引用本文
张晓航, 田桢干, 吴嘉平, 方筠, 章琪. 口岸出入境人群梅毒感染检测方法比较. 2009, 24(2): 85-87
ZHANG Xiaohang, TIAN Zhengan, WU Jiaping, FANG Yun, ZHANG Qi. Comparison of the methods of syphilis detection for exit-entry people. Labratory Medicine, 2009, 24(2): 85-87  
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口岸出入境人群梅毒感染检测方法比较
张晓航, 田桢干, 吴嘉平, 方筠, 章琪
上海出入境检验检疫局国际旅行卫生保健中心,上海 200335

作者简介:张晓航,女,1971年生,学士,主管医师,主要从事出入境人员检验检疫工作。

摘要
目的

探讨适合口岸出入境人群检测梅毒的方法。

方法

采用国产酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂与甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)进行血清学方法比较,采用聚合酶链反应(PCR)对梅毒患者生殖道皮损渗出液进行检测,分析其传染性。

结果

国产ELISA试剂与TPPA检测结果阳性符合率为96%(263/273),2种方法对273例标本的检测结果差异无统计学意义。而TRUST和TPPA检测结果差异有统计学意义,与ELISA检测结果差异亦有统计学意义。PCR检测29例梅毒患者生殖道皮损渗出液和100例初筛阳性血清标本,生殖道皮损渗出液与临床诊断符合率为100%,血清检测结果均为阴性。

结论

ELISA可替代TRUST和TPPA作为梅毒感染的筛查方法。PCR不能作为出入境人员梅毒传染性判断的方法。

关键词: 梅毒; 出入境人群; 甲苯胺红不加热血清试验; 梅毒螺旋体颗粒凝集试验; 酶联免疫吸附试验
中图分类号:R377 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2009)02-0085-03
Comparison of the methods of syphilis detection for exit-entry people
ZHANG Xiaohang, TIAN Zhengan, WU Jiaping, FANG Yun, ZHANG Qi
Shanghai International Travel Healthcare Center,Shanghai 200335, China
Abstract
Objective

To select the methods of syphilis detection for exit-entry people.

Methods

Three serologic methods including domestic-made enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) reagents,the toluidine red unheated-serum test (TRUST) and treponema pallidum particle agglutination test (TPPA) reagents were compared. The transudate fluid of the syphilis patient in genital duct was detected by polymerase chain reaction (PCR)for analysis of infectivity.

Results

The positive coincidence rate of the domestic-made ELISA reagents and the TPPA reagents was 96%(263/273).There was no statistics difference between the two methods. The detecting result of TRUST was statistically different compared with that of TPPA, as well as with ELISA. 29 transudate samples from genital duct of the syphilis patient and 100 positive serum samples were detected by PCR. There was a 100% coincidence rate between the detecting results of the transudate samples and the clinical results. The detecting results of serum were all negative.

Conclusions

ELISA can be used as the screening method to detect the infection of syphilis instead of TRUST and TPPA. PCR is not a suitable confirmation method to detect the infection of syphilis among the exit-entry people.

Keyword: Syphilis; Exit-entry people; Toluidine red unheated-serum test; Treponema pallidum particle agglutination test; Enzyme-linked immunosorbent assay

梅毒是常见性病之一, 其发病率居传报甲乙类传染病的第4位[1]。国际旅行者是梅毒的高危人群[2]。根据《中华人民共和国传染病防治法》、《中华人民共和国国境卫生检疫法》的规定, 须对出入境人群开展梅毒监测。目前, 我国仅少数大城市口岸对出入境人群用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)或/和梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)进行梅毒初筛。在大多数城市口岸仅做TRUST, 对阳性的标本才进行TPPA确认。我们选用多种国产酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂与TRUST 、TPPA进行比较, 建立适合口岸出入境人群梅毒检测的方法。另外, 采用聚合酶链反应(PCR)对梅毒患者生殖道皮损渗出液进行检测, 分析其传染性。

材料和方法
一、研究对象

收集2004至2005年来上海出入境检验检疫局体检的较高滴度TRUST梅毒患者、梅毒曾感染者、非梅毒感染者血清共273例。同时从上海市浦南医院性病门诊采集29例早中期梅毒生殖道皮损渗出液及100例初筛阳性血清标本。

二、试剂与方法

梅毒初筛用上海荣盛TRUST试剂, 确认用日本富士TPPA试剂。ELISA试剂为万泰、新创、科华产品; 梅毒荧光定量PCR试剂由复星医学科技发展有限公司提供。所用试剂都在有效期范围内, 实验严格按照各试剂的说明书规范操作。对中国籍人群先测TRUST, TRUST初筛阳性才做TPPA, 境外人群同时检测TRUST和TPPA。

三、统计学方法

不同方法间的差异采用McNemar非参数检验。

结 果

一、273例梅毒感染者ELISA和TPPA检测结果差异无统计学意义(P> 0.05)。2种方法检测结果的符合率为96%(263/273), 见表1。

表1 273例梅毒感染者ELISA和TPPA检测结果比较

二、273例梅毒感染者TRUST和TPPA检测结果差异有统计学意义(P< 0.001), 见表2。

表2 273例梅毒感染者TRUST和TPPA检测结果比较

三、273例梅毒感染者ELISA和TRUST检测结果差异有统计学意义(P< 0.001), 见表3。

表3 273例梅毒感染者ELISA和TRUST检测结果比较

四、临床性病门诊29例梅毒患者, TRUST滴度均> 1: 2, TPPA滴度均> 1: 80, 其中女5例, 梅毒二期5例, 其余为梅毒一期, 治疗时间为2~25 d。29例梅毒患者生殖道皮损渗出液标本PCR检测均为阳性, 与临床诊断符合率为100%, 而100例初筛阳性血清标本PCR检测均为阴性。

