引用本文
王文武, 曹树正, 杨杰, 张真路. 对乙型肝炎表面抗原弱阳性结果进行确认试验的应用研究. 25(4): 301-303
WANG Wenwu, CAO Shuzheng, YANG Jie, ZHANG Zhenlu. Research on the clinical application of the confirmatory test for samples with weak positive HbsAg. Labratory Medicine, 25(4): 301-303  
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对乙型肝炎表面抗原弱阳性结果进行确认试验的应用研究
王文武, 曹树正, 杨杰, 张真路
武汉亚洲心脏病医院检验中心,湖北 武汉 430022

作者简介：王文武,男,1973年生,学士,副主任技师,主要从事免疫学检验工作。

摘要
目的

评估抗体中和确认试验在乙型肝炎表面抗原(HBsAg) 低值弱阳性标本中的应用。

方法

将由微粒子酶免疫发光法(MEIA)检测的HBsAg结果(S/CO)在1.0~10.0之间的111份弱阳性血清标本进行抗体中和确认试验,并进行乙型肝炎病毒(HBV)酶联免疫吸附试验(ELISA),对比各试验结果间的差异。

结果

抗体中和确认试验阳性92例(82.9%),ELISA检测阳性47例(42.3%),2项试验检测结果间差异有统计学意义( P=0.033)。

结论

对HBsAg 低值弱阳性标本,ELISA检测漏检率很高,敏感性和特异性均不佳;抗体中和确认试验可做为HBsAg弱阳性标本进一步确认的手段。

关键词: 乙型肝炎表面抗原; 弱阳性; 抗体中和确认试验; 酶联免疫吸附试验
中图分类号:R446.61 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2010)04-0301-03
Research on the clinical application of the confirmatory test for samples with weak positive HbsAg
WANG Wenwu, CAO Shuzheng, YANG Jie, ZHANG Zhenlu
Center of Clinical Laboratory, Wuhan Asia Heart Hospital, Hubei Wuhan 430022, China
Abstract
Objective

To study the clinical application of the confirmatory test for samples with weak positive hepatitis B surface antigen (HBsAg).

Methods

111 weak positive HBsAg serum samples, which were screened by microparticle enzyme immunoassay (MEIA) and their S/CO were 1.0-10.0, were retested by antibody neutralization confirmatory test and Hepatitis B virus (HBV) enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The differences between the results of these tests were compared.

Results

The positive results of antibody neutralization confirmatory test and ELISA were 92(82.9%) and 47(42.3%) respectively. The difference between the results of the two tests had statistical significance ( P=0.033).

Conclusions

For the samples with weak positive HBsAg, ELISA has high omission rate, poor sensitivity and specificity. Antibody neutralization confirmatory test can be used as the further means to confirm the samples with weak positive HBsAg.

Keyword: Hepatitis B surface antigen; Weak positive; Antibody neutralization confirmatory test; Enzyme-linked immunosorbent assay

我国在世界上属于乙型肝炎病毒(HBV)感染的高发区, HBV携带者已超过10%, 而其中有许多属于乙型肝炎表面抗原(HBsAg)弱阳性[1]。对于这部分标本, 常规的酶联免疫吸附试验(ELISA)检验由于敏感性和特异性的缘故, 容易被漏检、误检[2]。微粒子酶免疫发光法(MEIA)检测HBsAg敏感性高, 但存在一定的假阳性。为了减少假阳性, 本研究对MEIA检测为弱阳性的标本进行中和确认试验和ELISA检测, 对其中的相互关系进行了初步分析。

材料和方法
一、研究对象

2007年8月至2008年10月从武汉亚洲心脏病医院16 201例入院患者中筛选出符合以下各条件患者111例:(1)经Abbott公司的AXSYM微粒子酶免疫发光分析仪HBsAg检测, 结果的S/CO在1.0~10.0之间; (2)肝功能各项指标正常。按抗体中和确认试验结果将患者分为确认阳性组和确认阴性组, 按ELISA检测结果分为阳性组和阴性组。

