引用本文
李光富, 胡孝彬, 陈江, 逯心敏. 全自动生化分析仪测定高密度脂蛋白胆固醇后对镁检测的交叉污染. 2009, 24(8): 565-567
LI Guangfu, HU Xiaobin, CHEN Jiang, LU Xinmin.. The cross-contamination that high density lipoprotein cholesterol affected the detection of magnesium by automatic chemistry analyzer. Labratory Medicine, 2009, 24(8): 565-567  
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全自动生化分析仪测定高密度脂蛋白胆固醇后对镁检测的交叉污染
李光富, 胡孝彬, 陈江, 逯心敏
宜宾市第二人民医院检验科,四川 宜宾 644000

作者简介:李光富,男,1970年生,学士,主管技师,主要从事临床生化检验及生化质控管理。

通讯作者:陈 江,联系电话:0831-8255029。

摘要
目的

探讨全自动生化分析仪测定高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)后对镁(Mg)检测的交叉污染。

方法

单独检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)4种试剂中的Mg浓度。检测组分为TG、TC、LDL-C、HDL-C 4组。TG检测组:先测160份TG,紧接着测160份Mg;TC、LDL-C、HDL-C 3组的测定过程同TG检测组。设置比色杯特殊清洗程序后,先测160份HDL-C后紧接着测160份Mg。

结果

HDL-C检测组Mg检测结果显著高于对照组( P<0.01)。其余3组与对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。通过设置特殊清洗程序后,HDL-C检测组Mg检测结果与对照组相比差异无统计学意义( P>0.05)。

结论

全自动生化分析仪测定HDL-C后对Mg测定有严重的交叉污染。可以通过设置比色杯特殊清洗程序消除HDL-C测定对Mg测定的干扰。

关键词: 高密度脂蛋白胆固醇; 镁; 交叉污染
中图分类号:Q548 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2009)08-0565-03
The cross-contamination that high density lipoprotein cholesterol affected the detection of magnesium by automatic chemistry analyzer
LI Guangfu, HU Xiaobin, CHEN Jiang, LU Xinmin.
Department of Clinical Laboratory, the NO.2 People's Hospital of Yibin, SiCHuan YiBin 644000, China
Abstract
Objective

To study the cross-contamination that high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) affected the detection of magnesium (Mg) by automatic chemistry analyzer.

Methods

The concentration of Mg was analyzed by automatic chemistry analyzer in total glyceride(TG), total cholesterol(TC), low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) and HDL-C groups.Mg was tested immediately after HDL-C been analyzed, and then compared to the control group which were analyzed alone. The protocol of TG, TC, LDL-C groups was as above. By setting the special washing program, the item HDL-C was executed primarily and then the item Mg was analyzed.

Results

The value of Mg in the HDL-C group raised highly than the control group( P<0.01).The other groups had no significant difference( P>0.05).After setting the special washing program, there was no significant difference between the HDL-C group and the control group ( P>0.05).

Conclusions

HDL-C affected the detection of magnesium. The cross-contamination can be eliminated by resetting the special washing program in the automatic chemistry analyzer.

Keyword: High-density lipoprotein cholesterol; Magnesium; Cross-contamination

全自动生化分析仪已广泛地应用到临床常规生化检验中, 对仪器性能和样本要求的研究报道较多[1, 2], 且近几年来对试剂针携带污染的研究报道也不少[3~5], 但未见比色杯引起项目间产生交叉污染的报道。我们在日常工作中发现仪器检测镁(Mg)的结果有一部分异常高值, 经复检正常。设置试剂探针特殊清洗程序[4]和调整项目检测顺序后[6]仍不能解决。为找到原因, 我们进行了相应实验。

材料和方法
一、仪器和试剂

仪器为HITACHI 7600-020全自动生化分析仪(简称7600-020)。镁(Mg)测定采用二甲苯胺蓝法, 三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)测定采用酶法, 试剂均购自上海德赛诊断系统有限公司(液体单试剂)。高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测定采用直接一步法, 试剂均购自温州东瓯津玛生物科技有限公司(液体双试剂)。质控血清购自上海德赛诊断系统有限公司。

二、方法

1. TG、TC、HDL-C、LDL-C试剂中Mg的测定 将TG、TC、HDL-C和LDL-C的试剂1(R1)、试剂2(R2)作为样本在7600-020上直接检测Mg 3次。

2. 分别测定TG、TC、LDL-C、HDL-C后再测定Mg 单独测定160份质控血清中的Mg作为对照组, 因为7600-020 P模块的比色杯是160个。检测组分为TG、TC、LDL-C、HDL-C 4组。TG检测组:先测160份质控血清中的TG紧接着测160份质控血清中的Mg, 须让仪器对TG项目吸样完毕立即吸取样本对Mg项目进行检测。其余3个检测组的测定过程同TG检测组。

