引用本文
胡敏, 张彩红, 黎照环. 不同性别人群血清载脂蛋白M与高敏C反应蛋白相关性分析. 2011, 26(2): 75-78
HU Min, ZHANG Caihong, LI Zhaohuan. Correlation analysis of serum apolipoprotein M with high sensitive C reactive protein with male and female. Labratory Medicine, 2011, 26(2): 75-78  
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不同性别人群血清载脂蛋白M与高敏C反应蛋白相关性分析
胡敏1, 张彩红2, 黎照环1
1.中南大学湘雅二医院检验科,湖南 长沙 410011
2.中南大学湘雅医学院检验系,湖南 长沙 410011

作者简介:胡敏,女,1969年生,博士,副主任技师,主要从事血脂及动脉粥样硬化方面的研究。

摘要
目的

研究健康人血清载脂蛋白M(apo M)和高敏C反应蛋白(hs-CRP)二者在不同性别之间的水平及相关性。

方法

采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定355名健康人群(男169名,女186名)血清apo M浓度,同时采用乳胶增强免疫比浊法测定血清hs-CRP浓度。分析二者在不同性别之间的水平和相关性。

结果

男性血清apo M水平[(1.16±0.84)μmol/L]稍低于女性[(1.30±0.90)μmol/L],hs-CRP水平[0.97(0.1938.47) mg/L]稍高于女性[0.92(0.1617.49) mg/L]。血清中hs-CRP与apo M呈明显负相关( r=-0.183, P=0.003);女性apo M与hs-CRP之间呈明显负相关( r=-0.262, P=0.001),男性二者之间相关性不明显( r=-0.021, P=0.833)。总体分析,apo M与年龄无明显相关性( r=0 .085, P=0.134);但男性血清apo M与年龄呈明显正相关( r=0.232, P=0.008),而女性二者相关性不显著( r=-0 .015, P=0.844)。

结论

apo M与hs-CRP水平可能存在性别差异,二者之间的相关性及apo M与年龄的相关性和性别有关。apo M是一个负的炎性蛋白。

关键词: 载脂蛋白M; 高敏C反应蛋白; 男性; 女性
中图分类号:Q513 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2011)02-0075-04
Correlation analysis of serum apolipoprotein M with high sensitive C reactive protein with male and female
HU Min1, ZHANG Caihong2, LI Zhaohuan1
1. Department of Clinical Laboratory, the Second Xiangya Hospital of Central South University,Hunan Changsha 410011,China
2.Faculty of Laboratory Medicine,Xiangya Medical College of Central South University, Hunan Changsha 410011,china
Abstract
Objective

To determine the serum levels of apolipoprotein M (apo M) and high sensitive C reactive protein (hs-CRP) in healthy subjects,and investigate the relationship of these correlations with male and female.

Methods

The serum apo M was determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and the serum hs-CRP was determined by latex-enhanced immunoturbidimetric assay. The correlation of apo M and hs-CRP in male and female was analyzed.

Results

The level of apo M in males [(1.16±0.84) μmol/L] was lower than that in females [(1.30±0.90) μmol/L], and the level of hs-CRP in males [(0.97(0.1938.47) mg/L] was higher than that in females [0.92(0.1617.49) mg/L]. The level of apo M was negatively correlated to hs-CRP ( r=-0.183, P=0.003). There was obvious negative correlation between apo M and hs-CRP in females ( r=-0.262, P=0.001). The correlation between apo M and hs-CRP in males was not obvious ( r=-0 .021, P=0.833). The level of apo M was not correlated with age ( r=0 .085, P=0.134). However, there was positive correlation between apo M and age in males ( r=0.232, P=0.008). The correlation of apo M and age was not obvious ( r=-0 .015, P=0.844).

Conclusions

The apo M and hs-CRP have difference with sex. The correlation of apo M and hs-CRP and the correlation of apo M and age are related with male and female. The apo M is a negative inflammatory protein.

Keyword: Apolipoprotein M; High sensitive C reactive protein; Male; Female
引言

载脂蛋白M(apolipoprotein M, apo M)是1999年由Xu等[1]在研究富含三酰甘油脂蛋(triglyceride-rich lipoproteins , TGRLP) 时发现的一种不同于以往的脂质转运蛋白类蛋白质。炎症是动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)形成的一个重要机制, 贯穿AS发病的整个过程。高敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein, hs-CRP)是炎症反应极其敏感的指标之一。因此, apo M和hs-CRP之间可能存在着某些联系。目前的研究显示, apo M在动脉粥样硬化发病中扮演的炎症角色(抗炎或致炎) 远不如其在脂代谢中的明确。血清apo M水平在不同性别健康人体中与炎症的关系如何, 国内、外研究报道还较少。我们通过对不同性别健康人群血清apo M和hs-CRP水平的比较, 探讨健康人群中血清apo M水平与炎症的相关性, 以便进一步研究apo M参与冠心病发生、发展的机制及其在冠心病防治中的作用。

