280例样本批内精密度及标准差见 表1。

计算 CV=20%时的TSH功能灵敏度。当 CV=20%时,对应的TSH浓度为0.018 mIU/L,见 图1。

表1

表1

表1 280例样本批内精密度及标准差 批次 1 2 3 4 5 6 7 1 58.971 2 20.007 1 3.949 129 1.0148 81 0.202 782 0.05 0.011 154 2 61.116 26 20.584 57 3.773 563 1.003 101 0.206 477 0.048 414 0.011 753 3 60.337 09 21.823 32 4.088 3 0.981 845 0.203 312 0.053 48 0.010 369 4 65.339 29 20.101 56 3.976 331 0.965 073 0.205 406 0.055 185 0.010 599 5 53.819 2 20.355 53 3.694 926 1.058 844 0.187 422 0.056 69 0.010 79 6 56.931 27 20.587 31 3.778 265 0.951 673 0.198 254 0.057 205 0.010 571 7 61.091 15 21.628 38 3.963 819 0.972 22 0.211 592 0.054 461 0.013 475 8 61.894 15 22.659 55 3.974 925 0.942 18 0.210 175 0.052 721 0.014 748 9 63.335 32 20.585 3.788 23 0.951 372 0.222 103 0.065 276 0.014 797 10 61.571 72 21.437 52 3.666 88 0.931 927 0.234 368 0.062 529 0.014 577 11 59.671 97 22.210 89 3.719 122 0.987 03 0.210 568 0.058 474 0.017 595 12 58.315 4 21.697 93 3.638 069 1.133 458 0.206 871 0.056 731 0.013 475 13 55.616 74 21.180 24 3.929 242 1.059 742 0.181 065 0.073 341 0.009 422 14 58.991 87 22.691 36 3.789 283 1.081 937 0.186 17 0.073 845 0.015 219 15 61.116 26 21.813 73 4.172 068 1.026 802 0.218 427 0.066 907 0.023 023 16 63.564 61 20.099 02 4.002 344 1.073 87 0.218 427 0.061 041 0.021 069 17 62.020 05 22.058 3 3.795 529 0.963 794 0.207 687 0.057 847 0.017 856 18 63.497 68 20.485 66 3.845 091 0.984 926 0.177 815 0.066 57 0.019 045 19 60.594 28 21.205 3.733 642 1.017 206 0.207 778 0.047 494 0.012 227 20 57.517 58 20.950 89 3.625 664 1.022 08 0.206 793 0.064 962 0.019 194 21 57.150 72 22.696 76 3.719 052 1.002 501 0.223 172 0.052 512 0.007 169 22 57.493 63 21.786 2 4.061 705 1.056 825 0.206 333 0.051 739 0.012 251 23 59.453 91 21.298 03 3.982 869 1.073 123 0.222 178 0.053 707 0.010 962 24 58.712 35 22.310 08 4.059 524 1.038 563 0.233 294 0.055 437 0.010 392 25 59.391 69 22.145 06 4.336 264 0.941 879 0.218 757 0.060 445 0.014 598 26 63.045 08 23.256 27 4.187 632 1.022 304 0.228 137 0.053 704 0.014 598 27 61.681 1 22.057 34 4.117 225 0.951 899 0.175 093 0.048 716 0.013 101 28 62.935 07 22.057 34 4.075 705 0.984 024 0.217 418 0.046 376 0.012 726 29 64.029 28 22.874 79 3.812 094 0.957 998 0.230 109 0.055 747 0.019 244 30 60.879 42 21.963 27 3.894 745 0.954 761 0.214 898 0.060 824 0.018 419 31 59.120 69 22.053 05 3.886 527 1.133 384 0.213 481 0.058 398 0.015 198 32 57.540 3 22.610 71 4.002 063 1.030 099 0.208 129 0.057 943 0.016 396 33 58.409 35 22.095 84 4.228 277 1.038 638 0.218 206 0.063 404 0.015 722 34 55.505 15 20.568 85 4.256 603 1.101 865 0.227 585 0.060 445 0.015 123 35 57.367 81 23.994 84 3.866 72 1.025 228 0.208 995 0.052 494 0.014 898 36 60.469 7 23.254 13 3.962 905 1.077 232 0.205 534 0.056 353 0.016 396 37 58.526 7 20.485 91 4.107 934 1.067 219 0.205 612 0.058 625 0.016 321 38 60.541 01 20.786 89 4.119 9 1.035 343 0.218 285 0.051 058 0.011 528 39 59.673 09 22.955 4.078 027 0.935 396 0.190 451 0.052 57 0.010 779 40 65.853 95 21.322 06 4.113 987 0.987 105 0.213 717 0.065 91 0.014 299 Mean 60.077 33 21.668 38 3.944 35 1.013 48 0.209 57 0.057 49 0.014 28 s 2.701 518 0.992 023 0.182 57 0.054 486 0.014 331 0.006 527 0.003 428 CV(%) 4.50 4.58 4.63 5.38 6.84 11.35 24.01