讨 论

TRUST是检测梅毒非特异性反应素, 存在生物学假阳性和假阴性(前带现象), 易造成误检和漏检。TPPA和ELISA试剂同样是检测梅毒患者特异性抗体, 由于TPPA试剂不需要特殊设备、单人份检测, 被我国广泛用于临床梅毒确认。但其依赖进口, 价格是国产ELISA试剂的3倍, 且对实验人员的技术要求较高, 判定结果通过肉眼观察, 受人为因素影响较大, 易造成漏检, 而ELISA具有敏感性高, 准确、价廉, 检测结果客观, 能实现实验全过程标准化, 实验结果不受溶血和纤维蛋白的影响, 采用全自动酶标仪可同时快速检测大批量标本等优点。我们使用多种试剂检测比对, 其敏感性: ELISA(268/273)=TPPA(268/273)> TRUST(152/273)。国产ELISA与TPPA检测结果阳性符合率为96%(263/273), 2种方法对273例标本的检测结果差异无统计学意义。而TRUST和TPPA检测结果差异有统计学意义, ELISA和TRUST检测结果差异亦有统计学意义。所以, 我们认为ELISA可替代TPPA作为梅毒感染的初筛和确认方法。王露楠等[3]采用国产酶标试剂与快速血浆试验(RPR)或TRUST初筛方法进行比对, 结果显示国产酶标试剂的特异性和敏感性均优于RPR或TRUST。出入境人群中有部分梅毒患者体检前都经过有效治疗, 无明显临床或自觉症状, 为了避免漏检, 初筛实验允许有些假阳性, 应尽可能杜绝假阴性。因此, 我们认为临床常用TRUST或TPPA都不适用于出入境人群梅毒初筛, 建议口岸采用国产ELISA试剂取代TRUST与TPPA作为梅毒筛查试剂。

PCR具有敏感、特异、快速、受标本影响小等优点, 尤其适用于难采样、难分离培养、检测时间长的病原体, 已成功用于多种病原体的快速初筛、早期和鉴别诊断、治愈判断、耐药性检测等方面。我们采用复星科技公司生产的PCR试剂检测了29例梅毒患者生殖道皮损渗出液和100例初筛阳性血清标本中梅毒螺旋体, PCR检测生殖道皮损渗出液与临床诊断符合率为100%。我们采用常规的热裂解技术提取DNA, 还采用DNA提取效率很高的罗氏柱试剂, 但从梅毒患者血清内都未检测出螺旋体。据文献报道, PCR还可用于一期或二期梅毒渗出物、原发性损害、梅毒螺旋体血症、神经或胎传梅毒脑脊液标本或梅毒淋巴结活检穿刺获得组织液的检测[4]。对无明显症状的出入境梅毒患者, 口岸医生很难采到合格的生殖道分泌物标本, 这类采样具有创伤性, 对生殖器已有损伤的性病患者或未婚女性更难接受。因此, 我们认为PCR仅局限于临床特殊诊断, 不适用于健康体检梅毒传染性确认, PCR不能作为出入境人员梅毒传染性判断的方法。

按照新修订的《国际卫生条例》, 口岸应事先征得受检者知情同意, 才能进行创伤性医学检查, 不能把传染病监测作为旅客入境的必要条件。口岸梅毒监测仅局限于需要体检的部分出入境人群, 所以避免这部分人群的误检、漏检则显得更为重要。我们建议在出入境人群中使用国产ELISA试剂进行初筛, 若初筛梅毒抗体为阳性, 再测TRUST滴度, 用于梅毒治愈判断依据。若低TRUST滴度梅毒感染者且无近期接受梅毒治疗的病例, 口岸医生可要求患者及时治疗, 每3个月复查1次, 观察TRUST滴度的变化。以治疗后3~6个月的滴度为准, 若滴度下降或无变化则证明治疗有效, 若上升2个滴度则需重新治疗。通知性伴同治, 阻止梅毒的扩散, 为我国严把国门, 阻止梅毒患者出入境。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 龚向东, 叶顺章, 张君炎, 等. 1991年至2001年我国性病流行病学分析[J]. 中华皮肤科杂志, 2002, 35(3): 178-180. [本文引用:1]
[2] 张晓航, 方筠, 张继伦, 等. 上海市2003年至2004年10413例出入境人群梅毒-HIV监测结果分析[J]. 中华医学与健康杂志, 2005, 2(5): 19-21. [本文引用:1]
[3] 王露楠, 邓巍, 李金明. 梅毒螺旋体感染不同血清学诊断方法的临床评价[J]. 中华检验医学杂志, 2002, 25(6): 352-353. [本文引用:1]
[4] 戴慧光, 李慧珠. 聚合酶链反应在梅毒诊断中的应用[J]. 国外医学皮肤性病学分册, 1996, 22(1): 7-9. [本文引用:1]