引用本文
胡祝富, 黄永禄, 徐志江, 张嵘. ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法检测流感嗜血杆菌药物敏感性的比较. 2009, 24(10): 718-720
HU Zhufu, HUANG Yonglu, XU Zhijiang, ZHANG Rong. Comparison of antibiotic susceptibility of Hemophilus influenza by ATB Hemophilus influenza susceptibility test and broth dilution method . Labratory Medicine, 2009, 24(10): 718-720  
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ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法检测流感嗜血杆菌药物敏感性的比较
胡祝富1, 黄永禄2, 徐志江2, 张嵘2
1.开化县中医院检验科,浙江 衢州 324300
2.浙江大学医学院附属第二医院临床检验中心,浙江 杭州 310009

作者简介:胡祝富,男,1960年生,主管技师,主要从事临床微生物检验工作。

通讯作者:张 嵘,联系电话:0571-87783646。

摘要
目的

比较ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法检测流感嗜血杆菌药物敏感性的性能。

方法

收集临床分离的流感嗜血杆菌共96株,采用ATB嗜血杆菌药敏试验板条和肉汤稀释法药敏试验测定氨苄西林、氨苄西林-克拉维酸、复方磺胺甲口恶唑、氯霉素、头孢呋辛和头孢噻肟对96株流感嗜血杆菌的最低抑菌浓度(MIC)。

结果

2种方法检测结果的符合率分别为:氨苄西林96.9%、头孢噻肟100.0%、氨苄西林-克拉维酸91.7%、复方磺胺甲口恶唑92.7%、氯霉素95.8%和头孢呋辛97.9%。

结论

ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法均可用于临床分离的嗜血杆菌药敏试验。

关键词: ATB嗜血杆菌药敏试验; 肉汤稀释法; 流感嗜血杆菌; 评价
中图分类号:R446.5 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2009)10-0718-03
Comparison of antibiotic susceptibility of Hemophilus influenza by ATB Hemophilus influenza susceptibility test and broth dilution method
HU Zhufu1, HUANG Yonglu2, XU Zhijiang2, ZHANG Rong2
1. Department of Clinical Laboratory, Traditional Chinese Medicine Hospital of Kaihua, Zhejiang Quzhou 324300, China
2. Clinical Laboratory Center, the Second Hospital Affiliated to Zhejiang University College of Medicine, Zhejiang Hangzhou 310009, China
Abstract
Objective

To compare the antibiotic susceptibility of Hemophilus influenza by ATB Hemophilus influenza susceptibility test and broth dilution method.

Methods

96 isolates of Hemophilus influenza were collected. The minimal inhibitory concentrations (MIC) of ampicillin, ampicillin-clavulanic acid, trimethoprim-sulfamethoxazole, chloromycin, cefuroxime and cefotaxime to Hemophilus influenza were determined by ATB Hemophilus influenza susceptibility test strip and broth dilution method.

Results

Coincidence rate of two kinds of methods were 96.9% for ampicillin, 100.0% for cefotaxime, 91.7% for ampicillin-clavulanic acid, 92.7% for trimethoprim-sulfamethoxazole, 95.8% for chloromycin and 97.9% for cefuroxime respectively.

Conclusions

ATB Hemophilus influenza susceptibility test and broth dilution method could be used in Hemophilus influenza susceptibility test.

Keyword: ATB Hemophilus influenza susceptibility test; Broth dilution method; Hemophilus influenza; Evaluation

流感嗜血杆菌是临床常见的呼吸道感染致病菌, 目前对该菌的药敏试验主要有:肉汤稀释法、ATB嗜血杆菌药敏试验、纸片扩散法和E-test法, 而ATB嗜血杆菌药敏试验是临床使用多年的方法。我们采用ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法测定临床分离的96株流感嗜血杆菌对6种抗菌药物的药物敏感性。

材料和方法
一、材料

1. 菌株来源 收集温州医学院附属第一医院2005年1月至12月的流感嗜血杆菌24株, 浙江省儿童医院2006年分离的流感嗜血杆菌30株, 浙江大学医学院附属第一医院2005年分离的流感嗜血杆菌20株, 浙江大学医学院附属第二医院2005至2006年分离的流感嗜血杆菌22株, 共95株。无来自同一患者的分离株。所有菌株均为呼吸道标本分离株。

2. 培养基和试剂 (1)流感嗜血杆菌选择性培养基: 流感嗜血杆菌巧克力平板(法国生物梅里埃公司); (2)药敏培养基: 水解酪蛋白胨(MH)肉汤(英国Oxoid 公司)加流感嗜血杆菌添加剂; (3)菌种保存:菌种保存用40 %甘油加MH肉汤和流感嗜血杆菌添加剂, -70 ℃保存; (4)V因子、X因子、V+X因子纸片:英国Oxoid公司; (5)ATB嗜血杆菌药敏试验板条:法国Biomerieux公司。