材料和方法
一、研究对象

选自2008年10月至2010年4月在中南大学湘雅二医院体检中心体检者共355名, 年龄16~77岁; 其中男169名, 年龄18~77岁; 女186名, 年龄16~76岁。所有对象如有下列情况之一者排除在本研究之外:肿瘤、炎症、创伤或手术两周以内者、严重肝肾功能不全、肾小球肾炎、器官移植患者、免疫系统疾病以及服用免疫调节药物者。

二、研究方法

1. 样本处理

所有研究对象均在清晨空腹自肘静脉采血5 mL , 置于含促凝剂的真空采血管中, 放置30 min后3 000 r/min(离心半径为14 cm)离心5 min , 留取上层血清。以上所有样本均无溶血、黄疸、脂血等情况。取其中1.5 mL血清于-20 ℃保存用于apo M、hs-CRP 的测定。

2. 试剂及仪器

日立7170A全自动生化分析仪, 美国BIO-TEC公司ELX-800酶标仪。apo M试剂盒由长沙远泰生物技术有限公司提供, hs-CRP试剂盒由日本第一化学株式会社提供。

3. 血清apo M测定

采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定, 具体步骤如下:将试剂盒平衡至室温20 min。在包被有apo M抗体的96 孔板中加入不同浓度的apo M参考品(0、25、50、100、200、400 ng/mL), 各浓度均做平行2孔(100 μ L/孔)。加入已经处理好的待检样本(按1∶ 100稀释)各2孔(100 μ L/孔), 37℃温育60 min。甩去孔中液体, 用洗涤液适当洗涤4~6遍, 在吸水纸上吸干; 将1∶ 500稀释后的酶标抗体加入各反应孔(100 μ L/孔), 37 ℃温育60 min。甩去孔中液体, 用洗涤液洗涤4遍, 在吸水纸上吸干。加入显色液, 100 μ L/孔, 37 ℃避光放置15 min。加入终止液, 100 μ L/孔, 混匀后10 min内于450/630 nm双波长下比色。根据标准曲线求得样本中apo M含量。

4. 血清hs-CRP的测定

采用乳胶增强免疫比浊法, 由检验科专业人员检测并负责质控。

三、统计学方法

采用SPSS16.0进行统计分析。对计量资料进行正态性检验(Kolmogorov-Smirnov检验), 正态分布计量资料数据以 ± s表示。偏态分布的数据以中位数(范围)表示, 经对数转换达到近似正态分布后进行数据分析。组间比较使用单因素方差分析(ANOVA), 用LDS法进行两两比较。分析指标间的相关性(符合双变量正态分布计算Pearson系数), P< 0.05表示差异有统计学意义。

结果
一、血清apo M及hs-CRP在不同性别人群中的水平

2组人群血清apo M及hs-CRP水平比较见表1。男性hs-CRP高于女性(P=0.024), 而apo M则稍低于女性, 差异无统计学意义(P> 0.05)。

表1 不同性别人群的血清apo M及hs-CRP水平比较
二、血清apo M及hs-CRP水平相关性分析

总体来说, 血清apo M与hs-CRP呈明显负相关(r=-0.183, P=0.003)。其中女性apo M与hs-CRP水平呈显负相关(r=-0.262, P=0.001), 而男性二者相关性不明显(r=-0.021, P=0.833), 只具有负相关趋势, 见图1。

图1 血清apo M及hs-CRP在不同性别人群中的相关性比较注:○女性; ◇男性; -----女性相关性曲线; ―――男性的相关性曲线; — — 总相关性曲线

三、不同性别人群血清apo M与年龄的相关性分析

总体人群分析, 血清apo M与年龄无明显相关性(r=0.085, P=0.134)。随着年龄的增加, 血清apo M水平有升高的趋势。依性别分组, 男性血清apo M水平与年龄呈明显正相关(r=0.232, P=0.008); 而女性随着年龄的增加, 血清apo M水平反而具有下降的趋势, 但相关性不明显(r=-0.015, P=0.844), 见图2。

