引用本文
张军, 秦琴, 杜大海, 李闻捷, 张建荣, 沈茜. 多巴胺和多巴酚丁胺对临床部分生化检测项目的干扰. 2012, 27(3): 174-177
ZHANG Jun, QIN Qin, DU Dahai, LI Wenjie, ZHANG Jianrong, SHEN Qian. Dopamine and dobutamine interference in some biochemical assays. Labratory Medicine, 2012, 27(3): 174-177  
Permissions
Copyright©2012, 《检验医学》编辑部
《检验医学》编辑部
多巴胺和多巴酚丁胺对临床部分生化检测项目的干扰
张军, 秦琴, 杜大海, 李闻捷, 张建荣, 沈茜
上海长海医院实验诊断科,上海 200433

作者简介：张军,男,1973年生,博士,主治医师,主要从事免疫和分子诊断工作。

通讯作者：沈茜,联系电话：021-81873611。

摘要

目的 评估多巴胺和多巴酚丁胺对基于过氧化物和过氧化物酶反应原理的6个生化检测项目[肌酐(Cr)、尿酸(UA)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、糖化血清蛋白(GSP)]的影响。方法 配制含有100.00、50.00、25.00、12.50、6.25、3.13、1.57 μg/mL不同药物(多巴胺、多巴酚丁胺)浓度的血清,采用日立7600全自动生化仪(简称日立7600)测定血清Cr、UA、Glu、TC、TG、GSP浓度;采用强生VITROS○R 5.1 FS干式生化仪(简称强生VITROS)检测Cr、UA和Glu浓度。计算不同血药浓度对各个项目干扰的程度。结果 随着药物浓度逐渐增加,6个检测项目的检测结果均逐渐下降。血药浓度≤ 1.57 μg/mL时对除GSP外的5个日立7600检测项目的负干扰<10%;血药浓度≥50 μg/mL时对强生VITROS的Cr、UA测定结果的负干扰>10%。各个浓度的药物对强生VITROS检测Glu没有明显影响(<10%)。结论 高浓度的多巴胺和多巴酚丁胺(≥1.57 μg/mL)对日立7600的检测Cr、UA、Glu、TC、TG和GSP呈明显负干扰。强生VITROS抗多巴胺和多巴酚丁胺的干扰能力明显强于日立7600上的相应检测项目。

关键词: 多巴胺; 多巴酚丁胺; 生化分析; 干扰
中图分类号:R972 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2012)03-0174-04
Dopamine and dobutamine interference in some biochemical assays
ZHANG Jun, QIN Qin, DU Dahai, LI Wenjie, ZHANG Jianrong, SHEN Qian
Department of Laboratory Diagnosis, Changhai Hospital, Shanghai 200433, China
Abstract

Objective To evaluate dopamine and dobutamine interference in 6 biochemical assays [creatinine(Cr), uric acid(UA), glucose(Glu), total cholesterol(TC), triglyceride(TG) and glycated serum protein(GSP)] based on the peroxide and peroxidase reaction principle.Methods Sera containing different concentrations of dopamine or dobutamine (100.00, 50.00, 25.00, 12.50, 6.25, 3.13 and 1.57 μg/mL) were prepared. Cr, UA, Glu, TC, TG and GSP were measured on a Hitachi 7600 automatic biochemical analyzer(Hitachi 7600). Cr, UA and Glu were measured on a VITROS○R 5.1 FS dry type biochemical analyzer(VITROS). The interference of each concentration drug was calculated.Results The measured 6 assays' results decreased gradually with the increasing of the drug concentration. The negative interference of 5 assays (except GSP) measured on the Hitachi 7600 was <10% in the drug concentration ≤1.57μg/mL. The nagative interference of Cr and UA measured on the VITROS was >10% in the drug concentration ≥50 μg/mL. There was no significant interference(<10%) of Glu measured on the VITROS in all the different drug concentrations.Conclusions Dopamine and dobutamine in the drug concentration ≥1.57 μg/mL have significant negative interference of biochemical assays (Cr, UA, Glu, TC, TG and GSP) on Hitachi 7600. The biochemical assays measured on the VITROS are less interfered by the drugs than those on the Hitachi 7600.

