引用本文
邬叶红, 赵荣平, 徐燕萍. 尿中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白检测对SLE肾病的临床意义. 2012, 27(3): 189-191
WU Yehong, ZHAO Rongping, XU Yanping. The clinical significance of detecting urinary neutrophil gelatinase-associated lipocalin in SLE kidney disease. Labratory Medicine, 2012, 27(3): 189-191  
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尿中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白检测对SLE肾病的临床意义
邬叶红1, 赵荣平2, 徐燕萍2
1.复旦大学生命科学院,上海 200433
2.上海交通大学医学院附属仁济医院检验科,上海 200126

作者简介：邬叶红,女,1978年生,学士,主管技师,主要从事临床免疫工作。

通讯作者：赵荣平,联系电话：021-68383289。

摘要

目的 探讨尿中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白(NGAL)在系统性红斑狼疮(SLE)患者肾脏损伤中的临床意义。方法 收集124例SLE患者和30名健康体检者尿液,采用速率散射比浊法检测尿微量白蛋白(Albu),并依据尿中Albu将SLE患者分为A、B、C 3组。30名健康体检者为对照组,用酶免疫法定量测定各组NGAL。结果 SLE 患者 A、B、C 3组和对照组尿NGAL分别为3.51±0.49、5.48±0.98、7.89±1.71、3.37±0.31 μg/L;A组(Albu<30mg/L)和对照组间差异无统计学意义( P>0.05);B组(Albu 30~100 mg/L)和对照组间差异有统计学意义( P<0.01);C组(Albu 100~500 mg/L)和对照组间差异有统计学意义( P<0.01);A、B、C 3组间差异有统计学意义( P<0.05)。SLE患者尿NGAL与Albu之间呈正相关性( r=0.84)。结论 当Albu增高时尿NGAL随之增高,尿NGAL可用于判断SLE患者肾小管间质功能损伤情况。

关键词: 尿中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白; 系统性红斑狼疮; 尿微量白蛋白
中图分类号:R446.1 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2012)03-0189-03
The clinical significance of detecting urinary neutrophil gelatinase-associated lipocalin in SLE kidney disease
WU Yehong1, ZHAO Rongping2, XU Yanping2
1.The Life Science Academy, Fudan University,Shanghai 200433, China
2. Department of Clinical Laboratory, Renji Hospital, Shanghai Jiaotong University School of Medicine,Shanghai 200126, China
Abstract

Objective To investigate the clinical significance of urinary neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) in kidney damage of systemic lupus erythematosus (SLE) patients.Methods The urine of 124 SLE patients and 30 healthy subjects were collected. The urinary microalbumin (Albu) was detected by rate nephelometry. According to the results of Albu, the SLE patients were classified into 3 groups (Group A, B and C). The 30 healthy subjects were as the control group. The NGAL was detected by enzyme immunoassay quantitatively.Results The urinary NGAL in Group A, B and C of SLE patients and control group were 3.51±0.49, 5.48±0.98, 7.89±1.71 and 3.37±0.31 μg/L. There was no statistical significance of urinary NGAL between Group A(Albu<30mg/L) and control group( P>0.05). There was statistical significance of urinary NGAL between Group B (Albu: 30-100 mg/L) and control group( P<0.01). There was statistical significance of urinary NGAL between Group C (Albu: 100-500 mg/L) and control group( P<0.01). There was statistical significance of urinary NGAL among Group A, B and C( P<0.05).The positive correlation about the Albu and urinary NGAL was 0.84 in SLE patients.Conclusions Urinary NGAL increases when Albu rises, and urinary NGAL can be used to judge SLE patients with tubular interstitial function damage.

