Feulgen-EA双重染色固定液应用评价

doi:10.3969/j.issn.1673-8640.2017.08.010

检验医学 ›› 2017, Vol. 32 ›› Issue (8): 704-708.DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2017.08.010

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Feulgen-EA双重染色固定液应用评价

黄荣祥, 余岚岚, 朱晨雁, 何文波, 马亮, 聂琨, 张婧

厦门麦克奥迪医学检验所,福建厦门 361006

收稿日期:2016-05-31 出版日期:2017-08-30 发布日期:2017-09-01
作者简介:null
作者简介：黄荣祥,男,1986年生,学士,主要从事细胞病理学及细胞图像分析的研究。

Application on Feulgen-EA staining fixative

HUANG Rongxiang, YU Lanlan, ZHU Chenyan, HE Wenbo, MA Liang, NIE Kun, ZHANG Jing

Xiamen Motic Medical Laboratory,Xiamen 361006,Fujian,China

Received:2016-05-31 Online:2017-08-30 Published:2017-09-01

摘要/Abstract

摘要：

目的对Feulgen-EA染色再固定环节进行应用评价。方法运用细胞图像分析系统对经过冰醋酸（乙酸）、AF、改良AF、Clarke、Bohm-Sprenger 5种固定液再固定后的细胞切片进行扫描,比较细胞核积分光密度（IOD）、变异系数（CV）、Area的差异,获得适合核DNA再固定的固定液,同时探讨温度对固定的影响,通过EA对细胞浆染色,比较胞浆着色效果。结果 DNA再固定宜选用AF或Bohm-Sprenger固定液反应30 min,当温度过低时,影响DNA的固定,相应地延长固定时间,EA对胞浆染色效果良好。结论 AF、Bohm-Sprenger固定液能满足Feulgen-EA双重染色的要求。

关键词: 染色与标记, 病理学, 图像处理, 计算机辅助, 固定液, Feulgen-EA染色

Abstract:

Objective To investigate Feulgen-EA staining fixative primarily. Methods By image analysis,cells were scanned after fixation by 5 fixatives [glacial acetic acid（acetic acid）,AF,improved AF,Clarke and Bohm-Sprenger],nucleus integrated optical density（IOD）,coefficient of variation（CV）and area were compared,and suitable DNA fixative was obtained. The influence of temperature on fixation was evaluated. The effect of cytoplasmic staining was compared by EA staining. Results DNA fixation may choose appropriately AF or Bohm-Sprenger fixed-liquid reaction for 30 min. When temperature was too low,it may influence on DNA fixation,and the effect of EA to cytoplasmic staining was good. Conclusions AF and Bohm-Sprenger fixatives are suitable for Feulgen-EA double staining.

Key words: Staining and labeling, Pathology, Image processing, Computer assistance, Fixative, Feulgen-EA staining

中图分类号:

R446.1

黄荣祥, 余岚岚, 朱晨雁, 何文波, 马亮, 聂琨, 张婧. Feulgen-EA双重染色固定液应用评价[J]. 检验医学, 2017, 32(8): 704-708.

HUANG Rongxiang, YU Lanlan, ZHU Chenyan, HE Wenbo, MA Liang, NIE Kun, ZHANG Jing. Application on Feulgen-EA staining fixative[J]. Laboratory Medicine, 2017, 32(8): 704-708.

图/表 10

图1 固定时间与2c细胞核IOD变化曲线

图2 固定时间与2c细胞核CV变化曲线

图3 固定时间与2c细胞核Area变化曲线

图4 固定温度与2c细胞核IOD相关直方图

图5 固定温度与2c细胞核CV相关直方图

图6 固定温度与2c细胞核Area相关直方图

图7 巴氏染色效果图（AF固定液,×200）

图8 Feulgen-EA染色效果图（AF固定液,×200）

图9 巴氏染色效果图（Bohm-Sprenger固定液,×200）

图10 Feulgen-EA染色效果图（Bohm-Sprenger固定液,×200）

参考文献 15

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