3. 设置比色杯特殊清洗程序后对HDL-C检测组的测定 在仪器自动清洗比色杯的基础上, 设置比色杯特殊清洗程序, 用300 μ L去离子水将测定过HDL-C的比色杯重复清洗1次后再对HDL-C组进行测定。

三、统计学方法

数据分析采用SPSS11.0软件, 两组比较采用t检验分析。

结 果
一、交叉污染项目的确定

在本科室使用的TG、TC、HDL-C、LDL-C 4种试剂中含Mg最高的试剂是HDL-C, 见表1。

表1 TG、TC、LDL-C、 HDL-C试剂中Mg的测定值
二、测定TG、TC、LDL-C、HDL-C后对Mg检测的影响

通过分析TG、TC、LDL-C、HDL-C 4个组Mg测定的结果, 发现测定HDL-C后对Mg测定有明显干扰(P< 0.01), 偏倚为2.19mmol/L, 相对偏倚率高达69.52%, s=0.18, 见表2。

表2 TG、TC、LDL-C、HDL-C对Mg检测的交叉污染
三、设置比色杯特殊清洗程序后对HDL-C检测组Mg测定的影响

HDL-C检测组Mg的测定结果为(1.00± 0.11) mmol/L, 偏倚为0.04 mmol/L, 相对偏倚率降至4%, s=0.11, 与对照组相比差异无统计学意义(P> 0.05)。

讨 论

全自动生化分析仪已广泛应用到日常生化检验中, 具有快速, 准确等优点, 但交叉污染一直是生化检验工作者关注的一个重要问题。Mg检测在大多数实验室采用的是染料结合法, 试剂之间有很强的交叉影响, 造成检测结果很不准确。由表1可知, TG、TC、LDL-C、HDL-C试剂中所含Mg浓度均较高, 其中HDL-C试剂中所含Mg浓度最高, 与文献报道的Mg浓度存在一定差异[4, 7]。这可能是试剂厂家的差异。

根据表2得知, 测定HDL-C之后立即测定Mg存在很强的交叉污染, 与对照组相比差异有统计学意义(P< 0.01), 偏倚为2.19 mmol/L, 相对偏倚率高达69.52%, 且重复性差(s=0.18)。其余3组与对照组比较无差异(P> 0.05)。说明HDL-C对Mg测定有显著的干扰, 主要原因可能为HDL-C中高浓度的Mg残留在比色杯中, 未能彻底清洗干净造成了很强的交叉污染。

7600-020 P模块的清洗机构分2组共8步:吸去比色杯反应液加碱性清洗液、吸去碱性清洗液加酸性清洗液等。7600-020在连续检测样本的过程中虽按这8步清洗进行, 但HDL-C项目在比色杯里的反应液油性较大, 吸附性很强, 所以比色杯并没有彻底的清洗干净而残留了检测HDL-C后的一些成分。由于HDL-C R1和R2中含有高浓度的Mg, 有可能是HDL-C R1和R2的某一个成分影响了Mg的显色过程; 也有可能是HDL-C R1和R2的某一个成分参与了Mg的反应。这样就导致了检测HDL-C后的比色杯再测定Mg时, 造成Mg结果明显升高。也解释了日常工作中发现Mg有一部分异常高值, 经复检正常。因为检测某一个项目时所使用的比色杯是随机的, 如在一批检测中遇到了检测完HDL-C后的比色杯再检测Mg时, 就造成了异常高值。

通过设置比色杯特殊清洗程序后, 消除了全自动生化分析仪测HDL-C后对Mg测定的交叉污染(P> 0.05), 偏倚为0.04 mmol/L, 相对偏倚率降至4%, s=0.11。

由本研究还可推测以磷酸盐缓冲液为试剂成分的项目对磷测定, 以碳酸盐缓冲液为试剂成分的项目对二氧化碳(CO2)或碳酸氢根(HCO-)的测定, 含高浓度钙(Ca)的试剂的项目对钙(Ca)测定, 含高浓度钾的试剂的项目对钾测定[8]及以三羟甲基氨基甲烷盐酸(Tris-HCl)缓冲液为试剂成分的项目对氯测定等均可能因比色杯未彻底清洗干净而产生交叉污染, 值得我们高度重视和继续进行实验研究。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
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