三种方法在尿液有形成分分析中的对比观察
引用本文
胡晓舟, 崔艳梅, 王小林, 张捷. 三种方法在尿液有形成分分析中的对比观察. 2011, 26(2): 100-104
HU Xiaozhou, CUI Yanmei, WANG Xiaolin, ZHANG Jie. Comparison on three methods in the examination of urine sediment. Labratory Medicine, 2011, 26(2): 100-104
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HU Xiaozhou, CUI Yanmei, WANG Xiaolin, ZHANG Jie. Comparison on three methods in the examination of urine sediment. Labratory Medicine, 2011, 26(2): 100-104
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三种方法在尿液有形成分分析中的对比观察
作者简介:胡晓舟,女,1978年生,硕士,主治医师,主要从事临床检验诊断学研究。
摘要
目的
探讨UF-1000i尿液有形成分分析仪与干化学方法、手工显微镜检查尿中红细胞(RBC)、白细胞(WBC)的符合情况及影响因素。
方法使用UF-1000i 尿有形成分分析仪、干化学分析仪与显微镜分别检测996例尿液标本中RBC、WBC,将3种方法的检测结果进行比较。
结果分别以RBC、WBC超过25和30个/μL为阳性界值,3种方法检测RBC的完全符合率为78.4%,WBC完全符合率为67.2%;以仪器设定等级划分为标准,则3种方法检测RBC、WBC符合率分别为85.6%和86.5%;UF - 1000i测RBC假阳性率为4.62%;测WBC假阳性率为1.81%。
结论UF - 1000i 尿有形成分分析仪与显微镜检查及干化学方法符合率良好,较UF-100对RBC识别能力提高,抗干扰能力增强。
关键词:
UF - 1000i 尿液有形成分分析仪; 红细胞; 白细胞
中图分类号:R446.12
文献标志码:A
文章编号:1673-8640(2011)02-0100-05
Comparison on three methods in the examination of urine sediment
Abstract
Objective
To compare the performances of UF-1000i urine sediment analyzer, dry chemistry method and manual microscopy in the determinations of red blood cell (RBC) and white blood cell (WBC).
Methods996 urine samples were collected. The RBC and WBC were determined by UF-1000i urine sediment analyzer, dry chemistry method and manual microscopy. The results were compared and analyzed statistically.
ResultsWith the positive cut-off value of 25 per μL for RBC and 30 per μL for WBC, the complete concordances were 78.4% for RBC and 67.2% for WBC. The concordances defined by the grade between the 2 analyzers were found to be 85.6% for RBC and 86.5% for WBC. The false positive rates of the UF-1000i were 4.62% for RBC and 1.81% for WBC.
ConclusionsThese 3 urinalysis methods show good concordance with each other in urine sediment examination. The UF-1000i is more accuracy and anti-interferential than UF-100,but manual microscopy is still necessary.
