Sysmex UF-1000i全自动尿沉渣分析仪的性能分析及临床应用
杭建峰, 孙朝晖, 石玉玲, 符玉文, 杨至宜, 罗剑
广州军区广州总医院检验科,广东 广州 510010

作者简介:杭建峰,男,1977年生,硕士,医师,主要从事临床检验工作。

摘要
目的

探讨Sysmex UF-1000i全自动尿沉渣分析仪的临床应用情况。

方法

分别采用UF-1000i尿沉渣分析仪和显微镜检查法对2 000例临床标本进行检测,对比2种方法的结果,并分析UF-1000i尿沉渣分析仪产生假阳性的原因。

结果

检测白细胞(WBC),红细胞(RBC),管型和小圆上皮细胞的敏感性分别为99.2%, 99.3%, 94.7%和95.1%;检测上述成分的假阳性率分别为5.8 %、6.1%、10.4%和4.6%;粘液丝、结晶、细菌、酵母菌、小圆上皮、脂肪滴和卵磷脂小体可能影响到UF-1000i对尿有形成分的检测。

结论

Sysmex UF-1000i可以有效的检测尿液中的有形成分,当尿液中上述干扰成分呈阳性或增多时,显微镜镜检是十分重要的。

关键词: 尿沉渣; 尿沉渣分析仪; 临床应用
中图分类号:R446.12 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2011)02-0108-03
Clinical application analysis on the performance of Sysmex UF-1000i automated urinary sediment analyzer
HANG Jianfeng, SUN Zhaohui, SHI Yuling, FU Yuwen, YANG Zhiyi, LUO Jian.
Department of Clinical Laboratory, General Hospital of Guangzhou Military Command of People's Liberation Army, Guangdong Guangzhou 510010, China
Abstract
Objective

To investigate the clinical application values of Sysmex UF-1000i automated urinary sediment analyzer.

Methods

2 000 urine samples were determined by UF-1000i automated urinary sediment analyzer and microscopy. The results were contrasted, and the reasons of false positive in UF-1000i analyzer were analyzed.

Results

When using Sysmex UF-1000i analyzer,the detecting sensitivities of white blood cell (WBC), red blood cell (RBC), cast and small round epithelial cell were 99.2%, 99.3%, 94.7% and 95.1%, and the false positive rates of them were 5.8%, 6.1%,10.4% and 4.6%, respectively. Many factors, like viscose rayon, crystals, bacteria, yeast-like fungus, small round epithelial cells, fat droplets and lecithin body may affect the determination of urine formed elements.

Conclusions

It is an effectual method to detect urinary sediments by Sysmex UF-1000i analyzer. It is very important to observe sediments by microscopy when all above interferences are positive or increase.

Keyword: Urinary sediment; Urinary sediment analyzer; Clinical application
引言

UF-1000i 是Sysmex公司最新一代的全自动的尿沉渣分析仪, 与前几代尿沉渣分析系统相比, 采用了更为先进的测定技术完成尿有形成分的定量分析, 将该分析仪的临床应用情况进行分析。

材料和方法
一、仪器及试剂

UF-1000i全自动尿沉渣分析仪(以下简称UF-1000i)及配套试剂和质控品均购自日本Sysmex公司; Olympus显微镜; DL-5-B离心机; 刻度离心管。

二、标本来源

随机收集广州军区广州总医院住院患者的新鲜清洁中段尿2 000份, 其中男1 035例, 女965例, 年龄2~97岁。

三、方法

随机收集的清洁中段尿每份充分混匀后分成2管各10 mL, 1管用于UF-1000i分析, 另1管用于显微镜的镜检。UF-1000i严格按照仪器操作规程进行操作, 每次开机进行质控品的的测试, 所有标本的检测均在质控品在控的情况下进行。显微镜镜检按照《全国临床检验操作规程》[1]中的尿沉渣离心沉淀检查规定进行。所有标本的测定均在送检后2 h内完成。

四、正常参考值范围

UF-1000i男性:白细胞(WBC) 0~18/μ L, 红细胞(RBC) 0~12/μ L, 小圆上皮细胞0~3/μ L, 管型0~1/μ L; 女性:WBC 0~23/μ L, RBC 0~22/μ L, 小圆上皮细胞0~3/μ L, 管型0~1/μ L; 显微镜镜检:RBC 0~3/高倍镜视野( HPF) , WBC 0~5/ HPF, 小圆上皮细胞:偶见 , 管型 0~1/低倍镜视野(LPF), 超过以上范围即判断为阳性。

结果

一、UF-1000i与显微镜法对2 000份标本检测WBC、RBC、管型和小圆上皮细胞结果见表1~表4。对UF-1000i的性能评价, 见表5

表1 UF-1000i与镜检法检测WBC的结果
表2 UF-1000i与镜检法检测RBC的结果
表3 UF-1000i与镜检法检测管型的结果
表4 UF-1000i与镜检法检测小圆上皮细胞的结果
表5 UF-1000i在检测尿液中各成份时的指标评价(%)

