解脲脲原体性阴道病中Nugent评分的应用及影响因素
冯长海1, 周小龙2, 王薛峰1, 张润玲1, 杨乃超1, 朱如月1
1. 昆山市宗仁卿纪念医院检验科,江苏 昆山 215300
2. 赣南医学院解剖系,江西 赣州 341000

通讯作者:周小龙,联系电话:0797-8169513。

作者简介:冯长海,男,1970年生,硕士,主管技师,主要从事微生物抗感染和免疫研究。

摘要
目的

探讨将Nugent评分法应用于解脲脲原体性阴道病的意义及可能影响评分的因素。

方法

收集128例疑似细菌性阴道病患者的阴道分泌物标本,进行解脲脲原体培养和Nugent评分,根据低倍镜下上皮细胞的多少分成2组(Ⅰ组为薄涂片组:涂片镜检每低倍视野>10个且≤30个上皮细胞;Ⅱ组为厚涂片组:涂片镜检每低倍视野>30个上皮细胞),并对2组标本解脲脲原体在Nugent评分等级中的阳性率进行比较。

结果

2组阴道分泌物涂片Nugent评分结果差异具有统计学意义(P<0.05),其中评分>6的标本中解脲脲原体阳性率明显高于评分<4的标本。

结论

阴道分泌物标本采样质量、涂片厚薄均可对Nugent评分产生影响,推荐镜检应作厚涂片。

关键词: Nugent评分; 细菌性阴道病; 解脲脲原体
中图分类号:R446.5 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2011)09-0586-03
Application and influence factors of Nugent score on ureaplasma urealyticum vaginosis
FENG Changhai1, ZHOU Xiaolong2, WANG Xuefeng1, ZHANG Runling1, YANG Naichao1, ZHU Ruyue1
1. Department of Clinical Laboratory, Jen Ching Memorial Hospital, Jiangsu Kunshan 215300, China
2. Department of Anatomy, Gannan Medical University, Jiangxi Ganzhou 341000, China
Abstract
Objective

To investigate the significance of Nugent score on ureaplasma urealyticum vaginosis and analyze the potential influence factors of Nugent score.

Methods

The vaginal fluid was collected from 128 suspected bacterial vaginosis patients. Ureaplasma urealyticum were cultured, and Nugent score was performed. The vaginal fluids' slides were classified into 2 groups [GroupⅠ: thin smear group (the number of epithelial cells was >10 and ≤30), Group Ⅱ: thick smear group (the number of epithelial cells was >30)] by epithelial cell viewed under low power microscope, and ureaplasma urealyticum positive ratios of the 2 Nugent scores were compared.

Results

There were statistical significance between the results of the 2 Nugent score groups (P<0.05). Ureaplasma urealyticum positive ratio of the Nugent score > 6 group was higher than that of the Nugent score < 4 group.

Conclusions

The quality of vaginal fluids and the thickness of smear have an effect on Nugent score. The thick smear should be determined by microscope.

Keyword: Nugent score; Bacterial vaginosis; Ureaplasma urealyticum

细菌性阴道病是妇科常见的阴道感染性疾病,经典的四步法诊断标准是Amsel等在1983年提出的。Nugent等人在1991年根据阴道分泌物涂片革兰染色的结果,提出了新的诊断标准。因其简便易行且临床反馈较好,也被称为诊断细菌性阴道病的金标准。解脲脲原体是女性泌尿生殖道常见微生物,但可对妇女或新生儿产生不同程度的危害[ 1]。我们对疑似细菌性阴道病患者阴道分泌物标本进行解脲脲原体培养,同时进行Nugent评分。旨在探讨将Nugent评分应用于由解脲脲原体引发的细菌性阴道病的意义及其影响因素。

材料和方法
一、材料

1. 标本 收集2008年9月至2009年11月来昆山市宗仁卿纪念医院妇科就诊的128例疑似细菌性阴道病患者(同时做阴道分泌物解脲脲原体和淋球菌培养且涂片镜检每低倍视野>10个上皮细胞)的阴道分泌物标本,采集后立刻送检。大肠埃希菌(ATCC 25922)和金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)作为检测革兰染色质量的标准菌株。

2. 试剂 解脲脲原体培养鉴定及药敏试剂盒Mycoplasma IST 2(法国)、血平板(科玛嘉)、快速革兰染液(珠海贝索生物技术有限公司)。

二、方法

1. 制备革兰染色涂片 将128例疑似细菌性阴道病患者阴道分泌物(每人采集2份标本)随机分别接种在Mycoplasma IST 2培养基和淋球菌平板上,接种淋球菌平板的棉签再制作薄涂片,虽然仍厚、薄不均,但革兰染色后仍进行Nugent评分。

