引用本文
承晓京, 张克良, 奚彩萍, 宋海英, 周惠娜, 王一. 头孢噻肟与阿奇霉素对金黄色葡萄球菌的联合药敏研究. 2009, 24(12): 853-855
CHENG Xiaojing, ZHANG Keliang, XI Caiping, SONG Haiying, ZHOU Huina, WANG Yi. Study on the antibacterial activity of cefotaxime combined with azithromycin against Staphylococcus aureus . Labratory Medicine, 2009, 24(12): 853-855  
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头孢噻肟与阿奇霉素对金黄色葡萄球菌的联合药敏研究
承晓京1, 张克良2, 奚彩萍2, 宋海英1, 周惠娜1, 王一1
1.常州市妇幼保健院检验科,江苏 常州 213003
2. 常州市妇幼保健院药剂科,江苏 常州 213003

作者简介:承晓京,女,1964年生,主管技师,主要从事临床微生物检验工作。

基金:常州四药临床药学科研项目 (CS2007932)
摘要
目的

研究头孢噻肟(CTX)与阿奇霉素(AZI)联合用药对临床分离的金黄色葡萄球菌的体外抗菌效应。

方法

采用棋盘法设计,用微量肉汤稀释法测定不同浓度组合的抗菌药物对32株临床分离的金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC),并计算抑菌指数(FIC)以判断联合效应。

结果

CTX与AZI联用后金黄色葡萄球菌MIC明显下降,抗菌作用显著增加。对金黄色葡萄球菌主要为相加和协同作用,协同作用为12.50%,相加作用为68.75%,无关作用为18.75%,无拮抗作用。

结论

CTX与AZI联用对临床分离的金黄色葡萄球菌的体外抗菌效应增强,联合应用是合理的。

关键词: 金黄色葡萄球菌; 头孢噻肟; 阿奇霉素; 抑菌指数
中图分类号:R378.1 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2009)12-0853-03
Study on the antibacterial activity of cefotaxime combined with azithromycin against Staphylococcus aureus
CHENG Xiaojing1, ZHANG Keliang2, XI Caiping2, SONG Haiying1, ZHOU Huina1, WANG Yi1
1.Department of Clinical Laboratory,Changzhou Maternity and Children Healthy Hospital, Jiangsu Changzhou 213003,China
2. Department of Pharmacy,Changzhou Maternity and Children Healthy Hospital, Jiangsu Changzhou 213003,China
Abstract
Objective

To study the antibiotic effects of cefotaxime(CTX) combined with azithromycin(AZI) against Staphylococcus aureus which was separated from clinical samples.

Methods

According to the checkerboard method, the minimum inhibitory concentration(MIC)of CTX combined with different amount of antibiotics against the 32 strains of staphylococcus aureus was determined by broth dilution method, and the fractional inhibitory concentration(FIC)index was calculated according to MIC results.

Results

After CTX combined with AZI, the MIC of Staphylococcus aureus was obviously declined,and its antibacterial activity was significantly strengthened. The antibiotic effects of CTX combined with AZI against Staphylococcus aureus were mostly additive effect and synergistic action. The percentages of the synergistic action,additive effect,irrespective effect and antagonistic action were 12.50%, 68.75%, 18.75% and 0% respectively.

Conclusions

The antibacterial activity of CTX combined with AZI against Staphylococcus aureus which is separated from clinic are strengthened. Its combination application is reasonable.

Keyword: Staphylococcus aureus; Cefotaxime; Azithromycin; Fractional inhibitory concentration

金黄色葡萄球菌是临床上最常见的致病菌之一, 可引起多种感染性疾病, 且易产生耐药性, 给临床治疗带来极大的困难。头孢噻肟(cefotaxime, CTX)为第3代头孢菌素, 阿奇霉素(azithromycin, AZI)为新型大环内酯类抗菌药物, 两类抗菌药物联合应用疗效仍有争议[1]。为探讨CTX与AZI联合应用的抗菌效果, 我们选择金黄色葡萄球菌进行这两类药物的体外联合药敏试验。