二、对UF-1000i检测WBC、RBC、管型和小圆上皮细胞产生假阳性的标本用显微镜复查的结果见表6

表6 UF-1000i尿分析法假阳性标本复查结果及原因
讨论

UF-1000i利用流式细胞术、电阻抗、荧光染色以及双检测通道(沉渣和细菌)技术, 采用红色半导体激光束照射经过核酸荧光染色后在鞘流贯流分析池中形成的鞘流样本, 通过对从各粒子产生的前向散射光、侧向散射光以及侧向荧光信号转换成的光电信号进行分析, 对各有形成分进行识别, 同时提供RBC、WBC、结晶、管型等成分的定量检测数据, 快速筛选正常和异常的标本。由表1表5可以看出, UF-1000i检测尿中RBC、WBC的假阳性率和假阴性率都比较低, 说明在大量标本检测的情况下该系统具有良好的筛选功能。但UF-1000i对一些尿有形成分(如管型、脂肪滴、病理和药物结晶、包涵体或肿瘤细胞)还不能有效的识别, 从而导致了一些误报的产生。

表6中总结了尿标本中主要有形成分检测时假阳性的原因:造成WBC检测假阳性的主要因素包括小圆上皮、细菌、扁平上皮和脂肪滴等, 其中小圆上皮细胞占了68.4%, 原因可能为WBC与小圆上皮细胞的体积大小、核物质含量相似, 仪器进行荧光流式细胞分析时难以将其区分, 因此影响到WBC的正常检测[2]; 扁平上皮(鳞状上皮细胞)等比较大的细胞, 具有较强的前向散射光强度和荧光强度的特性, 分布在高的荧光脉冲宽度区域和低于管型的散射光脉冲宽度区域, 由于这些细胞的核比较大, 检测时可能会将细胞核误认为是WBC; 当尿液中有大量细菌时, 成团的细菌有时也会使WBC检测结果呈假性升高, 此外尿中的脂肪滴也偶尔会被认为是WBC。

在对UF-1000i检测尿RBC假阳性的标本作显微镜检查时, 发现标本中含有较多的结晶(主要为草酸钙)、细菌、酵母菌等成分。显微镜检表明当尿中只有RBC时, UF-1000i基本不会误认是结晶, 测定的准确性较高, 结果的可信度也比较好; 当尿液中仅有结晶时, 则仪器有可能把结晶误认是RBC, 使RBC检测的假阳性升高; 当尿液中同时存在RBC和结晶时, 结晶的含量不同对RBC的影响程度不同, 结晶含量大时误报情况比较多。结晶中的草酸钙结晶大小、染色敏感性均与RBC类似, 在散点图中与RBC成交叉分布, 因此, 对RBC计数结果影响较大, 而酵母菌的形态大小与RBC类似, 仪器分析时易发生混淆。同样卵磷脂小体和脂肪滴有时与RBC体积大小相仿, 也会对RBC的检测造成假阳性。当尿液中含有一定量大的或成双的细菌(主要是球菌类)时, 其染色后荧光强度和前向散射光强度比较低, 仪器就会容易误认为是RBC [3]

一般认为尿中少量的透明管型是非病理性的, 其他几种管型是病理性的[4]。实验结果表明, UF-1000i对管型的检测敏感性高(94.7%), 重复性好, 但假阳性率也比较高(10.4%), 在对假阳性标本复查后发现原因有以下几点:(1)尿液中存在黏液丝, 黏液丝容易吸附于被荧光染料上色的物质上, 发出强的前向散射光脉冲, 而且有些黏液丝在大小和形态上接近管型, 所以容易被仪器误诊; (2)存在较多的上皮细胞, 有些上皮细胞的大小、粗细类似管型; (3)存在较多的WBC聚集成团, 尤其是脓细胞, WBC在鞘流中容易形成串珠状排列, 使前向散射光分布宽度和荧光脉冲分布宽度增高而被误认为管型; (4)其他如长方形的磷酸铵镁结晶、非晶形尿酸盐结晶大量堆积类似于管型时, 也会提示有管型存在; 还有尿中的真菌和其他杂质也会影响管型检测。

小圆上皮细胞包括肾小管上皮细胞和底层的移行上皮细胞, 也是尿液检测中的一个重要成分。引起UF-1000i检测小圆上皮细胞假阳性的主要原因有WBC和脂肪滴, 他们和小圆上皮细胞的体积相似, 故容易把他们认为小圆上皮细胞。此外有时尿液中细菌聚集成团存在时, 由于其散射光强度可能也会与小圆上皮细胞接近而被误诊。

综上所述, UF-1000i和前几代尿沉渣分析仪相比, 对尿中有形成分检测的敏感性, 特异性, 假阳性等指标均有了很大的提高, 更加符合临床检测的需求, 同时由于其自动化智能化程度高, 检测更快更准确。由于其还不能对复杂尿液中的一些成分(管型、某些结晶, 粘液丝等)进行很好的识别, 显微镜镜检仍然作为一项金标准[5], 而UF-1000i可作为一个有效的筛查手段。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 叶应妩, 王毓三, 申子瑜. 全国临床检验操作规程[M]. 第3版. 南京: 东南大学出版社, 2006: 293-300. [本文引用:1]
[2] 王鸿利. 实验诊断学 [M]. 北京: 人民卫生出版社, 2004: 115-117. [本文引用:1] [CJCR: 0.5387]
[3] 马俊龙, 丛玉隆. 菌尿对尿红细胞测定结果影响的探讨[J]. 中华医学检验杂志, 1999, 22(4): 1. [本文引用:1]
[4] 熊立凡. 临床检验基础[M]. 第3版. 北京: 人民卫生出版社, 2003: 169-170. [本文引用:1]
[5] Fogazzi GB, Garigali G. The clinical art and science of urine microscopy[ J ]. Curr Opin Nephrol Hypertens, 2003, 12(6) : 625-632. [本文引用:1]