Keyword: Dopamine; Dobutamine; Biochemical analysis; Interference
引言

多巴胺和多巴酚丁胺是临床2种常用的以升血压为主要作用的药物。已经有文献报道, 这2种药物对部分临床检验项目, 如肌酐(Cr)、尿酸(UA)、胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)等产生干扰, 导致检测结果降低[1, 2]。多巴胺和多巴酚丁胺都是具有还原性的药物, 可以干扰基于过氧化物和过氧化物酶反应原理的部分生化检验项目, 如:Cr、UA、葡萄糖(Glu)、TC、TG、糖化血清蛋白(GSP)等。这2种药物对不同厂商试剂和检测方法的干扰程度并不相同[2]。目前临床应用的很多试剂是国产试剂, 受这2种药物的干扰程度还未见报道。我们在临床工作中也碰到过部分患者由于使用大剂量的多巴胺导致Cr和UA等项目显著下降的个案。因此, 我们就多巴胺和多巴酚丁胺对常见临床生化检验项目(Cr、UA、TC、TG、Glu、GSP)的影响作了评估, 为检验科能够更准确的发送检验报告提供参考依据。

材料和方法
一、 仪器和试剂

仪器采用日立7600全自动生化分析仪(简称日立7600)和强生VITROS ○R 5.1 FS干式生化仪(简称强生VITROS)。日立7600为开放试剂, 每个检验项目所用的试剂生产厂商如下:Cr、TC和TG试剂由上海执诚生物技术有限公司生产; UA和Glu试剂购自德赛诊断系统(上海)有限公司, 其中Glu试剂是基于葡萄糖氧化酶法检测原理; GSP试剂由英国Genzyme 公司提供, 检测原理为利用蛋白酶K消化样本, 释放糖化蛋白片段, 然后用酮胺氧化酶特异性的作用于糖化蛋白片断上的酮胺键, 通过过氧化氢氧化底物N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐(TOOS)和4-氨基安替比林发生生色反应。强生VITROS是封闭系统, 试剂为强生公司配套产品。20 mg/支盐酸多巴胺注射液(2 mL液体)由上海禾丰制药有限公司生产, 主要的辅料是亚硫酸氢钠。20 mg/支盐酸多巴酚丁胺注射液(2 mL液体)由上海第一生化药业有限公司生产, 主要辅料是L-半胱氨酸和盐酸半胱氨酸。

二、方法

取临床患者的血清分别检测Cr、UA、TC、TG、Glu、GSP。根据每个项目的检测线性范围的1/3为界限, 划分为低、中、高3个范围。筛选低、中、高不同浓度的血清各6份。每个血清样本按照如下步骤配制成含有不同药物浓度的血清:取990 μ L血清加入10 μ L多巴胺或者多巴酚丁胺的原液, 即为药物浓度为100.00 μ g/mL的血清, 然后取药物浓度为100.00 μ g/mL的血清和等体积原血清混合, 即为50.00 μ g/mL药物浓度的血清, 以此等比稀释方法, 制备药物浓度为25.00、12.50、6.25、3.13、1.57 μ g/mL的血清。对照血清(即药物浓度为0 μ g/mL)为990 μ L血清加入10 μ L生理盐水。在日立7600上进行的检测项目是Cr、UA、Glu、TC、TG、GSP; 强生VITROS上进行的检测项目是Cr、UA和Glu。每个药物浓度的所有检测项目重复检测3次, 取均值。

三、统计学方法

以未加药物的血清均值减去含有药物的血清均值, 再除以未加药物的血清均值, 计算各个药物浓度下测定结果的下降比例。以下降比例> 10%作为显著差异的判断标准。

结果
一、 多巴胺的影响

1. 对日立7600检测项目的影响

随着药物浓度升高, 对检测项目的负干扰越大。多巴胺造成Cr、UA、Glu、TC、TG、GSP下降超过10%的药物浓度依次是6.25、6.25、50.00、25.00、25.00、3.13 μ g/mL。见图1。