Keyword:
UF-1000i urine sediment analyzer; Red blood cell; White blood cell
引言
尿液分析是临床诊断肾脏和泌尿道疾病的最普遍最有效的实验室诊断方法。尿干化学方法的应用极大地提高了尿液分析的检测速度, 操作简便, 但由于自身检测原理所限, 对于部分检测项目存在一定的假阳性和假阴性率。显微镜检查作为传统方法被临床医生广泛接受, 但该方法费时、难以标准化且人为影响因素较多, 对于大型医院难以在保证数量的前提下保证质量。近年来尿液有形成分分析仪得到普及, 但该项检查结果有时与干化学方法以及显微镜检查有较大差异。我们通过尿干化学试纸法、UF-1000i自动分析仪法与尿沉渣镜检法的结果比对分析, 探讨UF-1000i全自动尿有形成分分析仪的临床应用价值。
材料和方法
一、研究对象
2009 年3月至5月在北京大学第三医院住院的996例患者进行尿液分析测定, 其中男452 例, 女544例。涉及肾内科、泌尿外科等共20个科室。
二、仪器和试剂
日本Sysmex公司UF-1000i型全自动尿有形成分分析仪及配套试剂、质控品; 国产迪瑞H500型尿液干化学分析仪及配套的尿11项试纸条、质控品; Olympus光学显微镜; 台式水平离心机(LD5-2A, 北京医用离心机厂)。
三、标本收集及检测
用洁净一次性尿杯留取中段尿10 mL 。按仪器操作规程先后在H500及UF-1000i上机测定, 按仪器说明严格正规操作, 每日检测标本前均进行质控物测定, 质控通过后再进行测定。取仪器检测后尿液标本, 以15 000 r/min(离心半径为15 cm)离心5 min, 弃上清液, 留0.2mL沉渣量, 混匀后用一次性滴管取1 滴(20μ L) 置于清洁载玻片上, 覆以18× 18mm盖玻片镜检, 如有管型以低倍镜下连续计数至少20个视野中管型及结晶数, 以所见视野中最低值~最高值报告。在高倍镜下连续计数至少10个视野中红细胞(RBC)、白细胞(WBC)及上皮细胞数, 所有操作在2h内完成。
四、判断标准
1.干化学法
RBC痕量(Trace)[< 10/μ L), 1+(≤ 25/μ L), 2+(≤ 80/μ L), 3+(≤ 200/μ L); WBC Trace(< 15/μ L), 1+(≤ 70/μ L), 2+(≤ 125/μ L), 3+(≤ 500/μ L)]。
2.UF-1000i法
以RBC 025个/μ L、WBC 030个/μ L为阴性, 超出此范围视为阳性。其中等级划分参见仪器软件。
3.镜检法
以RBC 03个/HP, WBC 05个/HP为正常, 超出此范围视为阳性。
五、统计学方法
3种方法检测各项指标阳性检出率比较采用χ 2 检验, P< 0.05为差异有统计学意义。将UF-1000i自动分析仪法与尿沉渣镜检法结果转化为等级变量后, 进行符合率计算。符合率进行一致性检验。完全符合率是指检测结果完全相同的标本数占总标本数的比例; 一般的符合率是指检测结果不超过1个数量级的标本数占总标本数的比例。
结果
一、 3种方法检测WBC、RBC结果分类
经过配对χ 2检验, WBC 3种方法检测差异无统计学意义。在WBC分析中, 3种方法完全符合标本占67.2%, 不同方法差异结果最多见的是仅干化学法阳性, 最少见的是仅镜检法阳性; RBC镜检与干化学法、UF-1000i与干化学法差异无统计学意义, 而UF-1000i与镜检法差异有统计学意义。3种方法完全符合的标本占全部78.4%, 不同方法差异结果最多见的是仅干化学法阳性, 最少见的是仅UF-1000i阴性, 见表1。
 | 表1 3种方法检测WBC、RBC结果比较 |
讨论
UF-1000i是利用流式细胞术和电阻抗原理, 对尿有形成分直接作荧光色素等染色后, 以激光散射强度、散射波幅度及荧光强度和荧光波幅度等参数来识别和计数尿中RBC、WBC、上皮细胞、管型、细菌、结晶体、精子及酵母菌等。在UF100基础上增加了侧向角散射光, 用于解决结晶干扰, 使有形成分的检测更加准确。但是在实际临床使用中, 仍然会出现UF-1000i检测结果与显微镜检以及干化学法不一致的情况。