图2 血清apo M与不同性别人群年龄的相关性比较注:○女性; ◇男性; -----女性相关性曲线; ―――男性的相关性曲线; — — 总相关性曲线

讨论

研究表明, 人类apo M基因定位于6号染色体的MHC-Ⅲ 区, 而该区的许多基因均与体内免疫炎症反应相关, 且apo M的基因与肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor-α , TNFα )和肿瘤坏死因子β (tumor necrosis factor-β , TNFβ )这2种炎症因子的基因非常接近。因此, 有研究者推测, apo M很可能参与体内免疫炎症反应的调控[1]。为此, Kenneth等[2]观察了在急性时相反应中apo M在体内和体外的变化:菌血症人群或脂多糖处理后的菌血症小鼠模型血浆中apo M水平下降了约50%; 同时, 用脂多糖、酵母聚糖或松节油处理的炎症小鼠肝和肾脏apo M mRNA的表达也明显下降。因此, apo M被认为是一种负的急性时相蛋白。Xu等[3]研究了血小板活化因子(platelet-activating factor, PAF)对肝胚瘤细胞系HepG2细胞apo M表达的影响, 以了解apo M是否参与宿主炎症反应。PAF使HepG2细胞的apo M mRNA表达明显升高、apo M分泌显著增加。低浓度PAF(2 ng/mL)处理后, 可观察到apo M分泌增加, 而高浓度PAF可使apo M mRNA表达及apo M分泌同时增加。另一方面, PAF受体拮抗剂Lexipafant可以以剂量依赖方式显著降低HepG2细胞apo M mRNA表达, 抑制apo M分泌。PAF及Lexipafant均不影响HepG2细胞载脂蛋白A1(apo A1)、载脂蛋白B(apo B)与载脂蛋白E(apo E) mRNA 水平及分泌, 提示PAF或Lexipafant对肝细胞产生apo M的效应是apo M选择性的。由此看来, apo M很可能通过某种特定的作用途径参与体内的免疫炎症反应。

本研究观察了不同性别健康人群血中apo M与hs-CRP水平及二者之间的相关性, 以观察人体内apo M与炎症反应的关系。结果显示男性hs-CRP水平高于女性, 而apo M则低于女性; 表明男性体内慢性炎症反应较女性强。总体来说, 血清apo M与hs-CRP呈明显负相关(r=-0.183, P=0.003), 与文献[2]结果相符。Kenneth等[2]的研究显示炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素-1(IL-1)可降低HepG3B细胞中apo M mRNA的表达; 在用脂多糖(LPS)刺激形成的炎症小鼠模型中, 血浆apo M浓度也降低。他们还同时观察了急性细菌感染人群和慢性人类免疫缺陷病毒(HIV)感染人群血浆apo M水平的变化, 结果显示在急、慢性感染时, 血浆apo M水平均低于对照组[2]。文献[46]显示炎症相关细胞因子TNF和IL-1能降低apo M mRNA的表达, 并且阻止apo M的释放, 导致血清apo M水平降低。Richter等[7]的研究表明, 缺乏肝细胞核因子(HNF-1α )的小鼠体内无apo M表达, 并且HNF-1α 基因突变的MODY3患者血清中apo M表达下降; 提示apo M是一个负炎性指标。目前还未见到apo M与炎症的相关性在不同性别人群中差异的报道。本研究观察了不同性别人群中apo M蛋白与hs-CRP的相关性, 发现女性apo M与hs-CRP呈明显负相关(r=-0.262, P=0.001), 而男性二者相关不明显。即在女性人群中, 随着血清hs-CRP浓度升高, apo M水平会明显降低; 而在男性人群中的这种变化趋势不明显。根据以上结果推测:apo M和hs-CRP在人体中的浓度变化存在着性别差异, 可能与体内性激素水平有关。

在观察了apo M和hs-CRP相关性存在性别差异的基础上, 本研究还观察了apo M与年龄的关系。结果显示, 女性apo M浓度与年龄呈现负相关趋势, 但相关性不显著, 即随着年龄的增加, apo M水平仅有降低的趋势; 但男性结果则相反, 男性apo M与年龄呈明显正相关(r=0.232, P=0.008), 即随着年龄的增加, apo M水平有明显升高的趋势。提示随着年龄的增长, 男性人群体内炎症反应逐渐减弱。总体来说, 年龄与apo M水平间相关性不明显, 可能是由于不同性别人群表现出不同变化趋势而致。本研究结果显示, 女性随着年龄的增加, apo M浓度降低, 而hs-CRP与apo M呈负相关的变化, 推测女性随着年龄的增加, 炎症反应有逐渐增强的趋势。其机制可能与性激素水平的降低有关。而男性人群的变化趋势则相反, 更加进一步证实了apo M伴随着不同性别人群体内的炎症反应而变化, 且受性激素调节的可能性大。

许多已有的研究结果认为, 炎症反应可降低apo M表达, 与本研究结果相同, 均说明了apo M是一个负的炎性蛋白。但是, 还未见有该蛋白在不同性别人群中差别的报道。apo M在人体中是否受性激素的调节有待于更进一步的研究来阐明。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
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