引用本文
曾婷婷, 江虹, 罗顺达, 丁彬, 粟军. 878例HBsAg阳性者病毒载量与血小板参数的关系. 2013, 28(4): 283-286
ZENG Tingting, JIANG Hong, LUO Shunda, DING Bin, SU Jun. The relationship of HBV DNA load and platelet parameters in 878 HBsAg positive patients. Labratory Medicine, 2013, 28(4): 283-286  
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878例HBsAg阳性者病毒载量与血小板参数的关系
曾婷婷, 江虹, 罗顺达, 丁彬, 粟军
四川大学华西医院实验医学科,四川 成都 610041

通讯作者：粟军,联系电话：028-85422372。

作者简介：曾婷婷,女,1980年生,硕士,讲师,主要从事临床血液学检验工作。

摘要

目的探讨年龄、性别、乙型肝炎病毒（HBV）DNA病毒载量等因素与血小板（PLT）参数之间的关系。方法 对878例乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性患者的PLT、血小板比容（PCT）、平均血小板体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）、HBV DNA、丙氨酸氨基转移酶／天门冬氨酸氨基转移酶（ALT／AST）等参数进行测定,采用析因设计的方差分析、回归分析、单因素方差分析和两样本t检验进行统计分析。结果 析因分析证实年龄、性别、HBV DNA会影响PLT相关参数,而ALT／AST则不会。HBsAg阳性人群PLT、PCT比同性别同年龄组的健康人群降低,而MPV和PDW则增大。HBsAg阳性人群高龄组的PLT、PCT与HBV DNA呈负相关,MPV、PDW则无相关关系;其他年龄人群中PLT的4项参数与HBV DNA均无相关关系。结论 高于50岁的HBsAg阳性人群中,PLT和PCT随着HBV DNA载量的增高而降低,可能与HBV DNA载量增加抑制或破坏骨髓巨核细胞分化发育有关。监测该类人群的PLT参数,有利于监控其止凝血问题。

关键词: 乙型肝炎病毒; DNA; 血小板计数; 血小板比容; 平均血小板体积; 血小板分布宽度
中图分类号:R512．6 文献标志码:A 文章编号:1673-8640（2013）04-283-04
The relationship of HBV DNA load and platelet parameters in 878 HBsAg positive patients
ZENG Tingting, JIANG Hong, LUO Shunda, DING Bin, SU Jun
Department of Clinical Laboratory,West China Hospital,Sichuan University,Sichuan Chengdu 610041,China
Abstract

Objective To investigate the relationship between platelet （PLT） parameters and age,sex,hepatitis B virus （HBV） DNA load and other factors． Methods A total of 878 hepatitis B surface antigen （HBsAg） positive patients were enrolled for the determinations of PLT count,thrombocytocrit （PCT）,mean platelet volume （MPV）,platelet distribution width （PDW）,HBV DNA and alanine aminotransferase （ALT）／ aspartate aminotransferase （AST）． Variance analysis,regression analysis,one-way ANOVA and 2-samplet-test were used to analyze the data statistically． Results Factorial analysis demonstrated age,sex and HBV DNA would influence PLT parameters,but ALT／AST would not． PLT and PCT were lower in HBsAg positive patients than in healthy subjects with same age and sex,while MPV and PDW were higher． There was a negative relationship of PLT and PCT with HBV DNA in elderly HBsAg positive patients,while MPV and PDW had no correlation． The 4 PLT parameters in young and middle-aged subjects had no correlation with HBV DNA． Conclusions PLT and PCT decrease with the increase of HBV DNA load in HBsAg positive patients over 50 years old,which may be related to the suppression or destruction of megakaryocyte differentiation and growth with the increase of HBV DNA load． Monitoring the PLT parameters is of benefit to monitor the hemostatic and coagulative conditions in the patients．

Keyword: Hepatitis B virus; DNA; Platelet count; Thrombocytocrit; Mean platelet volume; Platelet distribution width
引言