以UF-1000i、干化学法及显微镜检查3种不同方法进行WBC、RBC检测, 本研究3种方法完全符合标本分别占全部标本的67.2%和78.4%。这与部分研究结论符合[1], 但是也与部分利用UF100、干化学法及显微镜检查进行研究的结论不符。Langlois等[2]研究表明3种方法完全符合标本分别占全部标本的90.5%和92.5%; 本研究不同方法差异结果最多见的均为干化学法单阳性, 而其他研究最多见均为UF单阳性。这种研究结论之间的差别可能原因是:(1)干化学敏感度的差别:由于使用的干化学试剂不同, 其敏感度可能存在差异, 导致UF单阳性标本增多, 而本研究中以干化学单阳性标本为主; (2)UF1000i增加了侧向角散射光区分细胞内部结构, 对于区别细胞成分更加有效, 使UF假阳性标本数量下降。
将RBC按照仪器设定的标准进行等级划分(见表2), 与干化学法的等级划分结果进行符合率的一致性检验, 证明符合率良好。通过对不符合标本的分析, 在112个UF评定级别高于干化学法的标本中, 有16例为镜检2~5个/HP, 有4例为镜检5~10个/HP, 有13例为镜检10~25个/HP。考虑到离心镜检可导致RBC数目约50%下降, 对于RBC较少的标本这种下降趋势更为严重[4], 因此, UF与实际情况的符合程度可能较干化学法和显微镜检查更高, 这种观点也可见于针对UF100进行部分研究结论[3]。因此, 在实际临床应用中UF-1000i可以作为干化学检查的可靠补充, 既减少了人工镜检的工作量, 又有效降低漏检率。
RBC以超过25个/μ L为阳性界值, 约有4.62%其他2项检测方法为双阴性而UF-1000i为阳性, 该比例与部分针对UF100的研究一致[2]。在这46例标本中显微镜检查到草酸钙结晶及无定形盐类结晶9例, 占19.6 %; 大量细菌7例, 占15.2%; 霉菌及精子2例, 占4.4%; UF单阳性者较3种检验方法均为阴性者其结晶、酵母菌数值均有明显升高, 但细菌数平均值较3种方法均为阴性者差别不具显著性。根据5.56/μ L可以换算为1/HPF的原则, 镜检可见3个RBC在UF-1000i可以达到16.7/μ L, 考虑到离心镜检会损失掉至少一半的RBC[4], 则可达到33.6/μ L。这46例标本中, UF-1000i RBC数< 33.6/μ L者有20例, 这些标本作为假阳性处理值得商榷。在剩余的26例标本中, 有6例显微镜检查存在结晶或酵母菌, UF-1000i RBC数在68.11 351.9/μ L之间, 其中3例X'tal值显著升高, 2例YLC值显著升高, 两者同时升高者1例(UF-1000i RBC数1 351.9/μ L), 余20例UF-1000i RBC数在34.763.6/μ L之间。国内有研究证明使用UF100检测, 出现的假阳性标本其中有草酸钙结晶干扰74.9%, 霉菌和大量细菌干扰23.4%, 滴虫、精子等干扰2%[5]。可见结晶或酵母菌仍然可以影响RBC计数, 但是较文献报道的UF100影响已经明显下降。UF-1000i主要利用前向角散射光和侧向角散射光进行RBC和结晶的区分。RBC产生的侧向散射光强度弱, 位于散点图低荧光强度区, 由于结晶体的多面折光性, 可导致其侧向散射光强度更高, 因此, 可以区分两者。但是对于较小的草酸钙结晶、集聚成团的非晶形尿酸盐等, 在FSC-SSC散点图上可以出现两者的交叉分布。酵母菌、精子、滴虫等FSC与RBC类似, 散点图分布介于RBC和WBC之间, 有时又发生与RBC重叠, 仪器难以完全把他们与RBC区分, 从而造成RBC假性增高。文献报道细菌对于RBC计数有影响, 但是数据分析表明UF-1000i细菌对于RBC的影响很小。
相对RBC检测, UF-1000i 对WBC检测假阳性较低。WBC以超过30个/μ L为阳性界值, 约有1.81%其他2项检测方法为双阴性而UF-1000i为阳性, 而干化学法假阳性达到21.99%。通过对18例WBC UF-1000i检测假阳性标本进行镜检分析, 盐类结晶、上皮细胞是影响比较大的因素。
本实验结果表明, UF-1000i与显微镜和干化学检查有良好的可比性, 不同方法相互结合可以有效的提高检出率, 因此, 在临床工作中有其重要价值。与UF100比较, UF-1000i在RBC检测过程中, 其影响因素, 特别是结晶的影响有了一定程度的降低, 但是结晶、大量细菌仍然会影响RBC分析, 是否可以通过一些研究性指标进行判别仍然需要进一步的研究。
The authors have declared that no competing interests exist.
参考文献
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