引用本文
张祎博, 吴琼, 韩立中, 孙景勇, 萧晨路, 忻云妹, 周敏, 倪语星. 临床分离真菌耐药性分析. 2009, 24(2): 88-90
ZHANG Yibo, WU Qiong, HAN Li-zhong, SUN Jingyong, XIAO Chenlu, XIN Yunmei, ZHOU Min, NI Yuxing. Analysis on antifungal agents resistance of clinical isolates of yeasts. Labratory Medicine, 2009, 24(2): 88-90  
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《检验医学》编辑部
临床分离真菌耐药性分析
张祎博1, 吴琼2, 韩立中2, 孙景勇2, 萧晨路2, 忻云妹2, 周敏2, 倪语星2
1.上海交通大学护理学院 ,上海 200025
2.上海交通大学医学院附属瑞金医院临床微生物科,上海 200025

作者简介:张祎博,女,1982年生,硕士,主要从事医院感染与控制研究。

通讯作者:倪语星,联系电话:021-64370045-600633。

摘要
目的

监测分析临床分离真菌对抗菌药物的耐药现状,以加强抗真菌药物的合理应用。

方法

对我院2007年1月至2007年6月分离鉴定出的479株真菌用目前常用的5种抗真菌药物进行药物敏感性试验和分析。

结果

479株真菌中念珠菌和其他真菌分别占98.3%和1.7%,其中前3位依次是白念珠菌(69.5%)、光滑念珠菌(16.9%)和热带念珠菌(8.8%)。在5种抗真菌药物中,耐药率由高到低依次为伊曲康唑(12.7%)、氟康唑(9.8%)、伏立康唑(7.5%)、氟胞嘧啶(1.8%)和两性霉素B(1.0%)。

结论

临床分离的真菌对当前常用抗真菌药物的耐药菌株增多,应引起重视。

关键词: 真菌; 耐药性; 药敏试验
中图分类号:R379 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2009)02-0088-03
Analysis on antifungal agents resistance of clinical isolates of yeasts
ZHANG Yibo1, WU Qiong2, HAN Li-zhong2, SUN Jingyong2, XIAO Chenlu2, XIN Yunmei2, ZHOU Min2, NI Yuxing2
College of Nursing,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200025,China
2. Department of Clinical Microbiikigy, Ruijin Hospital, Shanghai Jiaotong University School of Medicine, Shanghai 200025, China
Abstract
Objective

To monitor and analyze antifungal agents resistance of clinical isolates of yeasts in order to make rational administration of antifungal agents.

Methods

Antifungal agents sensitivity tests were performed with 5 commonly used antifungal agents on 479 yeasts, which were isolated and identified in the hospital from January 2007 to June 2007.

Results

In the 479 clinical isolates of yeasts, the proportions of Monilia and other yeasts were 98.3% and 1.7%.The yeasts were Candida albicans(69.5%), Candida glabrata(16.9%) and Candida tropicalis(8.8%). Among the 5 antifungal agents,itraconazole had the highest resistance rate(12.7%),the followers were flueonazole(9.8%),voriconazole (7.5%), flurocytosine (1.8%)and amphotericin B(1.0%).

Conclusions

The number of yeasts with resistance against antifungal agents increases in clinical practice ,which should arouse great attention of physicians.

Keyword: Yeast; Resistance; Susceptibility test

近年来, 深部真菌病发病率逐年上升, 耐药菌株也逐年增多, 深部真菌感染已成为住院患者死亡的重要原因之一[1]。本研究主要报道2007年1月至6月我院分离鉴定的479株真菌对5种抗真菌药物敏感性的统计分析结果, 以了解近期深部真菌感染的菌种构成及耐药性变迁情况。

材料和方法
一、材料

1.菌株来源 479株真菌来自我科临床分离株, 剔除重复分离菌株。

2.抗真菌药敏试剂 ATB FUNGUS2试剂盒:法国生物梅里埃公司。抗真菌药稀释范围:氟康唑0.25~256 μ g/mL、伊曲康唑4~125 μ g/mL、氟胞嘧啶0.5~128 μ g/mL、两性霉素B 0.5~8 μ g/mL、伏立康唑0.5~64 μ g/mL。

3.仪器及判断标准 应用ATB自动鉴定和药敏分析仪, 结果按美国临床实验室标准化研究所(CLSI)制定的标准进行判别[2], 见表1。

二、方法

将菌落混悬无菌盐水中, 使其浓度为2麦氏单位, 取20 μ L加入ATB培养基中混匀。再以微量加样器吸取此菌液加入药敏板中, 每孔135 μ L, 加盖, 置35 ℃ 孵育24~48 h。以生长对照孔生长良好, 而含药最高稀释孔不生长者为最低抑菌浓度(MIC)。