乙型肝炎病毒（HBV）长期感染除影响肝脏外,还常常引起血小板（PLT）数量的下降[ 1]。PLT数量在慢性乙型肝炎患者的治疗决策和预后判断中起重要作用。目前有关HBV感染与PLT数量和质量关系的报道较多[ 2, 3],而HBV DNA拷贝数与PLT数量及其参数的关系研究则较少。为此,我们对乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性人群的PLT、血小板比容（PCT）、平均血小板体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）、HBV DNA、丙氨酸氨基转移酶／天门冬氨酸氨基转移酶（ALT／AST）等参数进行了测定,同时考虑年龄、性别等可能的影响因素一并进行探讨。

材料和方法
一、材料

1． 选取2009年1月至2011年4月四川大学华西医院门诊及住院的HBsAg阳性患者878例,年龄12~80岁,HBsAg阳性,排除其他类型肝炎及血液系统疾病。其中男509例,女369例。年龄按<35岁,35~49岁,≥50岁分为低（291例）、中（296例）、高龄组（291例）,HBV病毒载量以HBV DNA拷贝数<104／mL、104~106／mL、>106／mL分为低（293例）、中（296例）、高载量组（289例）（参考“慢性乙型肝炎防治指南”[ 4]）,肝脏功能异常按是否超出ALT或／和AST参考值上限的2倍为标准分为异常（453例）和正常组（425例）。

2． 选取同期对照组300名,均为健康体检者,HBsAg阴性,年龄13~80岁,男159名,女141名,其中低龄组98名、中龄组106名、高龄组96名。

二、方法

1． 标本采集 清晨空腹采血,乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝血2 mL,3管肝素抗凝血各3 mL。

2． 试剂 Sysmex XE-2100血液分析仪配套试剂、HBsAg诊断试剂盒（Roche 诊断产品有限公司）、HBV核酸扩增荧光定量检测试剂盒（中山大学达安基因股份有限公司）、ALT及AST诊断试剂盒（Roche 诊断产品有限公司）。

3． 测定方法 采用Sysmex XE-2100血液分析仪利用阻抗法测定采血2 h内EDTA-K2抗凝血的4项PLT参数;采用Roche E170分析仪通过电化学发光法测定HBsAg;采用加热煮沸法提取HBV DNA,使用Roche LightCycle 480荧光定量聚合酶链反应（PCR）仪通过实时荧光定量技术分析HBV DNA载量;采用Roche P800分析仪通过比色法自动分析ALT及AST。

三、统计学方法

使用SPSS 17．0统计分析软件,多个因素不同水平对某变量的影响采用析因设计的方差分析,多个样本间的均数比较使用单因素方差分析,两样本均数比较使用两样本 t检验,对于单个因素对某变量的影响使用回归分析。 P<0．05为差异有统计学意义。

结果
一、影响PLT参数的相关因素析因分析

健康人群中,性别和年龄对PLT和PCT都有显著影响（ P<0．001）,年龄还对PDW有影响（ P<0．05）,但对MPV的影响差异无统计学意义。HBsAg阳性人群相关因素析因设计的方差分析结果见 表1（仅列出差异有统计学意义的结果）。

表1 HBsAg阳性人群相关因素对PLT参数的影响
二、不同性别和不同年龄者PLT参数的差异分析

健康人群和HBsAg阳性人群按性别和年龄分组后,PLT、PCT、MPV、PDW的均值和标准差见 表2。

表2 健康人群和HBsAg阳性人群按性别和年龄分组后PLT参数的差异
三、HBV DNA载量同PLT参数的关系

对HBsAg阳性人群的PLT参数和HBV DNA载量进行线性相关分析,各项参数与HBV DNA载量的相关系数见 表3。

表3 HBV DNA载量同PLT参数的线性相关系数（ r值）
讨论

PLT减少是慢性肝病患者临床上一个比较突出的问题,是肝硬化患者常见的并发症。目前关于乙型肝炎与PLT参数关系的文章较多,但鲜有文章同时考虑年龄和性别对PLT参数的影响。本研究将年龄和性别因素纳入分析发现,HBsAg阳性人群中除高龄女性组外,女性的PLT数量均高于男性。HBsAg阳性人群男性低、中、高龄组和女性低、中、高龄组中PLT数量低于100×109／L的比例分别为5．0％、20．0％、26．7％和1．8％、9．5％、35．5％。而其PLT计数较正常人群下降的比例分别为20．56％、25．26％、21．76％和16．67％、20．39％、37．13％。提示高龄女性HBsAg阳性人群的PLT下降的比例及程度都是最高的,对于该组人群更应关注和控制PLT降低及由此引起的止凝血问题和出血倾向。HBsAg阳性人群PCT降低,而MPV和PDW分别比同性别同年龄组的人群增大,与文献报道相符[ 4]。