Keyword: Urinary neutrophil gelatinase-associated lipocalin; Systemic lupus erythematosus; Urinary microalbumin
引言

中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL)是脂蛋白家族的成员, 最初是在激活中性粒细胞中被发现的一种相对分子质量小的分泌性蛋白。现研究表明, NGAL是诊断急性肾脏损伤的最有效生物学标志之一 [1]。薛志强等[2]研究观察到慢性肾脏病(chronic kidney diseases, CKD)组患者血清及尿液NGAL的浓度均较正常对照组高。肾小管上皮细胞受到损伤性刺激后会大量分泌NGAL, 可诱导肾小管间质中浸润的中性粒细胞发生凋亡以保护肾组织免受炎细胞的侵害, 同时NGAL可诱导肾间充质细胞向肾小管上皮细胞的转化, 从而诱导肾小管上皮细胞的再生[3]。系统性红斑狼疮(SLE)是一种常见的自身免疫性疾病, 多发于女性。狼疮性肾炎(LN)是SLE累及肾脏所引起的一种免疫复合物性肾炎, 是SLE主要并发症和死亡原因之一。因此, 检测能敏感反映肾小管间质功能损伤的指标, 对诊断SLE早期肾损伤有重要意义。本研究拟定量联合检测和比较SLE患者和健康对照组的尿微量白蛋白(Albu)和尿NGAL, 以明确尿NGAL与SLE患者肾损伤的相关性, 并评价尿NGAL作为SLE患者早期肾小管间质损伤监测指标的临床意义。

材料和方法
一、研究对象

选择仁济医院确诊的SLE患者124例, 其中男3例, 女121例, 年龄1768岁。均符合1982年美国风湿病学会SLE诊断标准。根据Albu含量分为A组(Albu< 30 mg/L) 45例; B组(Albu 30~100 mg/L)42例; C组(Albu 100~500 mg/L)37例。健康对照组为30名, 其中男1名, 女29名; 年龄19~65岁, 均无肾病史。

二、仪器和方法

1. 收集受试者晨起清洁中段尿5 mL, 置无致热源及内毒素的试管中, 4 000× g离心5 min, 取上清液置于Eppendof管中, 冻存于-20 ℃冰箱中。收集所有样本同时检测Albu, 然后检测NGAL, 再进行分组分析。

2.Albu

采用散射速率比浊法, 仪器为德国西门子DADE BEHRING BNII特定蛋白分析仪, 试剂为西门子配套试剂。

3.尿NGAL采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测, 人NGAL的ELISA试剂盒购自美国GBD公司。实验方法严格按试剂盒说明书操作, 根据所得样本的吸光度(A)值, 由标准曲线可算出各样本相应的NGAL浓度。酶标仪为芬兰Wellscan K3。

