1. 仪器与试剂 美国Beckman LX20全自动生化分析仪及配套TG检测试剂, 校准品为Beckman多项定标液, 批号M704491; 质控品为卫生部临床检验中心提供的多项质控血清。

2. 临床样本 以北京儿童医院保健科健康体检儿童200名作为TG正常组; 150例高血脂患儿血清作为高TG组(TG> 1.7 mmol/L), 其中糖尿病患儿50例、肾病患儿50例、左旋门冬酰胺酶(L-Asp)引起高血脂的患儿50例。

3. 样本检测 利用一步法和两步法分别测定TG正常组和高TG组的TG水平, 并且进行比较。

4. 统计学方法 数据采用 x̅± s表示, 组间比较采用t检验。

TG正常组一步法和两步法测定TG结果无明显差异(t=0.576, P> 0.05)。高TG组一步法和两步法测定TG水平差异有统计学意义(t=10.41, P> 0.01), 见表1。

表1

表1

表1 TG正常组和高TG组一步法和两步法TG测定结果( x̅± s, mmol/L) 组别 一步酶法 两步酶法 TG正常组 0.71± 0.46 0.69± 0.44 高TG组 糖尿病 3.68± 1.12 3.04± 1.04* 肾病 4.98± 2.71 4.47± 2.46* L-Asp 3.80± 1.05 3.72± 1.10 注:与一步法比较, * P< 0.01

表1 TG正常组和高TG组一步法和两步法TG测定结果( x̅± s, mmol/L)

两步法的原理是首先使血清与不含有脂蛋白酯酶(LPL)的试剂发生反应, 因试剂中不含LPL, 所以血清中TG不能水解, 而血清中的FG在甘油激酶(GK)和GPO的催化下生成H₂O₂, 然后加入LPL和4-氨基替比林(4-AAP), 水解TG, 生成红色的苯醌亚胺。在500 nm波长下测定其吸光度, 从而排除了FG的干扰。这种方法不增加费用和工作量, 适合于一般的临床实验室开展。

本研究按照TG值< 1.7 mmol/L的标准^[1]将研究对象分为TG正常组和高TG组。结果显示TG正常水平组一步法和两步法TG测定值无差异。但在高TG组中, 由糖尿病和肾病引起的高TG组之间有明显差异。其原因可能为:(1)严重的糖尿病和肾病时, 脂肪动员活跃, 脂肪组织中的TG在脂肪酶的作用下, 分解生成甘油和脂肪酸; (2)糖尿病患者的血清中胰岛素绝对缺乏或者胰岛素抵抗, 胰岛素抑制脂肪分解的能力下降, 从而导致脂肪分解生成甘油和脂肪酸^[2]。L-Asp的副作用之一是主要影响TG的代谢, 出现高脂血症。这种高脂血症呈一过性良性经过, 无需特殊治疗, 也不需要调整L-Asp的用量及用法。L-Asp组一步法和两步法测得的TG值无明显差异, 说明FG对这组患儿TG检测的影响比较小。

根据本研究的结果分析来看, 当TG< 1.7 mmol/L时, FG对TG测定的影响不大; 当TG> 1.7 mmol/L时, FG对TG的测定有一定的影响。虽然高TG组中确实有一部分病例一步法和两步法测得的TG值无明显差异(如L-Asp等引起的高血脂症)。但从实际临床工作来看, 多数情况下FG的影响是不可忽视的。尤其是糖尿病和肾病引起的高血脂患儿不宜使用一步法测定TG水平。