2. 对强生VITROS检测项目的影响

随着药物浓度升高, 对检测项目的负干扰越大。多巴胺浓度为100 μ g/mL时造成Cr、UA下降比例超过10%, 对Glu没有明显影响(< 10%)。见图1。

图1 不同浓度多巴胺对Cr、UA、Glu、TC、TG、GSP的干扰

二、 多巴酚丁胺的影响

1. 对日立7600检测项目的影响

随着药物浓度升高, 对检测项目的负干扰越大。多巴酚丁胺造成Cr、UA、Glu、TC、TG、GSP下降超过10%的药物浓度依次是6.25、6.25、100.00、6.25、12.50、1.57 μ g/mL。见图2。

2. 对强生VITROS检测项目的影响

随着药物浓度升高, 对检测项目的负干扰越大。当多巴酚丁胺浓度为50 μ g/mL时造成Cr、UA下降超过10%, 而浓度为100 μ g/mL时对Glu无明显干扰(< 10%)。见图2。

图2 不同浓度多巴酚丁胺对Cr、UA、Glu、TC、TG、GSP的干扰

讨论

本研究表明多巴胺和多巴酚丁胺对常见的几个基于过氧化物和过氧化物酶反应原理的生化检测项目有明显影响, 这种负干扰随着药物浓度的增高而显著增强。2种药物对不同检测方法的影响有着明显地差异。总体来讲, 强生VITROS检测项目受的影响明显要小, 这可能是由于强生公司干式片上特殊的滤膜设计和去除还原性物质干扰的特殊设计有关。由于日立7600上的试剂普遍缺乏抗还原性物质干扰的设计, 造成了这2种药物对检测结果产生显著影响。特别是GSP、Cr和UA这3个项目, 在低浓度的多巴胺和多巴酚丁胺的影响下, 检测结果下降非常明显, 说明这些试剂更容易受干扰。这提醒临床在使用其他的具有类似还原作用的药物如维生素C、肾上腺素和去甲肾上腺素等时候, 也可能会造成这些项目的检测结果受到影响。因此, 需要进一步的展开对类似药物的干扰评估, 以利于更准确的获得检验结果。

在本研究的6个检测项目中, 都采用了基于过氧化物、过氧化物酶参与氧化底物, 从而产生有色物质的这样一个原理。多巴胺和多巴酚丁胺都是具有还原性的物质, 因此容易和过氧化物产生反应, 造成检测结果下降。有报道表明多巴胺和多巴酚丁胺对生化检验项目干扰的机制并不相同。多巴胺的干扰机理是其在过氧化物和过氧化物酶的存在下, 与检测反应中所用的4-氨基安替比林反应, 生成一种新的醌亚胺类化合物, 这种化合物对光的吸收性明显低于正常产生的醌亚胺类化合物, 从而造成检测结果的下降。多巴酚丁胺的干扰机制主要是其能快速与反应中产生的过氧化物反应(被氧化), 从而消耗了过氧化物, 导致显色反应中的过氧化物缺乏, 从而导致产色物质醌亚胺类产量的减少[2]。在日立7600上的6个检测项目均使用4-氨基安替比林作为反应物质。从受影响的程度上分析, 多巴胺和多巴酚丁胺对这些项目的干扰程度类似。强生VITROS的生化检测项目中Cr和UA没有采用4-氨基安替比林, 而是采用过氧化物氧化咪唑类无色物质显色, 从实际影响程度上看, 多巴酚丁胺的影响更严重些, 这可能是与Cr和UA在反应中避免使用4-氨基安替比林有关。Glu采用的是4-氨基安替比林作为显色物质, 但是出乎意料的是Glu在强生VITROS上的检测是几乎没有受到影响, 这其中的原因尚不能解释。另外, 多巴胺和多巴酚丁胺的药物中均加入了抗氧化剂(即还原剂)的辅料, 如亚硫酸氢钠、L-半胱氨酸和盐酸半胱氨酸。这些辅料作为还原剂也可能会和反应过程中的过氧化氢反应, 从而影响显色产物的量。因此, 辅料的影响也不能完全排除。