三、统计学方法

应用SPSS 12.0统计软件分析结果, 计量资料以 x-± s表示, 组间比较t检验, P< 0.05表示差异有统计学意义; 相关性分析采用直线相关分析。

结果
一、SLE患者A、B、C 3组及对照组Albu、尿NGAL检测结果比较

结果显示B、C组与对照组间尿NGAL差异有统计学意义(P< 0.01), A组与对照组间差异无统计学意义(P> 0.05), 结果见表1。

表1 SLE患者A、B、C组及对照组Albu、NGAL测定结果( x-± s)
二、3组SLE患者尿NGAL与Albu相关性分析

SLE患者尿NGAL与Albu之间的相关系数(r)=0.84(P< 0.01), 二者直线回归见图1。

图1 3组SLE患者Albu与NGAL相关性分析

讨论

SLE患者由于抗原抗体免疫复合物沉积或抗体结合于肾小球基底膜处, 基底膜孔径屏障遭到破坏, 同时表面负电荷渐失, 造成肾小球滤过功能受损, 尿蛋白排出。Albu是反映肾小球早期损伤的敏感指标; 据病理及国内、外资料报道SLE早期肾脏病变不仅仅局限肾小球, 肾小管、间质及血管均存在不同程度的损伤, 且病变的发生率极高。SLE最终导致的肾功能衰竭, 肾小管病变是主要因素。由于肾小管间质对缺血的反应比肾小球更敏感, 故很多患者在出现肾小球功能损伤之前, 肾小管功能已出现损伤。Mishra等[4]的研究表明, 在小鼠缺血性AKI模型中, NGAL基因是7个表达上调超过lO倍的基因之一, 基因表达后产生一种小的分泌性多肽, 即NGAL, 最常见于增殖细胞核抗原阳性的近曲小管上皮细胞内, 体外细胞培养也证实了近曲小管上皮细胞可以产生NGAL, 其能抵抗蛋白酶的水解, 很容易在尿样本中检测到, NGAL的表达与缺血的时间正相关, 且早于尿N-乙酰-β -氨基葡萄糖苷酶(N-Acetyl-β -glucosaminase, NAG)和β 2微球蛋白。NGAL也是一种载铁蛋白, 其和铁质及铁载体结合形成NGAL。铁载体:铁复合物, 转运细胞内的铁质进入近端肾小管, 减轻铁催化引起的早期的肾损伤。研究证实, 在肾毒性或缺血性肾损伤的人类肾脏皮质小管、血液和尿液中均可见NGAL的大量堆积[5]。肾脏发育的基本特征是间质细胞向上皮细胞转化, 这种细胞类型的转变受输尿管芽分泌因子的控制, 研究发现输尿管芽分泌因子中诱导上皮细胞形成的就是NGAL[6]。因此, 检测能敏感反映肾小管间质功能受损的指标, 对诊断SLE早期肾损害有重要意义。本实验结果显示, SLE患者A组Albu均< 其临床正常生物参考范围(30 mg/L), 尿NGAL与健康对照组差异无统计学意义(P> 0.05), SLE患者B组及C组Albu均> 其临床正常生物参考范围(30 mg/L), 尿NGAL含量均高于健康对照组, 差异有统计学意义(P< 0.01)。这一结果表明尿NGAL可用于监测SLE患者肾小管间质功能受损, 有利于肾功能受损的早期发现。肾小球病变, 常可累及或伴随肾小管间质的损害, 而肾小管间质病变通过肾小管球反馈机制能进一步加重肾小球的损伤, 从而引起肾小球及肾小管的双重损害, 肾脏病理学检查已证实SLE患者肾小球及肾小管损伤呈平行的、正相关。本实验尿Albu与尿NGAL之间的r=0.84(P< 0.01), B组与C组之间的尿NGAL含量差异有统计学意义(P< 0.01), 由此可见与病理学检查的结果相一致。

本研究的结果初步阐明NGAL可作为监测SLE患者肾小管间质损伤的一个有效的、易于检测的生物学指标, 为进一步验证NGAL在SLE进展过程中检测的效应及对肾脏的修复作用, 则有待扩大样本量的检测研究。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] Bolignano D, Donato V, Coppolino G, et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin(NGAL) as a marker of kidney damage[J]. Am J Kidney Dis, 2008, 52(3): 595-605. [本文引用:1]
[2] 薛志强, 童俊容. 慢性肾脏疾病血清和尿液NGAL的改变及其临床意义[J]. 中国中西医结合肾病杂志, 2010, 11(5): 440-441. [本文引用:1]
[3] Mori K, Nakao K. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin as the real-time indicator of active kidney damage[J]. Kidney Int, 2007, 71(10): 967-970. [本文引用:1]
[4] Mishra J, Ma Q, Prada A, et al. Identification of neutrophil gelatinase-associated lipocalin as a novel early urinary biomarker for ischemic renal injury[J]. J Am Soc Nephrol, 2003, 14(10): 2534-2543. [本文引用:1]
[5] Mori K, Lee HT, Rapoport D, et al. Endocytic delivery of lipocalin-siderophore-iron complex rescues the kidney from ischemia-reperfusion injury[J]. J Clin Invest, 2005, 115(3): 610-621. [本文引用:1]
[6] 刘欣颖, 罗海, 王宓, 等. 肝细胞生长因子对IL-1a刺激肾小管上皮细胞肌纤维母细胞转分化的作用[J]. 四川大学学报(医学版), 2005, 36(1): 9-12. [本文引用:1]