HBV感染引起PLT减少的原因复杂。体外实验研究证实,完整的HBV DNA可抑制骨髓细胞的生长,并且抑制效应与拷贝数有剂量依赖关系[ 5]。而其他的原因包括脾功能亢进、单核-巨噬细胞增加、营养不良、PLT生成素降低或自身免疫紊乱（如抗PLT抗体）等。本研究结果中,HBsAg阳性人群的PLT和PCT只在高龄组中与HBV DNA拷贝数呈负相关,而在其他年龄组中并不存在相关关系,也提示骨髓抑制并非HBsAg阳性人群PLT降低的唯一原因。

HBsAg阳性人群的HBV DNA拷贝数和肝脏功能检测ALT／AST通常作为抗病毒治疗时机判断的指标[ 6]。本研究高于50岁的HBsAg阳性人群中,PLT和PCT随着HBV DNA载量的增高而降低,可能是HBV DNA载量增加抑制或破坏骨髓巨核细胞分化发育,抑制了PLT的生成,监测该组人群的PLT数量,有利于控制其止凝血问题。同时该组人群中PLT的降低对于HBV DNA载量增加有提示作用,可间接反映体内HBV复制情况,PLT参数对于患者病毒载量的长期监测和随访有一定的意义。在低于50岁的HBsAg阳性人群中,PLT的下降与ALT／AST高低、HBV DNA载量无相关关系,可能是因为年龄较低的人群骨髓的代偿功能好于年龄较大的人群。尽管在该部分人群中PLT参数不能反映HBV复制情况,但PLT降低是重型慢性乙型肝炎预后判断的重要指标之一[ 7];也是乙型肝炎肝硬化患者并发肝癌的独立危险因素之一[ 8];同时在对慢性乙型肝炎进行干扰素治疗时,低PLT是作为用药禁忌（< 50×109／L）和停药指标（< 30×109／L）的[ 3]。因此在低于50岁的HBsAg阳性人群中,尤其是在慢性乙型肝炎患者中,监测DNA病毒载量和肝脏功能的同时,PLT参数也应该作为常规监测项目。

与HBV DNA载量检测相比,进行PLT检测费用较低且报告时间快,分析PLT 4项检测参数有助于评价HBsAg阳性患者PLT的数量和功能的变化,有助于临床了解HBsAg阳性患者的病情及预后,为临床的诊治提供较好的参考资料。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] Park JH, Choi EA, Cho EW, et al. Detection of cellular receptors specific for the hepatitis B virus preS surface protein on cell lines of extrahepatic origin[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2000, 277(1): 246-254. [本文引用:1]
[2] 马岳. HBV、HCV感染影响红细胞、血小板指数的差异[J]. 检验医学, 2006, 21(6): 673-675. [本文引用:1]
[3] 汤武亨, 陈国光. 肝硬化及肝癌患者血小板参数变化[J]. 浙江实用医学, 2003, 8(6): 377. [本文引用:2]
[4] 中华医学会肝病学分会, 中华医学会感染病学分会. 慢性乙型肝炎防治指南[J]. 中华肝脏病杂志, 2005, 13(12): 881-891. [本文引用:2]
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[6] 中华医学会传染病与寄生虫病学分会, 中华医学会肝病学分会. 病毒性肝炎防治方案[J]. 中华肝脏病杂志, 2000, 8(6): 324-329. [本文引用:1]
[7] 孙庆丰, 吕勇, 徐道振, 等. 乙型肝炎病毒e抗原及DNA载量对慢性乙型重型肝炎预后的影响[J]. 中华肝脏病杂志, 2006, 14(6): 410-413. [本文引用:1]
[8] 王洪, 王英民, 张波. 乙肝肝硬化患者并发肝癌的危险因素研究[J]. 临床肝胆病杂志, 2007, 23(1): 34-35. [本文引用:1]