三、数据分析

使用WHONET5.4软件对药敏结果进行耐药性分析。

表1 抗真菌药物MIC值
结 果
一、菌种的分布和来源

1.菌种的分布 479株临床分离株中念珠菌占98.3% (471/479), 其中白念珠菌占69.5%(333/479), 光滑念珠菌占16.9% (81/479), 热带念珠菌占8.8%(42/479), 近平滑念珠菌和克柔念珠菌分别占1.7% 和1.0% ; 新型隐球菌、红酵母属各占0.2%。

2.科室和人群分布 全部菌株主要从住院患者中分离, 占97.1% ; 门诊患者占2.9%。重症监护病房(ICU) 75株(15.7%), 急诊68株(14.2%), 外科67株(14%), 泌尿外科44株(9.2%), 内科35株(7.3%), 神经内科10株(2.1%), 呼吸科和老年科均为54株(11.3%), 血液科30株(6.3%), 移植科24株(5.0%), 其他科室29株(6.0%)。各科室最常见菌株与总体相似。50岁以上的患者占54.3%(394/479), 其中70岁以上的患者占63.2%(249/394)。

3.标本来源 主要为呼吸道的分离株, 占76.83%, 其中痰标本占64.3%, 咽拭子和鼻拭子分别占10.0%和2.5%; 其次是下消化道分离株, 占7.7% ; 此外中段尿、手术插管、皮肤组织分别占6.5%、2.9%、2.7%; 血液、胸腔积液、胆汁、精液、脓、阴道分泌物、脑脊液和活体组织等为0.6%~0.2%。

二、药敏试验结果

479株真菌对5种抗真菌药物的耐药率依次为:伊曲康唑12.7%, 氟康唑9.8%, 伏立康唑7.5%, 氟胞嘧啶1.8%, 两性霉素B 1.0%常见真菌对5种药物的敏感率见表2。

表2 临床分离真菌对常用抗真菌药物的药敏试验结果(%)
讨 论

随着中国老龄人口和免疫缺陷患者的增多、新的操作技术的开展以及临床抗真菌药物的大量应用, 深部真菌病的发病率正在逐年上升。念珠菌引起的血源性感染不仅是最常见的深部念珠菌病, 也是引起住院患者感染和死亡的重要原因[1]。

念珠菌是真菌病最常见的致病菌, 其中白念珠菌所占比例最高[3, 4], 与我院的研究结果一致。但Hazen和Pfaller等[5, 6]分别对全球多国家、多实验室连续多年调查后报道, 白念珠菌的比例呈下降趋势, 而非白念珠菌的比例呈上升趋势。近年来, 国内也有相似的研究报道[7]。

本组资料显示, 耐药率较高的前3种药物由高到低依次是伊曲康唑、氟康唑和伏立康唑。他们都是第3代咪唑类抗真菌药。氟康唑和伊曲康唑在20世纪90年代进入我国, 因其疗效好、副作用小、抗真菌谱广而用于治疗各种真菌病, 特别是对临床常见的念珠菌、隐球菌、曲霉等感染, 已成为深部真菌病的首选药物。氟康唑也用于白细胞减少、机体免疫力降低的肿瘤患者以及器官移植患者的预防性用药。Panackal等[8]研究认为氟康唑和伏立康唑的耐药存在高度相关性。Magill等[9]也研究发现耐氟康唑的菌株中有32%同时对伏立康唑耐药。最近, Alexander等[10]分析曾接受过氟康唑和伏立康唑治疗的骨髓移植患者的光滑念珠菌后发现, 菌株一旦对氟康唑耐药, 那么对其他新的三唑类抗菌药物的敏感性也会下降。我院资料显示, 对氟康唑耐药的念珠菌为48株, 同时对伊曲康唑耐药的为22株, 占45.83%。未发现单独对伏立康唑耐药的菌株, 都是与其他三唑类抗菌药物共同耐药。

目前临床上深部真菌病诊断和治疗尚不能令人满意, 正确判读抗真菌药敏试验结果, 明确其与临床疗效的相关性, 是提高临床诊疗水平的关键因素之一。实践证明, CLSI推荐的针对真菌的稀释法药敏试验(M-27A)正确、稳定、重复性好。氟康唑对念珠菌和隐球菌的体外抗菌活性与体内疗效一致性非常好, 但并非所有的体外药敏试验都与体内抗真菌药物的疗效一致。首先, 机体自身的免疫防御机制在真菌病的发生过程中起十分重要的作用。其次, CLSI对不同感染菌株来源有不同的药敏判断标准。如CLSI明确指出, 伊曲康唑敏感和耐药的折点是基于黏膜的念珠菌感染而建立的, 不适用于深部念珠菌感染。因此临床实验室应与临床医生及时进行沟通, 临床医生在判读局部真菌病药敏结果时, 应根据不同药物在不同组织中的药代特征、蓄积浓度、MIC与蓄积浓度的关系、抗真菌谱和患者对抵抗不良反应的能力来选择抗真菌药物。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
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