时间分辨免疫荧光法(DELFIA) 甲胎蛋白/人绒毛膜促性腺激素β (AFP/Free-hCGβ )双标试剂盒, 低、中、高3个浓度的AFP/Free-hCGβ 质控品、WALLAC时间分辨荧光测定仪(VICTOR 1420)、洗板机(1296-026 DELFIA)、震荡器(1296-003 DELFIA)均为珀金埃尔墨仪器公司生产。质控品严格按照产品说明进行稀释, 分装后于-70℃保存, 使用前1h取出置于室温充分复融。试剂盒和质控品均在有效期内使用。

1.Grubbs 从第3次起计算测定值的均数( x̅)、标准差(s)、找出其中最大值(Xmax)及最小值(Xmin), 按公式SI_上限=(Xmax- X̅)/s及SI下限=( X̅-Xmin)/s计算SI值, 与SI界值表比较。Grubbs质控法判断标准:(1)当SI_上限及SI_下限< n2s值时表示处于质控范围内, 可继续测定; (2)当SI_上限或SI_下限某一值处于n2s和n3s值之间时, 说明该值在2s~3s范围内, 处于警告; (3)当SI_上限或SI_下限任一值> n3s值时为失控, 应舍去重新测定, 该质控数值应舍去, 其他数值仍继续使用。例如在AFP和左hCGβ 的质控结果中, 共有2次“ 警告” 出现, 分别是n=10时的AFP高值和n=18时的左hCG低值; 无“ 失控” 出现。根据质控规则, 出现“ 警告"批次的检测报告可发出, 但舍去“ 警告” 时的相应数值。当积累的有效数据超过20个以后, 转入Levey-Jennings质控图法进行质量控制。

2. Levey-Jennings质控图 分别计算经Grubbs得到的20个质控值的 x̅和s, 设定质控限。以检测批次作为横坐标, 检测值作为纵坐标绘制质控图。采用n=3的Westgard质控规则判断“ 失控” :1_3S质控规则, 单批1个质控品超过 x̅± 3s判为“ 失控” ; (2/3)_2S质控规则, 单批3个质控品中的2个超过 x̅± 2s时判为“ 失控” ; R4S质控规则, 同批两个不同浓度的质控品结果之差或极差超过4s时判为“ 失控” ; 12X质控规则, 连续12个质控品位于 x̅的一侧判为“ 失控” ^[3]。单个质控品超过 x̅± 2s, 提示“ 警告” , 报告可发出; “ 失控” 时暂不发报告, 分析原因后再决定处理办法。如图1所示, AFP低值第3个点和AFP高值第5个点超过 x̅± 2s, 根据质控规则判为“ 警告” , 报告可发出; 其他各点均“ 在控” 。

图1

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	图1 Levey-Jennings质控图

本实验室采用DELFIA进行唐氏综合征的产前筛查, 由于检测标本量较小, 每周检测一次, 单独应用Levey-Jennings质控图有困难, 故尝试了Grubbs与Levey-Jennings质控图相结合的方法。结果表明在质量控制中虽有“ 警告” 出现, 但符合质控规则, 可使实验室检得到有效的质量控制。值得注意的是Grubbs从第3次检测开始进行质控, 无法对前2次的检测进行质量控制。为解决这一问题, 可在旧批号的质控品用完前, 将新批号的质控品与旧批号质控品同时检测2次, 旧批号的值点入质控图用于质量控制, 新批号的值可作为更换质控批号后Grubbs前2次的检测值。实验室检测受室内环境、仪器工作状态、试剂等多种因素的影响, 出现“ 失控” 情况要认真分析, 尽量查明原因。而且质控限并不是一旦建立就不能改变的, 随着质控数据的增加和实验条件的变化, 需对质控限进行不断的调整以保证实验数据的准确性。