多巴胺和多巴酚丁胺临床应用时稳定的血药浓度< 1 μ g/mL, 因此很少出现能干扰检测的高浓度血药情况[2, 3]。本研究表明除多巴酚丁胺在1.57 μ g/mL的血药浓度下对GSP的影响超过10%之外, 其他项目在1 μ g/mL的血药浓度下对结果的影响并不显著, 与国外报道一致[2, 3]。在临床实际工作中, 我们和文献报道均有少数患者由于使用多巴胺造成相关检测项目下降的个案[1]。最近的一篇报道[4]发现在留置静脉或者动脉导管的患者中, 多巴胺等儿茶酚胺类药物容易黏附在导管壁上, 如果从这些留置的导管中直接采血, 就会将相对高浓度的药物混进血液中, 从而干扰Cr的检测, 而如果从外周静脉中直接采血, 由于血液中的药物浓度已经很低, 这种干扰就会显著下降。由此推测在临床上采用静脉留置针的患者中, 如果从留置针中采血, 多巴胺类药物的干扰就容易出现。由于多巴胺和多巴酚丁胺临床应用的很多情况是用于抢救低血压的患者, 由于血压低, 外周血液循环差, 静脉采血相对困难, 加上抢救的时候护士工作紧张, 往往会从静脉留置针中采集血样。除了容易对Cr造成干扰之外, 基于本研究的结果, 对其他5个检测项目也会有不同程度的影响。

临床上碰到的多巴胺和多巴酚丁胺对生化检测项目的影响, 大多数是由于不恰当的样本采集方式造成的。因此, 解决这个问题的第一个关键就是要对临床样本采集人员进行正确的培训指导, 避免在用药的静脉同侧肢体抽血。另外, 检验人员在审核报告的时候, 可以首先根据历次结果判断患者相应检验项目例如Cr是否出现明显下降; 如果这个下降没有合理的临床解释(譬如透析等), 则应对相应的检测项目进行复检; 在确信结果重复检测良好的情况下, 可以选择更进一步的处理。譬如Cr可以采用Jaffe法进行复查, Jaffe法和酶法检测Cr的原理不同, 不受多巴胺等还原性物质的干扰。或者采用受干扰较小的干化学方法进行复查。在现代医院广泛采用计算机软件管理临床检验结果的情况下, 可以在软件系统中增加一些药物对常用生化检测结果影响的信息, 一旦软件分析到患者最近使用了能干扰生化检测的药物, 就对相应的检测结果给出“ 可能干扰检测” 提醒的信息, 这样更有利于检验人员发现这类药物干扰的情况。当然已报道的药物对不同生化项目干扰的程度并不相同。各个医院在应用时要根据自身所使用的试剂和检测系统慎重选择和评估自己受干扰的检验项目。这项工作是一个复杂, 同时也是需要不断验证、改进的过程。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] Daly TM, Kempe KC, Scott MG. "Bouncing" creatinine levels[J]. N Engl J Med, 1996, 334(26): 1749-1750. [本文引用:2]
[2] Karon BS, Daly TM, Scott MG. Mechanisms of dopamine and dobutamine interference in biochemical tests that use peroxide and peroxidase to generate chromophore[J]. Clin Chem, 1998, 44(1): 155-160. [本文引用:5]
[3] Poldermans D, Boersma E, Fioretti P, et al. Hemodynamic changes, plasma catecholamine responses, and echocardiographically detected contractile reserve during two different dobutamine-infusion protocols[J]. J Cardiovasc Pharmacol, 1997, 29(6): 808-813. [本文引用:2]
[4] Saenger AK, Lockwood C, Snozek C, et al. Catecholamine interference in enzymatic creatinine assays[J]. Clin Chem, 2009, 55(9): 1732-1736. [本文引用:1]