3. 仪器 ATB半自动细菌鉴定仪(法国Biomerieux公司)。

二、方法

1. 细菌鉴定 用卫星试验、V因子、X因子、V+X因子纸片鉴定流感嗜血杆菌。

2. ATB嗜血杆菌药敏试验 参照ATB HAEMO嗜血杆菌药敏试验板条的操作说明书对氨苄西林、氨苄西林-克拉维酸、复方磺胺甲口恶唑、氯霉素、头孢呋辛和头孢噻肟进行药敏试验, 用ATB细菌鉴定和药敏仪读取结果。

3. 肉汤稀释法药敏试验 参照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的常量肉汤稀释法进行操作和结果的判读。

4.数据分析 计算ATB嗜血杆菌药敏试验板条的重大错误、主要错误、次要错误、符合率和偏差。主要错误是指CLSI推荐的方法判读结果为敏感, 而对比方法为耐药; 次要错误是指CLSI推荐的方法结果判读为耐药或敏感, 而对比方法判读为中介, 或参考方法为中介, 而对比方法判读结果为耐药或敏感; 重大错误是指CLSI推荐的方法结果判读为耐药, 而对比方法判读结果为敏感。符合率是指对比方法与CLSI推荐的方法结果判读完全符合的菌株数所占总菌株数的百分比; 偏差是指对比方法与CLSI推荐的方法判读结果不同的菌株数所占总菌株数的百分比。

结 果
一、 细菌鉴定

细菌经卫星试验、V因子、X因子、V+X因子纸片筛选均证实96株临床收集的菌株为流感嗜血杆菌。

二、药敏试验

用ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法药敏试验对氨苄西林、头孢噻肟、氨苄西林-克拉维酸、氯霉素、头孢呋辛和复方磺胺甲口恶唑检测符合率分别为96.9%、100.0%、91.7%、95.8%、97.9%和92.7%。见表1~6。

表1 96株流感嗜血杆菌用ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法对氨苄西林检测结果比较 (菌株数)
表2 96株流感嗜血杆菌用ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法对头孢噻肟检测结果比较 (菌株数)
表3 96株流感嗜血杆菌用ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法对氨苄西林-克拉维酸检测结果比较(菌株数)
表4 96株流感嗜血杆菌用ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法对氯霉素检测结果比较 (菌株数)
表5 96株流感嗜血杆菌用ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法对头孢呋辛检测结果比较 (菌株数)
表6 96株流感嗜血杆菌用ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法对复方磺胺甲口恶唑检测结果比较 (菌株数)
三、流感嗜血杆菌对6种临床常用抗菌药物的敏感性比较

流感嗜血杆菌对6种抗菌药物的敏感性见表7。

表7 流感嗜血杆菌用2种方法对6种临床常用抗菌药物的敏感性比较(%)
讨 论

目前临床实验室对流感嗜血杆菌的药敏检测主要采用纸片扩散法, 该方法简单易行, 但需批量配制嗜血杆菌专用的药敏平板, 比较适合标本量大的医院使用, 否则平板很容易失效, 影响药敏结果的准确性。肉汤稀释法虽然结果很准确, 但操作繁琐, 而且和每个人的判读有关系, 不适合临床使用。ATB嗜血杆菌药敏试验板条进入中国市场后, 由于操作方便, 已被临床广泛使用, 但很少有人对其结果做一个系统的评价。

我们用ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法药敏试验测定96株流感嗜血杆菌对临床常用的抗菌药物的药敏情况, 发现氨苄西林的符合率为96.9%, 无重大错误, 出现次要错误, 偏差率为3.1%; 对头孢噻肟的符合率为100.0%; 对氨苄西林-克拉维酸的符合率为91.7%, 有主要错误, 偏差率为8.3%; 对氯霉素的符合率为95.8%, 有主要错误1例, 偏差率为1.0%, 有重大错误1例, 偏差率为1.0%, 次要偏差2例, 偏差率为2.1%; 对复方磺胺甲口恶唑的符合率为92.7%, 出现6例次要错误, 偏差率为7.3%; 对头孢呋辛的符合率为97.9%, 出现2例次要错误, 偏差率为2.0%。用ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法检测96株流感嗜血杆菌对6种抗菌药物的符合率均在90%以上。可见ATB嗜血杆菌药敏试验板条作为临床上的药敏试验值得信赖。

从对嗜血杆菌的药敏情况看, 除了复方磺胺甲口恶唑显示较低的敏感性以外, 其他抗菌药物依然保持很好的抗菌效应, 敏感性基本保持在80%以上, 与国内外的情况基本一致[1~3], 且最近几年也没有增长的趋势, 但仍需加强该类苛氧菌的耐药监控。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] Srifuengfung S, Chayakulkeeree M, Chokephaibulkit K, et al. Five-year study of antimicrobial susceptibility and beta-lactamase production in Haemophilus influenzae[J]. Southeast Asian J Trop Med Public Health, 2007, 38(4): 732-736. [本文引用:1]
[2] 张丽菊, 崔凤芝. 127株流感嗜血杆菌分离分型及药敏分析[J]. 山西中医学院学报, 2007, 8(3): 50-51. [本文引用:1]
[3] 李晓双, 邵作峰, 卞超. 106例流感嗜血杆菌分离培养与耐药性的分析[J]. 医学检验与临床, 2007, 18(2): 27-28. [本文引用:1]