引用本文
刘晓艳, 徐萍. 人乳头瘤病毒检测的临床意义. 2011, 26(5): 321-323
LIU Xiaoyan, XU Ping. Clinical significance of human papillomavirus determination. Labratory Medicine, 2011, 26(5): 321-323  
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人乳头瘤病毒检测的临床意义
刘晓艳, 徐萍
复旦大学附属妇产科医院检验科,上海 200011

作者简介：刘晓艳,女,1964年生,学士,副主任技师,主要从事临床检验工作。

摘要
目的

探讨多种检测手段联合对于宫颈癌及癌前病变的检测效果。

方法

1 754例患者生殖道人乳头瘤病毒(HPV)DNA阳性患者中1 081例进行阴道镜检测,488例患者进行细胞学检测。

结果

阴道镜检测阳性511例,阳性率为46%,细胞学检测阳性96例,阳性率为20%;HPV DNA检测阳性,细胞学阴性,阴道镜阴性244例;HPV DNA检测阳性,细胞学阳性,阴道镜阳性77例;HPV DNA检测阳性,细胞学阳性,阴道镜阴性19例;HPV DNA检测阳性,细胞学阴性,阴道镜阳性148例。扁平湿疣261例(51%),尖锐湿疣52例(10%),宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ 99例(19%),CINⅡ 155例(30%),CINⅢ 150例(29%),宫颈癌47例(9%)。

结论

HPV DNA检测作为有效的筛查手段必不可少,同时还需结合细胞学检测及阴道镜检测,以提高准确率。

关键词: 人乳头瘤病毒; DNA; 阴道镜; 细胞学检测; 宫颈上皮内瘤变
中图分类号:R373 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2011)05-0321-03
Clinical significance of human papillomavirus determination
LIU Xiaoyan, XU Ping
Department of Clinical Laboratory, Obstetrics and Gynecology Hospital of Fudan University,Shanghai 200011,China
Abstract
Objective

To explore the determination effect of a variety of detection methods combined for the detection of cervical cancer and precancerous disease.

Methods

In 1 754 cases of human papillomavirus (HPV) DNA-positive patients, 1 081 cases were tested by colposcopy, and 488 patients were tested by cytologic examination.

Results

511 patients were positive by colposcopy, and the positive rate was 46%. 96 cases were positive in cytologic examination, and the positive rate was 20%. 244 cases were HPV DNA testing positive, cytologic examination negative and colposcopy negative. 77 cases were HPV DNA testing positive, cytologic examination positive and colposcopy positive. 19 cases were HPV DNA testing positive, cytologic examination positive and colposcopy negative. 148 cases were HPV DNA testing positive, cytologic examination negative and colposcopy positive. 261 cases (51%) were flat condyloma. 52 cases (10%) were condyloma. There were 99 cervical intraepithelial neoplasia (CIN)Ⅰ (19%), 155 CIN Ⅱ (30%) and 150 CIN Ⅲ (29%). 47 cases (9%) were cervical cancer.

Conclusions

HPV DNA testing as an effective means of screening was essential, and cytologic examination and colposcopy are also needed to improve accuracy.

Keyword: Human papillomavirus; DNA; Colposcopy; Cytologic examination; Cervical intraepithelial neoplasia

生殖道人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染是常见的妇产科疾病之一,主要通过性传播,近年来发生率逐年升高。宫颈癌是世界范围内女性第二大恶性肿瘤,也是目前为止最可靠的已知为病毒起源的恶性肿瘤之一。1995年,国际癌症研究协会(IARC)专题讨论会认为,HPV感染是子宫颈癌的主要原因[ 1, 2]。HPV属乳头瘤病毒多型空泡形病毒A亚型,含有双链环形DNA,对鳞状上皮具有组织亲和性,其引起的病变多见于外生殖器等部位的湿疣和恶性肿瘤。我们通过联合应用第2代杂交捕获技术(HC2)检测HPV DNA、细胞学检测及阴道镜检测探讨多种方法用于宫颈疾病检测的效果。

材料和方法
一、 标本来源

选择2009年5月1日至2009年8月15日来复旦大学附属妇产科医院生殖道HPV DNA阳性患者1 754例,其中作阴道镜检测者1 081例,行细胞学检测者488例。

二、试剂和仪器

HC2检测高危型HPV DNA试剂盒及DML2000荧光光度仪均为德国Quigene公司产品。

三、检测方法

1.HC2法 利用对抗体捕获信号的放大和化学发光信号的检测,一次性检测13种高危型HPV型别(16、18、31、33、35、39、45、51、52、58、59和68型)。检测步骤:(1)碱性溶液破坏病毒DNA双链,释放并分解为核苷酸单链;(2)DNA单链与RNA探针结合为RNA-DNA杂交复合物;(3)第一抗体(特异性抗体)将RNA-DNA杂交复合物固定在微孔壁上;(4)结合有碱性磷酸酶的多个第二抗体与RNA-DNA杂交复合物结合使信号放大;(5)碱性磷酸酶使酶底物发光,判读荧光强弱可确定碱性磷酸酶的含量,从而确定RNA-DNA含量;(6)HPV DNA≥1.0 pg/mL即判定为阳性。