2. Nugent评分的判读 将制备的革兰染色涂片根据20个低倍视野平均观察到的上皮细胞多少分成2组(Ⅰ组和Ⅱ组)。Ⅰ组为薄涂片组,55例,涂片镜检每低倍视野>10个且≤30个上皮细胞;Ⅱ组为厚涂片组,73例,涂片镜检每低倍视野>30个上皮细胞。Nugent评分的判读标准参照文献[ 2],见 表1

表1 阴道分泌物革兰染色的评分系统

3. 解脲脲原体培养及其结果判读 严格按试剂盒说明书执行,只是在此基础上增加了排除细菌或真菌干扰的步骤,即在解脲脲原体培养和药敏检测程序的基础上,将24 h或48 h 培养阳性的培养基以无菌操作方式吸取20 μL转种到血平板,35 ℃过夜培养。若无细菌或真菌生长,可判断为解脲脲原体生长阳性;若有细菌或真菌生长,则将生长的细菌或真菌当作解脲脲原体标本进行解脲脲原体培养,同时将其结果和原结果进行比对:如细菌或真菌可使培养基显色,则提示其可干扰解脲脲原体的检测,标本剔除,不在本研究范围内;反之,则认为其不干扰解脲脲原体的检测,纳入研究范围。

三、统计学方法

采用SPSS 11.5软件进行Mann-Whitney U 检验, P<0.05表示差异有统计学意义。

结果
一、涂片镜检结果

革兰染色涂片的镜下结果显示,不同妇女的阴道分泌物标本中携带的细菌种群存在差异,但以革兰阳性杆菌(粗大、短粗、细长)、革兰阴性杆菌及革兰阴性弧菌常见。根据Nugent评分标准,阴道分泌物中出现大量革兰阳性杆菌(粗大、短粗、细长)时,Nugent评分多数<3,见 图1(a)、(b);阴道分泌物中出现大量加德纳菌和/或动弯杆菌时,则Nugent评分多数>6,见 图1(c)、(d)。

图1 Nugent评分常见的几种模式图

二、Nugent评分结果

2组阴道分泌物涂片Nugent评分结果差异有统计学意义( P<0.05),Ⅰ组中评分>6的标本数占总数的9.09%,评分<4的标本数占总数的58.18%,Ⅱ组中评分>6的标本数占总数的28.77%,评分<4的标本数占总数的24.24%。2组中评分>6的标本中解脲脲原体阳性率明显高于评分<4的标本,见 表2。2组标本在Nugent评分等级中的解脲脲原体阳性率比较,差异有统计学意义( Z = -3.125, P= 0.002)。

表2 2组阴道分泌物标本Nugent评分的构成比和解脲脲原体的阳性率
讨论

细菌性阴道病曾被称为非特异性阴道病、加德纳菌阴道病、阴道嗜血杆菌阴道病。1984年瑞典国际专题学术会议统一命名为细菌性阴道病。其发病机制为具有阴道自洁作用的乳酸杆菌数量减少,加德纳菌及其他厌氧菌群增加,导致阴道菌群失调。乳酸杆菌可分解糖元生成乳酸,其数量减少,可致阴道pH值升高;同样,加德纳菌及其他厌氧菌群可分解氨基酸产生碱性胺类物质,其数量增加,也可致阴道pH值升高。阴道pH值升高可使阴道壁表面结构发生改变,出现阴道分泌物增多、有异味、阴道瘙痒等临床症状。Nugent评分正是通过对革兰染色的阴道分泌物涂片进行菌群评价,反映乳酸杆菌、加德纳菌及其他厌氧菌数量,体现阴道菌群生态平衡状况,有助于细菌性阴道病的诊断,已成为人们一致公认的相对“金标准”。Nugent评分数值意义:0~3分为正常;4~6分为中间态;7~10分为细菌性阴道病。由于Nugent评分的操作至今尚未统一[ 24]。本研究将采集的阴道分泌物标本先在淋球菌平板上涂抹、去除过多的标本,尽可能避免标本质量(分泌物多少)导致涂片厚薄不匀。镜检结果显示,检体的质量可导致涂片厚薄不均;Nugent评分结果显示,厚涂片更易获得较高的Nugent评分(28.77%的构成比),即更易为临床提供细菌性阴道病的诊断依据,这也表明阴道分泌物标本采样质量、涂片厚薄可对Nugent评分产生影响。至于究竟推荐具体的哪种评分标准,尚待深入、广泛的应用、分析和评价后方能作出决定。本研究建议检体进行厚涂片镜检为妥。

尽管如此,Nugent评分>6和Nugent评分<4的标本中,解脲脲原体均显示出很高的阳性率,推测是由于地域性差异引起[ 46]。本研究中的患者大多携带有解脲脲原体,且所携带的解脲脲原体可作为正常菌群存在,并不导致患者发病。Nugent评分>6的标本中检出解脲脲原体的概率远远高于Nugent评分<4的标本,表明细菌性阴道病患者的标本中更易检出解脲脲原体,即Nugent评分提示解脲脲原体性与细菌性阴道病相关。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
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