表1 280例样本批内精密度及标准差

图1

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	图1 CV为20%时的TSH浓度

我国卫生部正着手制定一系列的实验室诊断指南,其中涵盖了甲状腺疾病的实验室诊断指南。由于我国检验医学的整体发展水平与先进国家还存在差距,国内少部分人对于TSH功能灵敏度存在传统的认识误区。因此,在已经公布的实验室指南中,明确体现出跟踪国际最新检验医学发展趋势是我国目前检验医学发展方向。

检测低限^{[ 3]}是指在规定的可能性条件下可检测的最低分析物浓度,常常也被称为最小检测限或用于指示灵敏度,但这个值一般是一个理想值,并不代表临床实际定量可以检测出的灵敏度。检测系统或方法对小于或等于检测低限的分析物量只能报告“无分析物检出”。因此,大于检测低限的相应量只能说明这个样本内有分析物,但不能正确报告定量结果,仅具有定性含义;而功能灵敏度又称临床灵敏度(clinical sensitivity),是指在实际检测中能够测到的待测物的最低浓度值,用于测定检测系统可报告的最低限值,代表可定量的可报告低限。根据批间 CV= 20%时的最大稀释管浓度作为功能灵敏度,这个值一般要比检测低限高,但由于其反映了实际环境检测中的真实灵敏度,所以更有临床价值。因而美国甲状腺协会推荐评价TSH测定应采用功能灵敏度^{[ 1]}。根据NCAB甲状腺疾病检验医学实践指南(LMPG)2002版规定,实验室所采用的TSH检测功能灵敏度必须≤0.02 mIU/L。

国际上按照TSH功能灵敏度,将各种TSH检测试剂区分为三代^{[ 4]}:第1代TSH检测试剂功能灵敏度在1.0~2.0 mIU/L;第2代TSH检测试剂功能灵敏度在0.1~0.2 mIU/L;目前使用化学发光法的第3代TSH检测试剂功能灵敏度在0.01~0.02 mIU/L。

我室引进的LiCA平台,厂商标定的TSH功能灵敏度为0.017 mIU/L。我室参照NACB要求,独立建立本科室LiCA系统的TSH功能灵敏度,并评价其是否能够达到NCAB的相关要求,达到国际第3代TSH的检测水准,以确立一种较为理想的实验室检测技术和功能灵敏度检测规范。以及进一步讨论实验室独立建立TSH功能灵敏度的必要性。

Spencer 等^{[ 4]}早在1996指出TSH功能灵敏度确定在 CV=20%,是基于TSH检测方法学和生物学的原则。尽管存在争论,但一般认为实验室所能允许的最大不精密度应该小于检测项目生物学差异的一半,而20%的 CV正符合这一原则。这条原则最大保证了去除了所有的非生物学带来的可能影响。而国内一些实验评价TSH功能灵敏度,并没有完全遵守NACB准则20设计实验方案,充分还原临床真实环境,去除所有非生物学的干扰因素。NACB还指出TSH功能灵敏度实验中必须建立涵盖检测线性范围的血清库作为待测样本,这和国内目前通行的使用标准品稀释液^{[ 5, 6]}有很大不同。因为标准稀释液存在基质效应,无法准确反映TSH检测平台在临床环境中的真实表现。不但如此,NACB在准则21中明确指出实验室要建立与制造商无关的功能灵敏度。从本研究可以看出,虽然厂商给出的TSH系统灵敏度为0.017 mIU/L,但是由于厂商所处的检测环境难以还原实验室的具体条件,LiCA系统在本研究的实验条件下,在满足NACB的相关规定的前提下,其功能灵敏度为0.018 mIU/L,与厂商提供数值稍有不同。因此,可以得出结论:NACB要求各实验室建立反映自身真实实验环境的TSH功能灵敏度确实存在必要性。

NACB对于TSH功能灵敏度的设计要求是相当苛刻的,本研究的实验方案尚有欠缺不足,但是本研究尝试以国际标准制定实验方案,遵循NACB的要求,将系统功能灵敏度验证完全还原到具体的“真实”实验室环境中,而非人为创造最佳的“虚拟”检测条件,从而得到属于本实验室的TSH功能灵敏度数据,体现检测系统的功能灵敏度相比于检测低限更贴近于临床真实环境,是系统的“真实”检测能力。同时LiCA作为全新一代的均相免疫测定法,在免疫检测过程中的免除清洗/分离,避免了传统免疫检测技术中的最大系统误差来源——清洗/分离,微粒表面积的增加也提高了检测的灵敏度和精密度, CV可以控制在5%以内。本研究LiCA检测系统在严格遵守NACB准则20实验要求的情况下,检测TSH 的功能灵敏度验证值为0.018 mIU/L。由于TSH功能灵敏度最终考验的是检测系统的批间精密度,经过本项目的验证可以看出,LiCA系统的TSH功能灵敏度确实符合NACB的严苛要求,达到了国际上第3代TSH检测试剂水平,是一种较为理想的实验室检测技术。