二、检测方法

1. HBsAg检测方法为MEIA。AXSYM微粒子酶免疫发光分析仪、检测试剂和抗体中和确认试剂均为美国Abbott公司产品, 检测敏感性为0.23 ng/mL。HBsAg检测以S/CO≥ 1.0为阳性。确认试验以抑制率≥ 50%为阳性。

2. 乙型肝炎血清标志物检测采用ELISA。试剂为上海科华生物工程公司产品, 酶标仪为芬兰雷勃公司的Multiscan MK3酶标分析仪。以HBsAg吸光度值> 临界值为阳性。

3. HBsAg室内质控物购自卫生部临床检验中心。

三、统计学方法

采用SPSS 12.0软件进行分析, 定性结果的阳性率以百分率(%)表示, 结果间比较采用χ 2 检验。

结果

一、以卫生部临床检验中心HBsAg (0.5 ng/mL)作为AXSYM微粒子酶免疫发光分析仪的室内质控物, 测得结果(S/CO)为5.50± 0.37。

二、111例标本AXSYM微粒子酶免疫发光分析仪所测结果(S/CO)为4.12± 2.70。

三、抗体中和确认试验阳性率为82.9%, ELISA阳性率为42.3%, 2项试验的结果差异有统计学意义(P=0.033), 见表1。

表1 ELISA结果与抗体中和确认试验结果的比较

四、以抗体中和确认试验结果为判断标准, ELISA检测的敏感性为46.7%(43/92), 特异性为78.9%(15/19), 检测有效性为52.3%(58/111)。

讨论

乙型肝炎是一种严重威胁人类健康的传染性疾病。急性乙型肝炎中有20%会转为慢性乙型肝炎, 进而可能发展为肝硬化和肝癌。因此, 准确、迅速的诊断对乙型肝炎的治疗和预后极为重要。

对HBV的常规检验多采用ELISA, 但影响其结果的因素较多, 特别是对低浓度HBsAg标本易漏诊或误报[3]。在本研究中, 以HBsAg 确认试验结果为判断标准, 111例HBsAg弱阳性标本ELISA检测的敏感性为46.7%(43/92), 特异性为78.9%(15/19), 检测有效性为52.3%(58/111), 说明ELISA检测存在相当比例的漏检(53.3%, 49/92)和误检(21.1%, 4/19)。

O'Brien[4]对4 514例HBsAg酶免疫法(EIA)测定阳性的标本进行确认试验, 结果确认为假阳性的47例中绝大部分在HBsAg测定中为弱阳性, 因此建议只对HBsAg弱阳性的标本作确认试验。李金明[5]也认为, HBsAg测定结果呈弱阳性的标本均应进行确认。

MEIA对HBsAg检测具有较高的敏感性, 检测低限可达0.1 ng/mL, 敏感性高于ELISA且重复性好, 为安全封闭式操作, 操作时不易被污染[2]。而抗体中和确认试验是利用特异性抗体与标本中的HBsAg进行中和反应, 中和后HBsAg的结合位点被封闭而不能与检测系统中的表面抗体相结合, 从而反应信号大为降低。在本研究中, 111例经MEIA初筛为弱阳性的标本, 经抗体中和确认试验后有19例为假阳性, 假阳性率为17.1%(19/111), 这也说明确认试验能够保证检测的高度特异性。

由此我们认为, 对于初筛结果为弱阳性的标本, 必须进行有效的抗体中和确认试验。这样才能尽可能避免结果的误报、漏报, 为临床诊断提供更好的服务。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 孙南雄, 黄祖瑚, 刘雁雁, 等. 乙型肝炎患者957例血清学标志分析[J]. 中华检验医学杂志, 1999, 22(5): 296-298. [本文引用:1]
[2] 陈瑜, 钟步云, 徐根云, 等. 低水平血清乙肝病毒表面抗原测定及其临床意义[J]. 中华检验医学杂志, 2001, 24(1): 39-41. [本文引用:2]
[3] 梁晓光. 血清标本的质量对ELISA法检测HBsAg结果有影响[J]. 中国医学检验杂志, 2004, 5(2): 143. [本文引用:1]
[4] O'Brien JE. Hepatitis B surface antigen: decreased need for confirmation of reactive results[J]. Clin Chem, 2000, 46(4): 582. [本文引用:1] [JCR: 7.149]
[5] 李金明. 感染性疾病血清学检验中应重视对弱反应性标本的确认[J]. 中华检验医学杂志, 2006, 29(7): 577-580. [本文引用:1]