材料和方法
一、材料

1. 菌株 32株金黄色葡萄球菌为分离自临床下呼吸道、尿液及女性宫颈分泌物样本, 经梅里埃微生物鉴定仪(VITEK32)鉴定确认。其中20株金黄色葡萄球菌对CTX与AZI均敏感; 6株金黄色葡萄球菌CTX耐药, AZI敏感; 6株金黄色葡萄球菌CTX敏感, AZI耐药。质控菌为金黄色葡萄球菌ATCC 25923, 药敏结果判断依据美国临床实验室标准化研究所(CLSI)2007标准。

2. 培养基 水解酪蛋白(M-H)肉汤为杭州天和微生物试剂有限公司产品。血平板为郑州安图绿科生物工程有限公司产品。

3. 抗菌药物 CTX及AZI标准粉剂均为中国药物生物制品鉴定所产品。CTX以0.1 mol/L磷酸缓冲液(pH值6.0)溶解, 配成1 280 μ g/mL储备液; AZI以95%乙醇溶解, 配成1 280 U/mL储备液, -60 ℃保存备用。

4. 仪器 比浊仪(法国生物梅里埃公司); 96孔无菌聚丙乙烯微孔板; 恒温箱。

二、方法

1. 菌液制备 从已分纯并过夜新鲜培养的血平板上挑取4~5个菌落, 接种于M-H肉汤中增菌6 h。菌液用M-H肉汤以比浊仪校正浊度至0.5麦氏(1.5× 108 CFU/mL), 再将菌液稀释200倍, 即得菌悬液[2]。

2. 联合药敏试验 采用微量肉汤稀释法。将CTX与AZI储备液以无菌M-H肉汤倍比稀释成多个浓度(256、128、64、…、0.062 5 μ g/mL; 256、128、64、…、0.062 5 U/mL)。首先测定CTX、AZI对32株金黄色葡萄球菌的单药最低抑菌浓度(MIC)。2种抗菌药物按棋盘法设计, 最高浓度为单药MIC的2倍, 两两组合加入96孔无菌聚丙乙烯微孔板中, 抗菌药物各取50 μ L, 再将菌悬液100 μ L加入孔中, 37 ℃培养18~24 h, 观察结果。记录单独应用药物的最低抑菌浓度MICCTX单用和MICAZI单用, 并选择最佳组合效应时CTX、AZI联合应用时各自的MICCTX联用和MICAZI联用, 以计算抑菌浓度指数(FIC)。

3. FIC计算与判断标准 FIC=MICCTX联用/MICCTX单用+MICAZI联用/MICAZI单用。FIC≤ 0.5为协同作用, 0.5< FIC≤ 1为相加作用, 1< FIC≤ 2为无关作用, FIC> 2为拮抗作用。

结 果

一、32株金黄色葡萄球菌中, 20株MICCTX单用 为1~4 μ g /mL、MICAZI单用为0.5~1 U/mL, CTX、AZI联用后2种药物的MIC 降低1~2稀释倍数; 6株MICCTX单用为> 256 μ g/mL、MICAZI单用为1~4 U/mL, 2种药物联用后的CTX MIC 降低4~5稀释倍数, AZI MIC 降低1~2稀释倍数; 6株MICCTX单用为1~2 μ g/mL、MICAZI单用为> 256 U/mL, 2种药物联用后药物稀释倍数均无变化。

二、CTX与AZI单用与联用对金黄色葡萄球菌的MIC结果见表1。CTX与AZI单用与联用对金黄色葡萄球菌的浓度累积抑菌百分率曲线见图1。由表1、图1可知, 2种抗菌药物联用后对金黄色葡萄球菌MIC明显下降, 抗菌作用显著增加。

表1 CTX与AZI单用与联用对32株金黄色葡萄球菌的MIC

图1 CTX与AZI单用与联用对金黄色葡萄球菌的浓度累积抑菌百分率曲线

三、CTX与AZI联用对金黄色葡萄球菌的FIC分布, 结果见图2。CTX与AZI联合应用对金黄色葡萄球菌主要表现为协同和相加作用。协同作用为12.50%, 相加作用为68.75%, 无关作用为18.75%, 无拮抗作用。