2.细胞学检测方法 按病理科方法进行。

结 果
一、 HPV DNA检测、细胞学检测及阴道镜检测概况

1 754例HPV DNA阳性患者中,行阴道镜检测者1 081例,占62%,阴道镜检测阳性511例,阳性率为47%;行细胞学检测者488例,细胞学检测阳性96例,阳性率为20%。

1.HPV DNA检测、细胞学检测及阴道镜检测相互间关系 见 表1。

表1 不同检测方法之间的关系

阳性预测值80.2%, 阴性预测值62.4%,敏感性65.8%,特异性92.8%。

2.各种宫颈病变所占的比例 扁平湿疣261例(51%),尖锐湿疣52例(10%),宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ 99例(19%),CINⅡ 155例(30%),CINⅢ 150例(29%),宫颈癌47例(9%)。

讨 论

HPV是导致宫颈癌的主要原因,已知99.7%的宫颈癌患者的活检组织中可检测到HPV DNA[ 3],检测HPV DNA对于早期筛查宫颈疾病是非常需要的。阴道镜检测诊断主要是依据异常上皮和异常血管进行判断,CIN的阴道镜图像可以是多种多样的,有研究认为醋白上皮、二联征(醋白上皮+镶嵌或点状血管)、三联征(醋白上皮+镶嵌+异形血管)这3种图像与病理组织学的符合率分别可达到66.7%、77.8%、100%[ 4]。目前随着细胞学检测方法的改进,出现了更为准确、先进的液基细胞学检测手段,同时报告格式、诊断术语标准化,能明确反映有意义的形态学发现,利于细胞病理和临床的沟通,增加了标本的可信度[ 4]。我们通过联合3种检测手段分析宫颈病变情况,以求得出较好的处理方式。

从本试验结果可以看到HPV DNA、细胞学检测及阴道镜检测均为阳性者77例,占16%;而HPV DNA阳性,细胞学阳性,阴道镜阴性的仅占4%;HPV DNA阳性,细胞学阴性,阴道镜检测阴性的占到了50%,而阴道镜阳性也有30%。从这里我们可以看出HPV DNA检测的敏感性要高于其他二者检查手段,因为HPV DNA载荷量的变化是先于病理学的改变[ 5],当HPV感染一定时间后,细胞学和组织学上才会发生变化,故HPV DNA作为一种筛查的手段是必不可少的。当然本试验中检测HPV DNA试剂盒只针对高危型的HPV型别,而HPV低危型感染可能会导致湿疣及CIN Ⅰ的改变,但最终不会导致宫颈癌。所以对于HPV DNA检测阳性而病理学、细胞学上阴性的患者我们要给予高度重视,需要对患者随访,定期复查HPV DNA的结果。通过上述结果,如果HPV DNA阳性,细胞学阳性,那么作为金标准的阴道镜检测几乎不会漏诊。

作为性传播疾病因子之一的HPV与肛门生殖器疣、宫颈癌及癌前病变的发生、发展及预后有着密切的关系,严重地危害着妇女的身心健康。扁平湿疣与尖锐湿疣为性传播疾病之一,是HPV感染引起鳞状上皮不同程度改变的增生性疾病,其潜伏期国外报道4周至9个月,而近年病程缩短,发病率明显增高,在美国估计患病率是15%[ 6]。本试验中,扁平湿疣与尖锐湿疣患病人数也占了大部分,一些高危的变异亚型可能破坏宿主的免疫系统,病毒持续存在,引起尖锐湿疣反复发作,最终可能导致感染组织恶性转化。

由于HPV感染与宫颈癌及癌前病变的关系密切,因此早期、定期进行HPV检测结合宫颈细胞学检测及阴道镜检测对宫颈癌的防治有着极为重要的意义。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] Bosch FX, Lorincz A, Munoz N, et al. The causal relation between human papillomavirus and cervical cancer[J]. J Clin Pathol, 2002, 55(4): 244-265. [本文引用:1] [JCR: 2.439]
[2] 郎景和. 迎接子宫颈癌预防的全球挑战与机遇[J]. 中华妇产科杂志, 2002, 37(3): 129-131. [本文引用:1]
[3] Castle PE, Cox JT, Schiffman M, et al. Factors influencing histologic confirmation of high-grade squamous intraepithelial lesion cytology[J]. Obstet Gynecol, 2008, 112(3): 637-645. [本文引用:1] [JCR: 4.798]
[4] 赵方辉, 戎寿德, 乔友林. 宫颈癌及其癌前病变筛查方法现状[J]. 中国医学科学院学报, 2001, 23(6): 638-641. [本文引用:2]
[5] 余剑敏, 李海川. 基因第二代杂交捕获技术在宫颈癌筛查中的应用[J]. 中国药物与临床, 2009, 9(1): 46-48. [本文引用:1]
[6] Scheinfeld N, Lehman DS. An evidence-based review of medical and surgical treatments of genital warts[J]. Dermatol Online J, 2006, 12(3): 5. [本文引用:1]