联试纸条法的Baso试剂条的检测最低浓度为0.15 μ g/mL。可见双联试纸条法比匹拉米洞化学法灵敏度高, 见表1。

表1 化学法与双联法检测粪便隐血结果
二、特异性

通过鸡、鸭、羊、猪等动物血标本用匹拉米洞化学法均为阳性, 双联试纸条法由于使用特异性高的单克隆试验能有效排除此非人体的血基质, 而显示阴性结果, 表明后法比前法特异性强。

三、干扰试验

1、维生素C 用含血红蛋白2.73μ g/mL的粪便混悬液中加入不同浓度的维生素C, 采用上述2法检测粪便隐血。匹拉米洞化学法均为阴性, 而双联试纸条法测定结果均为阳性, 显示双联试纸条法不受维生素C的干扰, 见表2。

表2 维生素C对化学与双联法方法隐血试验干扰

2、铁剂 用粪便混悬液2份, 1份含量血红蛋白2.73μ g/mL, 另1份为血红蛋白阴性, 加入经粉碎的口服硫酸亚铁片(0.3 g/片)3片, 用匹拉米洞化学法及双联试纸条法2种方法检测, 双联试纸条法测出的正常标本为阴性, 而含血红蛋白的则为阳性, 用匹拉米洞化学法测定结果则较难判断。

3、中药 粪便隐血试验阴性的患者2例, 让患者口服中药, 次晨留取粪便, 调成混悬液, 用双联试纸条法检测结果为阴性, 再定量加入血红蛋白至0.2μ g/mL, 检测结果为阳性, 而匹拉米洞化学对高色素标本较难测定。

四、临床验证

以诊断明确的送检标本进行比较, 胃癌35例, 结直肠癌25例和无消化道病史的其他癌症35例, 取粪便用双联试纸条法检测, 结直肠癌隐血试验的阳性率为100%, 胃癌隐血试验阳性率为88.5%, 其他癌症患者均为阴性, 结果见表3。

表3 各种肿瘤患者双联试纸条法检测试验结果
讨 论

化学法检测粪便隐血已几十年, 因其操作简便、价格低廉仍被不少医院采用, 常用以血红蛋白触酶为特性与色原性底物反应如匹拉米洞、联苯胺、邻联甲苯胺等, 其基本原理相同, 但特异性较低, 假阳性较高[1]。随着检测技术的发展, 双联试纸条法的问世, 由于采用单克隆抗体免疫法使其灵敏度和特异性大大提高, 且不受维生素C、铁剂、中药等干扰因素的影响, 同时又含有化学法的显色剂A和B, 既能准确判断阳性, 又能作定量分析, 为临床医生提供鉴别诊断的参数和依据[2], 这对提高消化道肿瘤患者筛查意义重大, 但对于消化道出血诊断仍需结合患者临床症状及其他有关检查综合诊断。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] Lieberman DA. One-time screening for colorectal cancer with combinedfecal occult-blood testing[J]. N Engl J Med, 2001, 345(8): 555. [本文引用:2]
[2] 王莉. 胶体金试纸与联苯法检测隐血的比较[J]. 临床检验杂志, 2002, 20(3): 144. [本文引用:2]
[3] 曾兴建, 顾爱霞, 张金业, 等. 胶体金试纸条测隐血方法的评价[J]. 临床检验杂志, 1996, 14(6): 321-322. [本文引用:1]