图2 CTX与AZI联用对金黄色葡萄球菌的FIC分布

讨 论

抗菌药物的单一用药对严重的耐药菌感染作用有限, 易诱导病原菌耐药性, 联合用药是很好的选择。AZI是一种新型的大环内酯类抗菌药物, 作用机制为与细菌核糖体的50s亚基结合, 抑制依赖于RNA的蛋白质合成。CTX为β -内酰胺类第3代头孢菌素, 其作用机制是与细菌内膜上青霉素结合蛋白(PBPs)结合, 抑制转肽酶的转肽作用, 干扰细胞壁的生物合成, 阻碍细菌生长, 为繁殖期杀菌剂。β -内酰胺类抗生素和大环内酯类抗菌药物的联合应用近年来已经得到越来越多学者的支持[3]。有不少报道认为两者合用治疗重症感染, 特别是难治感染的效果良好 [4, 5] 。本研究结果表明, CTX与AZI联合应用对于重要的医院感染病原菌金黄色葡萄球菌的抗菌活性呈现一种累加甚或协同作用, 抗菌活性有很大程度的提高。联合药敏试验结果显示, 20株CTX、AZI敏感的金黄色葡萄球菌两药联用后MIC降低1~2稀释倍数; 6株CTX耐药(MIC> 256 μ g/mL)、AZI敏感或中介(MIC< 4 U/mL) 的金黄色葡萄球菌CTX MIC降低4~5稀释倍数, AZI MIC降低1~2稀释倍数; 6株CTX敏感(MIC< 2 μ g/mL), AZI耐药(MIC> 256 U/mL) 的金黄色葡萄球菌表现为无关作用。32株金黄色葡萄球菌无1例呈拮抗作用。

金黄色葡萄球菌是临床上容易形成生物被膜的致病菌之一。AZI可以抑制细菌生物被膜的形成, 清除细菌生物被膜的细菌[6], 有利于其他抗菌药物的渗透、深入, 而使β -内酰胺类抗菌药物发挥强大的杀菌作用。重症社区获得性肺炎(CAP)中金黄色葡萄球菌感染占10%[7], 中华医学会呼吸病学分会在其制定的社区获得性肺炎诊断和治疗指南(草案)中, 将β -内酰胺类和大环内酯类抗菌药物联合应用作为重症肺炎和老年及有基础疾病患者患有肺炎时的经验性治疗措施之一[8]。本研究结果同样显示CTX与AZI联合应用在体外对于金黄色葡萄球菌具有良好的杀菌作用。但由于金黄色葡萄球菌对两类药物的敏感性不同, 联合用药后的抗菌效果强弱会有所不同, 建议临床上尽量根据药敏结果合理应用抗菌药物。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 郑宝英, 张杰. 抗生素的联合用药[J]. 中国抗生素杂志, 2007, 32(6): 326. [本文引用:1]
[2] 叶应妩, 王毓三, 申子瑜. 全国临床检验操作规程[M]. 第3版. 南京: 东南大学出版社, 2006: 911. [本文引用:1]
[3] 王祥领, 余自成. β-内酰胺类和大环内酯类抗生素的联合应用[J]. 世界临床药物, 2007, 28(7): 390-393. [本文引用:1]
[4] 于海江, 龙惠, 刘小蓉. β-内酰胺类与大环内酯类联用的合理性[J]. 实用医技杂志, 2007, 7(14): 2542-2544. [本文引用:1]
[5] 赵文化, 陈丽, 张建萍. 阿奇霉素联合头孢噻肟钠治疗下呼吸道感染疗效观察[J]. 河北医药, 2006, 28(2): 102. [本文引用:1]
[6] Ichimiya T, Yamasaki T, Nasu M. In-vitro effects of anti-microbial agents on Pseudomonas aeruginosa biofilm formation[J]. J Antimicrob Chemother, 1994, 34(3): 331-341. [本文引用:1]
[7] 栾永娜, 栾美华. 阿奇霉素联合头孢曲松纳治疗重症社区获得性肺炎[J]. 食品与药品, 2006, 8(5): 68-69. [本文引用:1]
[8] 中华医学会呼吸病学分会. 社区获得性肺炎诊断和治疗指南(草案)[J]. 中华结核和呼吸杂志, 1999, 22(4): 199. [本文引用:1]